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公开(公告)号:CN107841488A
公开(公告)日:2018-03-27
申请号:CN201711089938.5
申请日:2017-11-08
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867
CPC classification number: C12N5/0686 , C12N9/0069 , C12N15/85 , C12N2510/00 , C12N2800/107 , C12Y113/12005 , C12Y113/12007
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种能检测NF-κB活化的双荧光素酶报告细胞及其构建方法。所述报告细胞,是引入了NF-κB虫荧光素酶(Fluc)和内参海肾荧光素酶(RLuc)的HEK293细胞。其构建方法包括稳定表达NF-κB FLuc单克隆细胞和稳定表达NF-κB FLuc/TK RLuc的单克隆细胞的步骤。本发明运用高度灵敏的NF-κB虫荧光素酶和内参海肾荧光素酶,依次引入HEK293细胞,通过独特的稳定细胞筛选技术,构建和发明NF-κB双荧光素酶HEK293稳定报告细胞,从而提高和替代现有的NF-κB报告细胞系。
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公开(公告)号:CN107828734A
公开(公告)日:2018-03-23
申请号:CN201711089912.0
申请日:2017-11-08
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N5/0686 , C07K14/705 , C12N5/0603 , C12N15/85 , C12N2510/00 , C12N2800/107
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及稳定表达猪源TLR3受体基因的NF-κB双荧光素酶报告细胞系及其构建方法。该细胞系是指转入了猪源TLR3受体基因的HEK293-NF-κB细胞,所述HEK293-NF-κB细胞是引入了NF-κB虫荧光素酶和内参海肾荧光素酶的HEK293细胞。本发明提供能够用于研究pTLR3活化激活下游NF-κB启动子报告基因检测稳定细胞系。本发明也为RNA-Seq技术高通量筛选pTLR3静默和活化状态下稳定细胞内差异表达基因提供了生物材料,并为进一步研究TLR3的种属特异性奠定了基础和平台。
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公开(公告)号:CN107828732A
公开(公告)日:2018-03-23
申请号:CN201711089724.8
申请日:2017-11-08
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N5/0686 , C07K14/70596 , C12N5/0603 , C12N15/85 , C12N2510/00 , C12N2800/107
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及稳定表达猪源RIG-I受体基因的NF-κB双荧光素酶报告细胞系及其构建方法。该细胞系是指转入了猪源RIG-I(pRIG-I)受体基因的HEK293-NF-κB细胞,所述HEK293-NF-κB细胞是引入了NF-κB虫荧光素酶和内参海肾荧光素酶的HEK293细胞。本发明提供能够用于研究pRIG-I活化激活下游NF-κB启动子报告基因检测稳定细胞系。本发明也为RNA-Seq技术高通量筛选pRIG-I静默和活化状态下稳定细胞内差异表达基因提供了生物材料,并为进一步研究RIG-I的种属特异性奠定了基础和平台。
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公开(公告)号:CN107760653A
公开(公告)日:2018-03-06
申请号:CN201711089622.6
申请日:2017-11-08
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C07K14/70596 , C12N15/65 , C12N15/85
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及稳定表达猪源TLR5受体基因的NF-κB双荧光素酶报告细胞系及其构建方法。该细胞系是指转入了猪源TLR5受体基因的HEK293-NF-κB细胞,所述HEK293-NF-κB细胞是引入了NF-κB虫荧光素酶和内参海肾荧光素酶的HEK293细胞。本发明提供能够用于研究pTLR5活化激活下游NF-κB启动子报告基因检测稳定细胞系。本发明也为RNA-Seq技术高通量筛选pTLR5静默和活化状态下稳定细胞内差异表达基因提供了生物材料,并为进一步研究TLR5的种属特异性奠定了基础和平台。
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公开(公告)号:CN107603954A
公开(公告)日:2018-01-19
申请号:CN201711089723.3
