公开(公告)号：CN101712961A

公开(公告)日：2010-05-26

申请号：CN200910073445.1

申请日：2009-12-17

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 任南琪 ,  赵鑫 ,  邢德峰 ,  付娜 ,  张璐

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/70

Abstract: 一种铁氢化酶基因及其编码的氨基酸序列和异源表达系统，它涉及一种氢化酶基因及其编码的氨基酸序列和异源表达系统。本发明铁氢化酶基因序列如SEQ ID NO：1所示。本发明铁氢化酶基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。铁氢化酶基因异源表达系统按以下步骤构建：一、提取总DNA；二、PCR扩增；三、酶切；四、酶切载体；五、连接；六、转化感受态细胞；七、重组子重组质粒转化入感受态细胞。本发明铁氢化酶基因无需基因改造可直接与原核表达载体pET 28a构建异源表达系统，含重组子pET28a-hydA的E.coliBL21菌液经IPTG诱导，经SDS-PAGE检测能表达分子量为63KD左右的一条外源蛋白，培养24小时后产生可明显检测的H2。

公开(公告)号：CN101712961B

公开(公告)日：2012-02-08

申请号：CN200910073445.1

申请日：2009-12-17

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 任南琪 ,  赵鑫 ,  邢德峰 ,  付娜 ,  张璐

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/70

Abstract: 一种铁氢化酶基因及其编码的氨基酸序列和异源表达系统，它涉及一种氢化酶基因及其编码的氨基酸序列和异源表达系统。本发明铁氢化酶基因序列如SEQ ID NO：1所示。本发明铁氢化酶基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。铁氢化酶基因异源表达系统按以下步骤构建：一、提取总DNA；二、PCR扩增；三、酶切；四、酶切载体；五、连接；六、转化感受态细胞；七、重组子重组质粒转化入感受态细胞。本发明铁氢化酶基因无需基因改造可直接与原核表达载体pET 28a构建异源表达系统，含重组子pET28a-hydA的E.coliBL21菌液经IPTG诱导，经SDS-PAGE检测能表达分子量为63KD左右的一条外源蛋白，培养24小时后产生可明显检测的H2。