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公开(公告)号：CN113801868B
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202111085704.X
申请日：2021-09-16
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明涉及檀香烯合酶突变酶及其在合成檀香烯中的应用。具体涉及的突变酶有SanSyn(Q527A)、SanSyn(S533A)、SanSyn(S533Q)、SanSyn(Q527A&S533A)，它们分别是将第527位的谷氨酰胺突变为丙氨酸，第533位的丝氨酸突变为丙氨酸、谷氨酰胺以及第527位的谷氨酰胺、533位的丝氨酸均突变为丙氨酸。以葡萄糖为碳源，在宿主大肠杆菌DH5α中合成α‑檀香烯的方法，主要包括构建重组质粒pETDuet‑SanSyn(Q527A)、pETDuet‑SanSyn(S533A)、pETDuet‑SanSyn(S533Q)、pETDuet‑SanSyn(Q527A&S533A)、pMVA；构建大肠杆菌重组菌株，进一步发酵培养，本发明涉及的技术方案显著提高了α‑檀香烯的产量，蛋白可溶性表达也有所提高。为进一步代谢工程改造大肠杆菌生产α‑檀香烯奠定了基础。对萜烯类合酶的改造工作提供参考。
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公开(公告)号：CN113501746B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202110682423.6
申请日：2021-06-21
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种大孔树脂在分离香叶醇中的应用及提取分离香叶醇的方法，所述大孔树脂为XAD4大孔树脂，利用大孔树脂从发酵液中提取分离香叶醇的方法，包括，在全细胞催化合成香叶醇的过程中，在发酵液中加入有机溶剂，离心，得到预处理液；将预处理的XAD4大孔树脂加入到预处理液中，吸附处理；将吸附了香叶醇的大孔树脂收集，加入到洗脱液中进行洗脱，得到香叶醇洗脱液；将洗脱液浓缩，干燥，得到香叶醇。本发明从全细胞催化的发酵液中提取纯化获得香叶醇，克服了发酵产物香叶醇原位提取分离的问题，同时具有工艺简单、操作简单、环境友好和纯化效率高等特点，获得的香叶醇纯度高，该方法适用于工业化生产。
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公开(公告)号：CN115927288A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202210896280.3
申请日：2022-07-28
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种固定化脂肪TLL酶及固体结合肽在其固定化中的应用，采用特定类型的固体结合肽与载体进行结合，与载体结合能力弱的杂质组分可在固定化后通过缓冲液的反复洗涤去除，载体上吸附的杂质数量相对较少，达到纯化的效果，有效保证了杂质的脱除效果和固定化酶的质量。本发明制备方法工艺条件温和、能耗低、操作简便、流程简单，有效地克服了传统的吸附法存在酶和固体载体表面吸附不牢，酶易流失的缺点。且通过本发明制备得到的固定化酶在热稳定性和pH稳定性方面相较于游离酶都有了一定的提升。
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公开(公告)号：CN114984217A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210701245.1
申请日：2022-06-21
Applicant: 南京林业大学
IPC: A61K41/00 , A61K31/337 , A61K9/51 , A61K47/42 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种共负载紫杉醇和锰酞菁的适配体铁蛋白纳米粒的制备方法及应用，共负载紫杉醇和锰酞菁的适配体铁蛋白纳米粒的制备方法为：通过化学偶联的方法将AS1411修饰在铁蛋白外表面；并通过温度法将紫杉醇与锰酞菁两种药物共负载在适配体铁蛋白内。本发明修饰了适配体AS1411的铁蛋白纳米载药系统，不仅增强了纳米粒子的靶向性，而且共负载的两种药物结合了化学治疗与光动力治疗，提高了肿瘤细胞的抑制效果，为后续药物靶向肿瘤细胞治疗提供了非常好的载体模型，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114668771A
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN202210273421.6
申请日：2022-03-18
Applicant: 南京林业大学
IPC: A61K31/704 , A61K31/56 , A61K9/51 , A61K47/42 , A61P35/00