申请日:2017-11-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及稳定表达猪源cGAS受体基因的NF-κB双荧光素酶报告细胞系及其构建方法。该细胞系是指转入了猪源cGAS受体基因的HEK293-NF-κB细胞,所述HEK293-NF-κB细胞是引入了NF-κB虫荧光素酶和内参海肾荧光素酶的HEK293细胞。本发明提供能够用于研究pcGAS活化激活下游NF-κB启动子报告基因检测的稳定细胞系。本发明也为进一步研究pcGAS的功能奠定了生物材料基础,有利于进一步丰富有关pcGAS的研究。
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公开(公告)号:CN107858365A
公开(公告)日:2018-03-30
申请号:CN201711089915.4
申请日:2017-11-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种含有C-端常见蛋白表达标签的Gateway pENTR4中间入门载体及其构建方法。本发明的载体是在pENTR4的多克隆位点C末端的EcoRV位点插入有蛋白表达标签序列。是通过在pENTR4的多克隆位点C末端的EcoRV位点插入蛋白表达标签序列而构建得到。本发明构建的含有C-端常见蛋白表达标签的Gateway pENTR4中间入门载体,能有效地避免N-端蛋白标签和信号肽相互干扰的潜在应用问题。
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公开(公告)号:CN107828735A
公开(公告)日:2018-03-23
申请号:CN201711089936.6
申请日:2017-11-08
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N5/0686 , C07K14/705 , C12N5/0603 , C12N15/85 , C12N2510/00 , C12N2800/107
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及稳定表达猪源NOD2受体基因的NF-κB双荧光素酶报告细胞系及其构建方法。该细胞系是指转入了猪源NOD2受体基因的HEK293-NF-κB细胞,所述HEK293-NF-κB细胞是引入了NF-κB虫荧光素酶和内参海肾荧光素酶的HEK293细胞。本发明提供能够用于研究pNOD2活化激活下游NF-κB启动子报告基因检测稳定细胞系。本发明也为RNA-Seq技术高通量筛选pNOD2静默和活化状态下稳定细胞内差异表达基因提供了生物材料,并为进一步研究NOD2的种属特异性奠定了基础和平台。
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公开(公告)号:CN107603953A
公开(公告)日:2018-01-19
申请号:CN201711089721.4
申请日:2017-11-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及稳定表达猪源TLR7受体基因的NF-κB双荧光素酶报告细胞系及其构建方法。该细胞系是指转入了猪源TLR7受体基因的HEK293-NF-κB细胞,所述HEK293-NF-κB细胞是引入了NF-κB虫荧光素酶和内参海肾荧光素酶的HEK293细胞。本发明提供能够用于研究pTLR7活化激活下游NF-κB启动子报告基因检测稳定细胞系。本发明也为RNA-Seq技术高通量筛选pTLR7静默和活化状态下稳定细胞内差异表达基因提供了生物材料,并为进一步研究TLR7的种属特异性奠定了基础和平台。
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公开(公告)号:CN103923942B
公开(公告)日:2015-12-02
申请号:CN201410193534.0
申请日:2014-05-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明的一种表达猪端粒酶反转酶转座子载体的构建方法与在建立猪永生化细胞系中的应用属于生物技术研究领域,包括猪蛋白翻译延伸因子1a启动子的克隆与转录活性检测、SB转座子表达载体构建及其外源基因整合、猪端粒酶反转录酶cDNA克隆、活性检测以及猪成纤维永生化细胞系建立。与其他方法相比,用本发明转座子载体建立的猪永生化细胞系为非转化正常细胞,不含抗性基因、病毒基因和癌基因,适用于细胞生理功能研究、猪病毒分离培养和疫苗生产。
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公开(公告)号:CN103923942A
公开(公告)日:2014-07-16
申请号:CN201410193534.0
申请日:2014-05-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明的一种表达猪端粒酶反转酶转座子载体的构建方法与在建立猪永生化细胞系中的应用属于生物技术研究领域,包括猪蛋白翻译延伸因子1a启动子的克隆与转录活性检测、SB转座子表达载体构建及其外源基因整合、猪端粒酶反转录酶cDNA克隆、活性检测以及猪成纤维永生化细胞系建立。与其他方法相比,用本发明转座子载体建立的猪永生化细胞系为非转化正常细胞,不含抗性基因、病毒基因和癌基因,适用于细胞生理功能研究、猪病毒分离培养和疫苗生产。
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