一种HIV-1整合酶表达菌株及整合酶抑制剂体外筛选模型

    公开(公告)号:CN101671646B

    公开(公告)日:2013-01-02

    申请号:CN200910070794.8

    申请日:2009-10-14

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 一种HIV-1整合酶表达菌株及整合酶抑制剂体外筛选模型。本模型首先利用基因工程技术构建HIV-1整合酶可溶性表达质粒和带有整合酶最适底物LTR序列的质粒,将构建好的重组质粒pET28a-IN转化进入商品化大肠杆菌BL21中得到整合酶表达菌株;然后大规模培养,分离纯化整合酶,作用于底物质粒,加入样品测定活性。此检测模型克服了已有ELISA检测法成本高,本底高,影响因素多等缺点,可在体外大量而快速的对各种天然或化学合成的整合酶抑制剂进行初步筛选,是一种快速,灵敏,干扰因素少,成本低的HIV-1整合酶抑制剂体外筛选模型。

    一种人猴嵌合免疫缺陷病毒株及其应用

    公开(公告)号:CN102465117A

    公开(公告)日:2012-05-23

    申请号:CN201010546806.2

    申请日:2010-11-17

    Abstract: 本发明一种人猴嵌合免疫缺陷病毒株及其应用,涉及以引入外来基因材料修饰的病毒,它是携带中国HIV-1 B’/C重组亚型包膜蛋白基因片断的人猴免疫缺陷病毒SHIV-XJN0363B8,其分类命名:免疫缺陷病毒,拉丁文学名:Lentivirus,保藏日期:2010年10月15日,保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号:CGMCC No.4243。用该病毒株构建的SHIV-XJN0363B8/中国恒河猴艾滋病模型,可以有效模拟HIV-1感染早期的病毒复制特点,并在研究HIV-1体内的致病机制以及在我国艾滋病疫苗和艾滋病抗病毒药物等生物制剂的有效性评价中发挥作用。

    一种HIV-1整合酶表达菌株及整合酶抑制剂体外筛选模型

    公开(公告)号:CN101671646A

    公开(公告)日:2010-03-17

    申请号:CN200910070794.8

    申请日:2009-10-14

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 一种HIV-1整合酶表达菌株及整合酶抑制剂体外筛选模型。本模型首先利用基因工程技术构建HIV-1整合酶可溶性表达质粒和带有整合酶最适底物LTR序列的质粒,将构建好的重组质粒pET28a-IN转化进入商品化大肠杆菌BL21中得到整合酶表达菌株;然后大规模培养,分离纯化整合酶,作用于底物质粒,加入样品测定活性。此检测模型克服了已有ELISA检测法成本高,本底高,影响因素多等缺点,可在体外大量而快速的对各种天然或化学合成的整合酶抑制剂进行初步筛选,是一种快速,灵敏,干扰因素少,成本低的HIV-1整合酶抑制剂体外筛选模型。

    以增强型绿色荧光蛋白为报告基因的BIV指示细胞系

    公开(公告)号:CN101100675B

    公开(公告)日:2011-01-19

    申请号:CN200710057672.6

    申请日:2007-06-19

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 一株指示牛免疫缺陷病毒BIV感染的细胞系及其应用。该细胞系可以在BIV感染的特定条件下表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP),从而通过检测该蛋白的表达来间接指示牛免疫缺陷病毒的感染。该细胞系(其保藏号为CGMCC No.2050)的构建过程:首先构建成一个可以应答牛免疫缺陷病毒感染的具有序列表所示核苷酸序列的报告质粒,之后,将该质粒转染BHK-21细胞,筛选稳定表达的细胞系并单克隆化;挑选无本底表达但经过BIV病毒攻击后高表达EGFP的阳性克隆即为BIV的指示细胞系。本发明具有快速简便且可以实时指示BIV感染和BIV反式激活因子激活作用的特点。

    以萤火虫荧光素酶为报告基因的BIV感染性指示细胞系

    公开(公告)号:CN101100674B

    公开(公告)日:2010-11-03

    申请号:CN200710057671.1

    申请日:2007-06-19

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 一株指示牛免疫缺陷病毒(Bovine Immunodeficiency Virus,BIV)感染的细胞系及其应用。该细胞系可以在BIV感染的特定条件下表达萤火虫荧光素酶(firefly luciferase),从而通过检测萤火虫荧光素酶的活性来间接指示牛免疫缺陷病毒的感染。该细胞系(其保藏号为CGMCC No.2049)的构建过程:萤火虫荧光素酶的基因插入到一种特异应答牛免疫缺陷病毒反式激活因子的应答元件下游构建指示质粒;将该质粒转染BHK-21细胞,筛选稳定表达的细胞系并单克隆化;挑选经过BIV病毒攻击后萤火虫荧光素酶的活性明显增高的阳性克隆即为BIV的指示细胞系。本发明具有可以定量指示BIV感染和BIV反式激活因子激活作用的特点。

    以萤火虫荧光素酶为报告基因的BIV感染性指示细胞系

    公开(公告)号:CN101100674A

    公开(公告)日:2008-01-09

    申请号:CN200710057671.1

    申请日:2007-06-19

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 一株指示牛免疫缺陷病毒(Bovine Immunodeficiency Virus,BIV)感染的细胞系及其应用。该细胞系可以在BIV感染的特定条件下表达萤火虫荧光素酶(firefly luciferase),从而通过检测萤火虫荧光素酶的活性来间接指示牛免疫缺陷病毒的感染。该细胞系(其保藏号为CGMCC No.2049)的构建过程:萤火虫荧光素酶的基因插入到一种特异应答牛免疫缺陷病毒反式激活因子的应答元件下游构建指示质粒;将该质粒转染BHK-21细胞,筛选稳定表达的细胞系并单克隆化;挑选经过BIV病毒攻击后萤火虫荧光素酶的活性明显增高的阳性克隆即为BIV的指示细胞系。本发明具有可以定量指示BIV感染和BIV反式激活因子激活作用的特点。

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