公开(公告)号：CN117192114A

公开(公告)日：2023-12-08

申请号：CN202311249236.4

申请日：2023-09-26

Applicant: 吉林大学

Inventor： 顾敬敏 ,  康汉莉 ,  张晓光 ,  周雨晴 ,  冀亚路 ,  刘潇

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/533 ,  G01N33/58 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62

Abstract: 本发明公开了一种基于免疫磁珠的金黄色葡萄球菌荧光检测试剂盒及方法，其属于微生物检测技术领域，该金黄色葡萄球菌荧光检测试剂盒包括磁珠、裂解酶LysGH15突变体以及融合EGFP的荧光蛋白54AE；所述裂解酶LysGH15突变体的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示；所述荧光蛋白54AE的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。本发明通过将噬菌体裂解酶LysGH15突变体包被在磁珠上对目标菌株进行捕获，随后用构建的荧光蛋白54AE对其进行标记，通过荧光强度下降率，建立起一种对样品中金黄色葡萄球菌进行定量检测的方法。

公开(公告)号：CN115656508A

公开(公告)日：2023-01-31

申请号：CN202211338000.3

申请日：2022-10-28

Applicant: 吉林大学

Inventor： 顾敬敏 ,  刘潇 ,  乔颖涵 ,  孙嘉蕙 ,  韩文瑜 ,  雷连成

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/558 ,  G01N33/58 ,  G01N33/573 ,  G01N33/532 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明提供一种金黄色葡萄球菌的快速检测方法，涉及细菌检测领域。本发明包括如下步骤：Step1：对LysGH15‑54A进行纯化表达。Step2：制备金标抗体复合物；首先，为胶体金标记抗体选择最适pH值；其次，测定胶体金标记抗体最低稳定量；接着，胶体金探针的制备与纯化；Step3：组装胶体金试纸条，胶体金试纸条由PVC底板、NC膜、吸水纸、金标垫以及样品垫组成；Step4：进行性能测试，包括敏感性测试、特异性检测。本发明操作简单、结果易得容易分析，检测所需的时间短，可以实现样品随到随检，由于裂解酶的识别功能很强，可以在较短的时间完成样品中目标菌的识别检测。

公开(公告)号：CN114034861A

公开(公告)日：2022-02-11

申请号：CN202111371526.7

申请日：2021-11-18

Applicant: 吉林大学

Inventor： 顾敬敏 ,  刘潇 ,  张晓光 ,  韩文瑜

IPC: G01N33/569 ,  G01N21/31

Abstract: 本发明提供一种噬菌体裂解酶结合BLI快速检测S.aureus的方法，涉及金黄色葡萄球菌检测技术领域，解决了S.aureus传统检测方法步骤多、操作繁琐、耗时长的问题。包括以下步骤：一是传感器活化，二是裂解酶的固定化，三是将AR2G传感器封闭，四是样品检测及结果判断。本发明操作简单、实时监测、无标记、结果易得；实现样品随到随检，可以在较短的时间完成样品中目标菌的识别检测，根据样品中所含金黄色葡萄球菌浓度的不同，单纯的样品检测时间可以控制在数十秒到十几分钟之内；裂解酶对目标菌可以特异的识别，保证该方法的特异性，排除非目标菌的潜在干扰；通过信号曲线有无峰的出现可以进行死活菌的区分；裂解酶易于获得，方便制备。