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公开(公告)号：CN107190100A
公开(公告)日：2017-09-22
申请号：CN201710647055.5
申请日：2017-08-01
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2563/107 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明提供了一种鉴别肝螺杆菌的荧光定量PCR方法，将包含有PCR引物的反应体系进行荧光定量PCR反应；PCR引物包括上游引物和下游引物；反应体系包括以下组分：上游引物，下游引物，SYBR Premix Ex TaqⅡ，ROX Reference DyeⅡ，样品DNA模版，ddH2O；程序包括：95℃30s，95℃5s，52℃30s，72℃30s，40个循环，95℃15s，60℃1min，95℃15s；当Ct值小于33时，检测出肝螺杆菌，当Ct值大于等于33时，未检测出肝螺杆菌。与常规PCR相比，本发明的方法的灵敏度提高了1000倍。
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公开(公告)号：CN108441514A
公开(公告)日：2018-08-24
申请号：CN201810263671.5
申请日：2018-03-28
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/66 , C12N15/34 , C12N7/01 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒CP204L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法，属于基因工程技术领域。该方法利用腺病毒穿梭载体pKO-FH、pAD-EF1a-GFP，经一系列中间过程，得到重组腺病毒表达质粒pAD-CP204L。将最后得到的线性化重组腺病毒载体质粒转染HEK293细胞；根据腺病毒感染形成的细胞病变筛选重组病毒，最终实现腺病毒包装过程，并通过扩增、浓缩和鉴定得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒，从而实现了CP204L基因在真核细胞中正常表达的目的，为研究基于表达CP204L的腺病毒载体疫苗奠定基础。
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公开(公告)号：CN107227374A
公开(公告)日：2017-10-03
申请号：CN201710646881.8
申请日：2017-08-01
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q2563/107 , C12Q2545/114
Abstract: 本发明提供了一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的引物、试剂盒及鉴定方法，属于分子生物学技术领域。本发明提供的引物适用于16S rRNA荧光定量PCR扩增，并且准确地从肝螺杆菌、胆螺杆菌等多种螺杆菌中鉴别出啮齿类螺杆菌，特异性达100％。本发明还提供了一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的试剂盒及其鉴别方法，所述试剂盒方便准确地鉴定啮齿类螺杆菌的存在，操作简便，无需进行琼脂糖凝胶电泳，只需荧光定量PCR仪即可完成，实现快速、大通量诊断和检测，降低了鉴别时间和检测成本，研究表明本发明提供的这一荧光PCR检测方法，灵敏度达30拷贝。
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公开(公告)号：CN107475298A
公开(公告)日：2017-12-15
申请号：CN201710809678.8
申请日：2017-09-11
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/66 , C12N15/12
CPC classification number: C12N15/86 , C07K14/195 , C12N15/66 , C12N2740/15043
Abstract: 本发明提供了cdtB基因过表达慢病毒载体及其构建方法和包含cdtB基因的慢病毒及其应用，属于基因工程技术领域。一种cdtB基因过表达慢病毒载体pLVX-AcGFP1-N1-cdtB，以pLVX-AcGFP1-N1慢病毒表达载体为基础，在多克隆位点处引入cdtB基因。本发明还提供了含有cdtB基因的慢病毒，利用构建得到的pLVX-AcGFP1-N1-cdtB载体与慢病毒包装体系VSVG、pCMV△R8.2混合，实现慢病毒包装过程，得到能够直接感染真核细胞的慢病毒，从而实现了cdtB基因在真核细胞中正常表达的目的，为进一步了解cdtB基因的功能打好基础。
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