公开(公告)号：CN102084849A

公开(公告)日：2011-06-08

申请号：CN201010550230.7

申请日：2010-11-19

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 叶建仁 ,  朱丽华 ,  吴小芹 ,  季锦衣

IPC: A01K67/033

Abstract: 本发明公开了一种制备无细菌松材线虫的方法。该制备无细菌松材线虫的方法包括：培养松材线虫；制备纯净松材线虫卵；用15%H2O2浸泡50-60min松材线虫卵；孵化松材线虫；培养松材线虫并进行无细菌鉴定，即制备出无细菌松材线虫。本发明的制备无细菌松材线虫的方法，利用松材线虫卵具有粘附于玻璃器皿上的特性，采用小培养皿进行卵的收集，进而用新配制的15%H2O2进行灭菌处理，获得无菌松材线虫卵，无菌卵孵化并在灰葡萄孢上大量繁殖后获得无细菌的松材线虫。在无菌条件下，用所获得的无细菌松材线虫对赤松无菌组织培养幼苗进行接种试验显示，无细菌松材线虫接种依然能使无菌苗发生萎蔫。表明采用该方法对松材线虫进行无细菌化并未使其失去致病性，是一种简易且成功的方法。

公开(公告)号：CN102084849B

公开(公告)日：2012-06-13

申请号：CN201010550230.7

申请日：2010-11-19

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 叶建仁 ,  朱丽华 ,  吴小芹 ,  季锦衣

IPC: A01K67/033

Abstract: 本发明公开了一种制备无细菌松材线虫的方法。该制备无细菌松材线虫的方法包括：培养松材线虫；制备纯净松材线虫卵；用15%H2O2浸泡50-60min松材线虫卵；孵化松材线虫；培养松材线虫并进行无细菌鉴定，即制备出无细菌松材线虫。本发明的制备无细菌松材线虫的方法，利用松材线虫卵具有粘附于玻璃器皿上的特性，采用小培养皿进行卵的收集，进而用新配制的15%H2O2进行灭菌处理，获得无菌松材线虫卵，无菌卵孵化并在灰葡萄孢上大量繁殖后获得无细菌的松材线虫。在无菌条件下，用所获得的无细菌松材线虫对赤松无菌组织培养幼苗进行接种试验显示，无细菌松材线虫接种依然能使无菌苗发生萎蔫。表明采用该方法对松材线虫进行无细菌化并未使其失去致病性，是一种简易且成功的方法。