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公开(公告)号：CN119391628A
公开(公告)日：2025-02-07
申请号：CN202411354572.X
申请日：2024-09-27
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/075 , C12N5/076 , C12Q1/6888 , C12Q1/6879 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种体细胞性别反转模型建立的方法，S1、分离雌雄性腺体细胞，并进行性别鉴定及培养；S2、确定标记基因：筛选E18.5 d雌雄中高表达差异基因，设计RT‑PCR引物，在分离的性腺体细胞中进行检测；S3、构建反转模型：以性激素为诱导剂，确定有效的反转模型性激素诱导浓度，并利用标记基因定量和流式检测确定构建反转模型。本发明不仅在理论研究上具有重要意义，还具备广阔的应用前景和社会经济效益，对推动相关领域的科技进步和产业发展具有积极的促进作用。
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公开(公告)号：CN113061651A
公开(公告)日：2021-07-02
申请号：CN202110376568.3
申请日：2021-04-08
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/6869 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12Q1/6897
Abstract: 本发明涉及一种LPS感染后检测并调控鸡RIPK2基因甲基化的方法，包括以下步骤：步骤1）、LPS感染鸡巨噬细胞HD11，检测RIPK2基因表达量变化；步骤2）、重亚硫酸氢盐处理LPS感染前后的基因组；步骤3）、鸡RIPK2基因启动子区CpG岛片段PCR扩增和测序分析；步骤4）、5‑氮杂胞苷和M.SssI分别处理转染鸡RIPK2启动子质粒的鸡HD11细胞；步骤5）、5‑氮杂胞苷和M.SssI分别处理鸡HD11细胞，检测RIPK2基因表达量；通过本发明，对缓解应激性病理损伤和提高家禽健康具有重要的实践意义。
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公开(公告)号：CN119061119A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202411227127.7
申请日：2024-09-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6809
Abstract: 本发明公开了一种筛选和研究调节鸡性别决定和分化关键因素功能的方法，通过构建E0‑E18.5的转录组文库，进一步分析性别决定和分化的关键因素，以期深入揭示性别决定的复杂机制。从转录水平上系统的阐述鸡性别决定过程中全基因组水平上的表达和转录情况，并结合小分子激活剂和抑制剂处理E18.5d性腺，通过观察性腺组织切片的形态学变化，qRT‑PCR检测性别相关基因的表达，ELISA检测性腺的性激素分泌变化，论证相关因素对于性别控制的影响，为鸡的性别决定机制的相关研究提供有力的参考，也为后续进一步验证能量代谢和表观遗传修饰在鸡性别决定和分化过程中的功能奠定基础。
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公开(公告)号：CN118979088A
公开(公告)日：2024-11-19
申请号：CN202410927510.7
申请日：2024-07-11
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种筛选鸡原始生殖细胞发生过程中泛素化修饰靶蛋白的方法，包括以下步骤：提取蛋白并进行胰酶消化；对胰酶消化中得到的肽段进行亲和富集；通过LC‑MS/MS分析亲和富集得到的修饰肽段并进行数据库搜索；样品重复性检验和蛋白差异修饰分析；泛素化功能及泛素化修饰靶点分析。本发明能够高效筛选鸡PGCs发生过程中泛素化修饰靶蛋白；方法简便高效，成本低廉；为研究鸡PGCs发生过程中泛素化的调控机制提供研究思路和理论基础，以解决体外获取鸡PGCs数量不足的问题，为家禽PGCs高效应用作铺垫；具有推广生产潜能和经济效益。
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公开(公告)号：CN116855444A
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN202310819378.3
申请日：2023-07-06
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种鸡原始生殖细胞单克隆细胞系建立的方法，属于畜牧学和生物技术领域；通过自制简易口吸管，用FAcs培养基对PGCs进行稀释，用口吸管分选单个PGCs，在5%CO2、饱和湿度的37℃培养箱中进行培养，每三天换一次培养液，建立PGCs的单克隆细胞系；本发明提供的方法可以在普通实验室高效稳定建立鸡PGCs单克隆细胞系，且不需要复杂昂贵的仪器，分选和建系效率高，为研究鸡PGCs生物学特性提供了一种新的途径，为家禽的良种扩繁、基因修饰及修饰后筛选、家禽分子设计育种和种质资源冷冻保存等提供了新的方法、奠定了实验基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114015786A
