一种检测并分辨低频突变类型的方法

    公开(公告)号:CN118272502A

    公开(公告)日:2024-07-02

    申请号:CN202410528185.7

    申请日:2024-04-29

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及一种检测并分辨低频突变类型的方法,属于生物医学技术领域。具体地,所述方法包括:步骤1)将含有目标基因的样品、DNA聚合酶、针对所述目标基因中的待检测区域的寡核苷酸集和针对所述目标基因中的待检测区域的荧光探针集混合;和步骤2)对上述步骤1)获得的混合物进行qPCR扩增,并采集扩增过程中所述荧光探针对应荧光通道的信号,并确定对应的循环阈值(Ct),从而判断是否存在对应的突变类型。本发明通过联合使用特定设计的引物、Blocker序列和荧光探针,结合具有5’至3’端的外切核酸酶活性的DNA聚合酶进行荧光定量PCR,可以检出极低含量的突变,并且还能读出同一个位点的突变类型,例如可以读出突变的碱基的类型。

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