肠炎沙门菌ryhB-1和sopE双基因缺失株及其作为减毒疫苗候选株的应用

    公开(公告)号:CN116836900A

    公开(公告)日:2023-10-03

    申请号:CN202310556506.X

    申请日:2023-05-17

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,公开了一种肠炎沙门菌ryhB‑1和sopE双基因缺失株及其作为减毒疫苗的应用,其中的双基因缺失株已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 20221957。该缺失株利用λ‑Red同源重组技术,敲除肠炎沙门菌的非编码小RNA RyhB‑1和侵袭相关靶基因sopE,获得双基因缺失的减毒沙门菌。本发明制备的减毒沙门菌毒力显著降低,具有良好的安全性;攻毒后保护试验表明其具有良好的保护效果可保护鸡群免于发病;鸡群免疫后机体内会诱导全面高效的体液、细胞免疫。本发明为预防禽肠炎沙门菌感染提供了安全、免疫原性好、保护效力高的禽肠炎沙门菌减毒疫苗。

    犬伪中间葡萄球菌性角膜溃疡模型的建立方法

    公开(公告)号:CN111134089B

    公开(公告)日:2022-04-15

    申请号:CN202010106019.X

    申请日:2020-02-20

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及犬伪中间葡萄球菌性角膜溃疡模型的建立方法;实验犬麻醉后,使用聚维酮碘溶液冲洗角膜和结膜囊,使用乳酸钠林格溶液将残留的聚维酮碘溶液冲洗干净,开睑器开睑,实验犬右侧卧保定,调整显微镜焦距以及犬头部位置,确保眼球完全暴露在视野内;吸取伪中间葡萄球菌菌液,在显微镜观察下注射器针头从瞳孔正中央水平线右侧0.3mm处进针,穿过角膜上皮层,于正中角膜基质层注入菌液,按住进针点拔出注射器,按压片刻;取下开睑器,闭合上下眼睑。该方法实验设备简单,操作方法简便,可成功构建犬伪中间葡萄球菌性角膜溃疡模型,重复性好,不会导致实验犬并发感染和死亡等不理想情况的发生,适用范围广。

    一种犬角膜上皮细胞永生化细胞系的构建方法和应用

    公开(公告)号:CN112126627A

    公开(公告)日:2020-12-25

    申请号:CN202011055337.4

    申请日:2020-09-30

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种犬角膜上皮细胞永生化细胞系的构建方法和应用,包括以下步骤:将实验犬麻醉后,采集角膜组织,收集角膜上皮组织,进行上皮细胞原代培养;将纯化后的原代犬角膜上皮细胞进行携带SV40T抗原基因的病毒转染,通过单克隆获得永生化犬角膜上皮细胞。本发明方法建立的细胞易于培养,增殖快,且具有血清依赖性,无肿瘤变,有利于进行角膜相关疾病致病机理、药物开发和疾病防治的体外研究,提供基础材料制备方法。

    一种泛性型惰性载体大肠杆菌及其潜在应用

    公开(公告)号:CN111560341A

    公开(公告)日:2020-08-21

    申请号:CN202010428277.X

    申请日:2020-05-19

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了泛性型惰性载体沙门氏菌S9H及其潜在应用。泛性型惰性载体沙门氏菌S9H是由惰性载体菌S9使用LB固体和液体培养基连续在体外培养传代至第四十代获得,在工作浓度细菌数量下能与人源、鼠源、牛源、猪源和禽源(包括鸡、鸭、鹅、火鸡、鸽子、鹌鹑)血清和全血都不发生非特异性凝集反应,且具有携带和表面表达展呈人源、鼠源、牛源、猪源和禽源(包括鸡、鸭、鹅、火鸡、鸽子、鹌鹑)不同抗原因子的特性,可应用于简便快速检测人和多种类动物抗原或感染抗体的间接凝集试验检测方法的开发,改进和完善现有凝集抗原抗体检测的凝集试验的特异性、敏感性不佳的技术瓶颈,具有广泛的应用价值和市场前景。

    惰性载体间接凝集试验检测系统及其应用

    公开(公告)号:CN111537712A

    公开(公告)日:2020-08-14

    申请号:CN202010400163.4

    申请日:2020-05-12

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了惰性载体间接凝集试验检测系统及其应用,所述间接凝集试验检测系统包括惰性载体菌S9和在其表面展呈表达和携带P抗原因子的复合体S9-P。该惰性载体间接凝集试验检测系统仅携带P抗原因子,成分单一,特异性靶向,与鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌感染鸡的全血或血清在一定浓度条件下产生肉眼可见的阳性颗粒凝集反应,而与非鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌感染的不同背景鸡源血清、全血不出现非特异性交叉凝集反应。该S9-P基于玻板凝集反应操作平台,操作简便,反应灵敏快速,凝集反应颗粒肉眼可见,结果清晰易判,在两分钟内完成测试和结果判定,该S9-P适用于鸡群中鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌感染的靶向特异性检测,在鸡群的现场监测和诊断中具有很好的应用前景。

    一种泛性型惰性载体沙门氏菌及其潜在应用

    公开(公告)号:CN111500504A

    公开(公告)日:2020-08-07

    申请号:CN202010427735.8

    申请日:2020-05-19

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了泛性型惰性载体沙门氏菌S9H及其潜在应用。泛性型惰性载体沙门氏菌S9H是由惰性载体菌S9使用LB固体和液体培养基连续在体外培养传代至第四十代获得,在工作浓度细菌数量下能与人源、鼠源、牛源、猪源和禽源(包括鸡、鸭、鹅、火鸡、鸽子、鹌鹑)血清和全血都不发生非特异性凝集反应,且具有携带和表面表达展呈人源、鼠源、牛源、猪源和禽源(包括鸡、鸭、鹅、火鸡、鸽子、鹌鹑)不同抗原因子的特性,可应用于简便快速检测人和多种类动物抗原或感染抗体的间接凝集试验检测方法的开发,改进和完善现有凝集抗原抗体检测的凝集试验的特异性、敏感性不佳的技术瓶颈,具有广泛的应用价值和市场前景。

    一种惰性载体沙门氏菌及其潜在应用

    公开(公告)号:CN110218668B

    公开(公告)日:2020-04-03

    申请号:CN201910424369.8

    申请日:2019-05-21

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种惰性载体沙门氏菌及其潜在应用,其有望开发成一种新型惰性载体菌,可应用于简便快速检测抗原或感染抗体的间接凝集试验检测方法的开发。所述惰性载体沙门氏菌目前已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC),保藏地址为中国北京,保藏编号为CGMCCNo.17340,保藏日期为2019年3月18日,分类命名为沙门氏菌(Salmonella sp.),菌株代号S9。该沙门氏菌分离自健康鸡群,其惰性载体特性是在较高的工作浓度下的细菌数量与不同遗传背景的多种鸡源血清不发生任何肉眼可见的凝集反应,即与鸡源血清不产生非特异性凝集反应,我们称该沙门氏菌为惰性载体沙门氏菌。本发明为开发新型简便快速间接凝集检测方法提供了一种惰性载体菌和其潜在应用。

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