高表达耐拉米夫定HBV病毒肝癌细胞株

    公开(公告)号:CN102807971A

    公开(公告)日:2012-12-05

    申请号:CN201210175021.8

    申请日:2012-05-31

    Inventor: 张继明 张轶俊

    Abstract: 本发明属微生物动物细胞系领域,涉及基于HepG2稳定高表达HBV YVDD变异株细胞系,具体涉及基于HepG2稳定高表达耐拉米夫定HBV病毒肝癌细胞株,尤其涉及高表达耐拉米夫定HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HS204V及其制备方法。该细胞株能持续表达HBsAg及HBeAg且高于Hep2.2.15,胞内有HBV复制,并产生HBV颗粒,细胞上清HBV颗粒水平与Hep2.2.15基本持平,该细胞对LAM不敏感而对ADV敏感;HBV胞内复制水平随LAM浓度上升无明显下降,随ADV浓度上升逐步下降。本发明的细胞株可用于筛选抗HBV药物、研究HBV生物学特点及其与细胞间相互作用的HBV细胞模型。

    基于HepG2HBVrtS202GETV耐药变异株细胞系及其建立方法

    公开(公告)号:CN103820392A

    公开(公告)日:2014-05-28

    申请号:CN201210469842.2

    申请日:2012-11-18

    Inventor: 张轶俊 张继明

    Abstract: 本发明属生物技术、微生物动物细胞系领域,具体涉及基于HepG2?HBV?rtS202G?ETV耐药变异株细胞系及其建立方法,本发明采用HBV真核表达质粒pREP-HBV-YVDD,其载体骨架为pREP10载体,HBV复制子为含cp启动子以及完整HBV前基因组的HBV1.2倍体,并定点诱变为恩替卡韦耐药基因型S202G后插入切除RSV启动子的pREP10构建成HBV真核表达质粒pREP-HBV-S202G;将该质粒转染HepG2细胞后通过潮霉素筛选后检测细胞中HBV复制、特异性抗原的表达及病毒颗粒的产生,并与HepG2.2.15细胞株比较后,获得耐药HBV细胞株HepG2.HS202G,保藏号为CGMCC?No.6393。该细胞系可用于筛选抗药物、研究HBV生物学特点及其与细胞间相互作用的HBV细胞模型。

    一种稳定高复制rtN236T耐ADVHBV变异株细胞系及其用途

    公开(公告)号:CN103361314A

    公开(公告)日:2013-10-23

    申请号:CN201210103594.X

    申请日:2012-04-10

    Inventor: 张继明 张轶俊

    Abstract: 本发明属生物技术、微生物动物细胞系领域,涉及一种稳定高复制rtN236T耐ADV HBV变异株细胞系及其用途。本发明采用HBV真核表达质粒pREP-HBV-WT,定点诱变为阿德福韦耐药基因型N236T后插入切除RSV启动子的pREP10构建成HBV真核表达质粒pREP-HBV-N236T,转染HepG2细胞后通过潮霉素筛选,建立耐药HBV细胞克隆株HepG2.HS236T。该细胞株的保藏编号:CGMCC No.5830,分类命名:人肝癌细胞株。该耐药HBV细胞克隆株pREP-HBV-N236T能持续表达HBsAg及HBeAg,胞内HBV复制较高,并可以产生感染性HBV颗粒。该细胞系表达HBsAg及HBeAg明显高于Hep2.2.15,细胞上清HBV颗粒水平高于HepG2.2.15;能用于筛选抗药物、研究HBV生物学特点及其与细胞间相互作用的HBV细胞模型的建立。

    基于HepG2稳定表达HBV野生株细胞系及其制备方法

    公开(公告)号:CN102816737A

    公开(公告)日:2012-12-12

    申请号:CN201110153531.0

    申请日:2011-06-09

    Inventor: 张继明 张轶俊

    Abstract: 本发明属微生物动物细胞系领域,涉及一种基于HepG2稳定表达HBV野生株细胞系,尤其涉及一种高表达野生型HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HSWT及其制备方法。本发明将HBV真核表达质粒pREP-HBV-WT转染HepG2细胞后,通过潮霉素筛选,检测细胞中HBV复制、特异性抗原的表达及病毒颗粒的产生,获得高表达野生型HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HSWT;所述的细胞株其表达HBsAg、HBeAg水平明显高于HepG2.2.15,表达水平稳定,受培养环境等因素影响少,整合的HBV基因型为B或C基因型,所述的细胞对LAM及ADV均敏感,HBV胞内复制水平随LAM及ADV浓度上升逐步下降。本发明的基于HepG2稳定表达HBV野生株细胞系,可用于中国人群HBV发病或耐药机制的研究和可用于筛选抗HBV药物。

    高表达耐拉米夫定HBV病毒肝癌细胞株

    公开(公告)号:CN102807971B

    公开(公告)日:2014-02-12

    申请号:CN201210175021.8

    申请日:2012-05-31

    Inventor: 张继明 张轶俊

    Abstract: 本发明属微生物动物细胞系领域,涉及基于HepG2稳定高表达HBV YVDD变异株细胞系,具体涉及基于HepG2稳定高表达耐拉米夫定HBV病毒肝癌细胞株,尤其涉及高表达耐拉米夫定HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HS204V及其制备方法。该细胞株能持续表达HBsAg及HBeAg且高于Hep2.2.15,胞内有HBV复制,并产生HBV颗粒,细胞上清HBV颗粒水平与Hep2.2.15基本持平,该细胞对LAM不敏感而对ADV敏感;HBV胞内复制水平随LAM浓度上升无明显下降,随ADV浓度上升逐步下降。本发明的细胞株可用于筛选抗HBV药物、研究HBV生物学特点及其与细胞间相互作用的HBV细胞模型。

    一种稳定表达HBV耐药变异株细胞系及其用途

    公开(公告)号:CN103361315A

    公开(公告)日:2013-10-23

    申请号:CN201210103603.5

    申请日:2012-04-10

    Inventor: 张继明 张轶俊

    Abstract: 本发明属生物技术、微生物动物细胞系领域,涉及一种能够稳定表达HBV耐药变异株细胞系及其用途。本发明采用HBV真核表达质粒pREP-HBV-WT,定点诱变为阿德福韦耐药基因型A181V后插入切除RSV启动子的pREP10构建成HBV真核表达质粒pREP-HBV-A181V,转染HepG2细胞后通过潮霉素筛选,建立耐药HBV细胞克隆株HepG2.HS181V。该细胞株的保藏编号:CGMCC No.5829,分类命名:人肝癌细胞株。该耐药HBV细胞克隆株能持续表达HBsAg及HBeAg,胞内有HBV复制,并可以产生感染性HBV颗粒。该细胞系HepG2.HS181V表达HBsAg及HBeAg明显高于Hep2.2.15,细胞上清HBV颗粒水平低于HepG2.2.15。能用于筛选抗药物、研究HBV生物学特点及其与细胞间相互作用的HBV细胞模型的建立。

Patent Agency Ranking