Abstract: 本发明提供了一种共负载两种药物的铁蛋白载药纳米粒的制备方法及应用，此纳米粒通过对肿瘤细胞转铁蛋白受体1(TfR1)的靶向性有效地递送两种药物，相比递送单一药物，本方法可进一步增强抗肿瘤疗效和减少耐药性的产生，并且本发明通过铁蛋白将两种药物共同装载，步骤简单，保留铁蛋白的原有结构完整，具有很好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113817620A
公开(公告)日：2021-12-21
申请号：CN202110864275.X
申请日：2021-07-29
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种甲酯诱导的双启动子毕赤酵母工程菌的构建及其应用，其包括如下步骤：构建表达载体、插入信号肽、插入启动子、更换表达载体中的信号肽、更换表达载体中的启动子、挑选高表达菌株、获得双启动子菌株。本发明的甲酯诱导工艺简单、安全且产量高，降低了脂肪酶的生产成本，具有良好的工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN112457382B
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202011462595.4
申请日：2020-12-14
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种紫花苜蓿植物铁蛋白的表达纯化方法及其应用。紫花苜蓿植物铁蛋白的表达纯化方法，包括重组表达质粒、重组蛋白的表达和蛋白的纯化；重组表达质粒时，所用质粒为pET‑20b(+)，将紫花苜蓿植物铁蛋白基因序列克隆至pET‑20b(+)质粒的NdeI和XhoI酶切位点之间，得含目的基因的重组质粒。本发明紫花苜蓿植物铁蛋白的表达纯化方法，得到的紫花苜蓿植物铁蛋白呈球形笼状结构，分子量约为28kDa，直径约为12±0.5nm，水溶性好、热力学稳定性高，分散均一。作为一种新型的植物铁蛋白，为生物活性物水溶性、稳定性和生物利用度等的提高，提供了一种新型纳米载体，在食品、医疗、保健等方面有良好的应用前景，具有很高的应用价值。
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公开(公告)号：CN110075154B
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN201910479217.8
申请日：2019-06-04
Applicant: 南京林业大学
IPC: A61K36/48 , A61K129/00
Abstract: 本发明提供了一种基于深度共熔溶剂(DESs)从黑荆树树皮中提取皂苷类活性成分的方法，属于植物提取技术领域；所述方法包括以下步骤：1)将深度共熔溶剂的水溶液和黑荆树树皮粉末以5～20mL：1g的液料比混合获得混合料液；2)将步骤1)中所述混合料液置于35～65℃充分溶解20～60min后，进行固液分离，收集上清组分即为皂苷类活性成分；所述深度共熔溶剂为氢键受体和氢键供体的共熔混合物；所述氢键受体为氯化胆碱；所述氢键供体为柠檬酸、葡萄糖和丙三醇中的一种或几种。所述方法提取的皂苷类活性成分得率最高，比传统有机溶剂提取方法高50％以上，比超声波提取方法高30％以上，是一种低温、低耗能、绿色、高效的提取方法。
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公开(公告)号：CN110904134A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911292338.8
申请日：2019-12-16
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明提供了一种表达芳樟醇合成酶的融合基因及其应用，涉及代谢工程菌技术领域，所述融合基因自5’端至3’端依次包括启动子-核糖体结合位点RBS-融合标签-芳樟醇合成酶基因bLIS。本发明利用所述融合基因构建了多种不同的重组表达载体，并转化具有GPP合成能力的大肠杆菌，构建工程菌。经验证，所述融合基因、重组表达载体可显著提高芳樟醇合成酶的表达量和可溶性表达，将改造的重组表达载体转入具有GPP合成能力的大肠杆菌重组菌，可有效提高生产菌的芳樟醇产量，在芳樟醇的生物合成过程中具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN106518831B
公开(公告)日：2018-07-20
申请号：CN201610946727.8
申请日：2016-10-26
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07D311/62
Abstract: 本发明公开了一种植物原花色素二聚体、三聚体快速分离制备方法，将富含原花色素植物原料的乙醇水溶液提取物，经液‑液萃取后，过凝胶柱，再经FPLC或HSCCC分离，分别得到原花色素二聚体、三聚体成分。本发明的工艺适用于不同来源下的原花色素二聚体和三聚体的分离纯化，具有普适性。本发明的工艺方法得到的原花色素二聚体、三聚体纯度高，方法安全性强、操作简单、耗时短、生产成本低、环境友好、符合绿色化学标准，适用于工业化生产，具有极大的商业价值。
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