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN202111348108.6
申请日：2021-11-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , G01N33/58 , G01N33/68 , G01N15/14
Abstract: 本发明涉及一种探究胚胎期肌肉细胞形成时间的方法,利用实时荧光定量PCR、流式细胞分析、间接免疫荧光等技术共同探索肌肉细胞形成时间，方法切实可行，可用以大量分析胚盘内肌肉细胞占多个细胞的比例，以及何时肌肉细胞形成并表达标记蛋白，对研究胚盘发育、肌肉细胞形成、建立肌肉细胞形成调控网络等有重要指导意义，极大地丰富了胚胎发育生物学研究；本发明可推广到采用不同种类家禽的胚胎期胚盘，分析胚盘内各种细胞何时形成并分化发育，为研究整体胚胎发育，解密遗传规律奠定基础；本发明鉴定方法更为简便、灵敏和高效，可以检测胚胎期基因和蛋白的微弱表达，能更加真实地反映目的细胞形成情况，也可以应用于其他禽类研究中。
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公开(公告)号：CN119875997A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202411857778.4
申请日：2024-12-17
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0735 , A61K38/30 , A61P15/08
Abstract: 本发明公开了IGF‑1替代胰岛素在促进鸡原始生殖细胞增殖中的应用。本发明通过IGF‑1替代胰岛素在促进鸡原始生殖细胞增殖中发挥作用，可以明确PI3K‑AKT信号通路是PGCs增殖所必需的，为其他信号通路小分子研究提供理论基础。
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公开(公告)号：CN119307442A
公开(公告)日：2025-01-14
申请号：CN202411576221.3
申请日：2024-11-06
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0735
Abstract: 本发明公开了一种促进鸡原始生殖细胞增殖的无鸡血清培养基及其应用，所述培养基中采用卵转铁蛋白代替鸡血清。本发明公开了一种采用卵转铁蛋白代替PGCs培养体系中鸡血清的作用，可以保持PGCs自我更新，从而为探究稳定的培养体系提供依据；本发明培养基可以避免鸡血清成分不明确造成的不良影响，对各种生长因子的精确使用可提供更佳的培养条件，且降低了培养成本。
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公开(公告)号：CN119020269A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202410927512.6
申请日：2024-07-11
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0735 , C12Q1/02
Abstract: 本发明公开一种研究类泛素化修饰调节鸡原始生殖细胞特性的方法，包括：采用VII‑31和MLN4924处理PGCs；PGCs生物学特性的检测。本发明方法简便高效、特异性强，填补了类泛素化修饰对鸡PGCs特性调节作用研究的空白，为体外长期维持鸡PGCs的生物学特性提供理论基础，以期在体外培养扩增解决体外获取数量不足的问题进而更好地实现鸡PGCs的高效利用；解决缺乏研究类泛素化修饰调节鸡PGCs特性的问题，为制定鸡PGCs体外长期培养扩增方案提供研究基础；采用本方法，可研究类泛素化修饰对鸡PGCs特性的调节作用，便于深入研究鸡PGCs生物学特性维持机制，为PGCs的发生机制研究和具体应用作铺垫。
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公开(公告)号：CN118892113A
公开(公告)日：2024-11-05
申请号：CN202410933465.6
申请日：2024-07-12
Applicant: 扬州大学
IPC: A01N1/02 , C12N5/0735
Abstract: 本发明公开了鸡胚胎期性腺的冷冻保护液、冻存及原始生殖细胞分离培养方法，涉及畜牧学和生物技术领域。冷冻保护液包括A液和B液；其中，A液包括：胎牛血清、CO2独立培养基和GlutaMAX，且胎牛血清、CO2独立培养基和GlutaMAX的体积比为80～90:10～20:1；B液包括：A液和二甲基亚砜，且A液和二甲基亚砜的体积比为4～6:1。冻存及原始生殖细胞分离培养方法包括：鸡胚性腺的获取；鸡胚性腺的冻存；鸡胚性腺的复苏；原始生殖细胞的分离培养。本发明可以将鸡胚胎期性腺冻存后，在合适的时间和地点再进行复苏，对性腺中的PGCs进行培养建系，且冻存、复苏和PGCs建系的效率高，获得的PGCs细胞系依然保持PGCs的生物学特性。
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