公开(公告)号：CN102408477A

公开(公告)日：2012-04-11

申请号：CN201110143477.1

申请日：2011-05-31

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 胡薇 ,  田玉华 ,  胡锐 ,  孙玉成 ,  王秀然 ,  杨美英 ,  李雨婷 ,  李沐 ,  李婷 ,  刘宁 ,  孟星宇

IPC: C07K14/435 ,  C07K1/36 ,  C07K1/30 ,  C07K1/20 ,  C07K1/16 ,  A61K38/17 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了鹿角脱盘蛋白多肽，它是鹿角脱盘经胶体匀浆，乙醇沉淀，真空旋转蒸发及冷冻干燥得到鹿角脱盘总肽粗提物，再经Sephadex G-25凝胶过滤层析除盐，最终得到的蛋白质含量为91.8％的总肽，对小鼠乳腺癌细胞的增殖具有明显抑制作用，其中浓度为30μg/mL时，作用72h后抑制率最高为69.2％；利用层析技术分离纯化得到的鹿角脱盘11kDa蛋白多肽，纯度达98.8％，精确分子量为11329Da；MTT结果对MA782细胞增殖具有明显抑制作用，其中浓度为10μg/mL时，72h后的最高抑制率为53.3％。

公开(公告)号：CN102586257A

公开(公告)日：2012-07-18

申请号：CN201210018003.9

申请日：2012-01-20

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 胡薇 ,  孟星宇 ,  李婷 ,  李沐 ,  胡锐 ,  王健 ,  李雨婷 ,  田玉华 ,  刘宁

IPC: C12N15/12 ,  C07K14/475 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开了一种梅花鹿IGF-1成熟肽的基因，并在上游引物5端添加EcoR I酶切位点和编码Asn的碱基序列，下游引物5端添加Hind III酶切位点和终止密码子序列，克隆了表达梅花鹿IGF-1成熟肽的碱基序列234bp基因，构建了表达载体pET-32a-IGF-1，在大肠杆菌Rosetta中诱导表达，获得了梅花鹿IGF-1成熟肽。引入EcoR I、Hind III酶切位点，在天然的IGF-1前面添加一个Asn，形成一个羟胺的特异裂解部位，降低了蛋白切割成本，减少额外氨基酸序列对蛋白复性的影响，保持蛋白在天然条件下的状态；采用pET-32a作表达载体在大肠杆菌Rosetta中表达，蛋白含量可达菌体可溶蛋白的50％以上，通过MTT法检测，能提高NIH3T3细胞增殖速度。