公开(公告)号：CN115948397A

公开(公告)日：2023-04-11

申请号：CN202211162746.3

申请日：2022-09-23

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陈世豪 ,  潘诗雨 ,  王佳兴 ,  刘茵茵 ,  王德东 ,  方梦雅 ,  李微

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/53 ,  C12N15/55 ,  C12N5/10 ,  C12N5/0786

Abstract: 本发明公开了一种靶向敲除鸡TET2基因的sgRNA及CRISPR/Cas9系统与应用，所述sgRNA核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑4任一所示，本发明还公开了靶向敲除鸡TET2基因的CRISPR‑Cas9系统，以及该系统在敲除鸡TET2基因的细胞株中的应用。本发明通过CRISPR‑Cas9技术首次靶向敲除鸡巨噬细胞系(HD11)的TET2基因，适用于较难转染和抗生素筛选敏感的免疫细胞，且确保了细胞中不含有转基因片段，同时发现敲除TET2基因的HD11细胞具有免疫抑制特征，为鸡免疫抑制机制的研究提供了理想模型。

公开(公告)号：CN119553012A

公开(公告)日：2025-03-04

申请号：CN202411921267.4

申请日：2024-12-25

Applicant: 扬州大学

Inventor： 侯磊 ,  蒋庚红 ,  刘爵 ,  周建卫 ,  王德东

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种核酸组合物、基于RPA‑CRISPR/Cas12a A型塞内卡病毒核酸的检测试剂盒、应用及可视化一步检测方法，所述组合物包括A型塞内卡病毒RPA引物对和crRNA，RPA引物对和crRNA是针对A型塞内卡病毒VP1基因，所述crRNA为基于次优PAM序列设计的能与RPA引物对的扩增产物序列相匹配的RNA序列。基于次优原间隔相邻基元（suboptimal protospacer adjacent motifs,sPAM）设计的特殊crRNA运用于SVA检测，将RPA扩增和CRISPR/Cas12a切割整合到一管中，克服了RPA扩增和Cas12a切割在一个反应管中的不兼容性问题。