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公开(公告)号：CN108949908B
公开(公告)日：2019-12-27
申请号：CN201810768488.0
申请日：2018-07-13
Applicant: 南京农业大学 , 南京农业大学淮安研究院
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6895 , C12Q1/04 , C12R1/885
Abstract: 本发明公开了一种两步基因组比较法设计贵州木霉NJAU 4742定量PCR特异性引物的方法。本发明首先将NJAU 4742全基因组序列在NCBI和JGI数据库中比对，选出没有匹配的大于500bp的基因组片段，再将筛选得到的片段与同种菌株916的全基因组比对，设计出系列具独特碱基的引物序列。同时，还选用gfp标记菌株gfp‑NJAU 4742中插入的标记片段设计的三对引物作为对基于基因组设计的引物特异性的检验标准。通过同属不同种菌株扩增特异性检验、土壤添加再检测、盆栽土壤实际检测等步骤，筛选出最优的定量PCR引物。本发明的引物设计方法和设计的菌株特异性引物能够为其他菌株的定量PCR特异性引物设计和贵州木霉NJAU 4742的定量提供方法。
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公开(公告)号：CN108949908A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810768488.0
申请日：2018-07-13
Applicant: 南京农业大学 , 南京农业大学淮安研究院
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6895 , C12Q1/04 , C12R1/885
Abstract: 本发明公开了一种两步基因组比较法设计贵州木霉NJAU 4742定量PCR特异性引物的方法。本发明首先将NJAU 4742全基因组序列在NCBI和JGI数据库中比对，选出没有匹配的大于500bp的基因组片段，再将筛选得到的片段与同种菌株916的全基因组比对，设计出系列具独特碱基的引物序列。同时，还选用gfp标记菌株gfp‑NJAU 4742中插入的标记片段设计的三对引物作为对基于基因组设计的引物特异性的检验标准。通过同属不同种菌株扩增特异性检验、土壤添加再检测、盆栽土壤实际检测等步骤，筛选出最优的定量PCR引物。本发明的引物设计方法和设计的菌株特异性引物能够为其他菌株的定量PCR特异性引物设计和贵州木霉NJAU 4742的定量提供方法。
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公开(公告)号：CN111394261A
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN202010378203.X
申请日：2020-05-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一株耐盐碱拟棘孢木霉及其应用。拟棘孢木霉(Trichoderma asperelloides)TUCIM 10320，于2020年4月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC 19612。拟棘孢木霉TUCIM 10320可耐受1.5M(即8％)盐浓度引起的盐胁迫和pH值达9.0的碱胁迫，具有较好的耐盐碱能力。在不同盐浓度胁迫下，拟棘孢木霉TUCIM 10320解除盐对植物生长抑制作用的影响，相对于不接菌对照，接种TUCIM 10320在NaCl含量0.5％和0.75％条件下分别提高作物生物量30％和62％，促进作物根系伸长，侧根分化。
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公开(公告)号：CN103483057A
公开(公告)日：2014-01-01
申请号：CN201310386126.2
申请日：2013-08-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种植物促生诱抗剂及其制备和使用方法，属于生物技术领域。通过对哈茨木霉次生代谢物的分离纯化和活性研究，开发出一种可促进植物生长并可诱导植物产生系统抗性的液态制剂。该促生诱抗剂以木霉代谢物Harzianolide(C13H18O3)为主要活性成分，含量0.1～1mgkg-1，辅以营养元素包括Ca(NO3)24H2O200～250mgkg-1、KNO3150～160mgkg-1、NH4H2PO425～30mgkg-1、MgSO47H2O120～130mgkg-1、Fe-EDTA4～5mgkg-1、H3BO40.3～0.5mgkg-1、MnCl44H2O0.2～0.3mg kg-1而制成，pH6.3～6.8。该促生诱抗剂以灌根或喷施的方式施用，可显著提高番茄苗的生物量30％以上(干重计)，促进番茄苗快速生长，同时能诱导和提高番茄苗活性氧有关的功能酶活性，增强相关防御基因表达量和番茄植株系统抗性。本发明具有制备简单、施用灵活、对环境友好、适于规模化生产等特点。
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公开(公告)号：CN111621424B
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202010377558.7
申请日：2020-05-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一株耐盐碱的新木霉及其应用。新木霉TUCIM 10301,保藏编号为CGMCC 19611。该菌株是木霉属(Trichoderma sp.)的新种，最终命名为滩涂木霉(Trichoderma arenerea sp.nov.)。滩涂木霉TUCIM 10301可耐受1.5M(即8％)盐浓度引起的盐胁迫和pH值达9.0的碱胁迫，具有较好的耐盐碱能力。在不同盐浓度胁迫下，滩涂木霉TUCIM 10301解除盐对植物生长抑制作用的影响，相对于不接菌对照，接种TUCIM 10301在NaCl含量0.5％和0.75％条件下分别提高作物生物量37％和81％，促进作物根系伸长，侧根分化。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111394261B
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN202010378203.X
申请日：2020-05-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一株耐盐碱拟棘孢木霉及其应用。拟棘孢木霉(Trichoderma asperelloides)TUCIM 10320，于2020年4月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC 19612。拟棘孢木霉TUCIM 10320可耐受1.5M(即8％)盐浓度引起的盐胁迫和pH值达9.0的碱胁迫，具有较好的耐盐碱能力。在不同盐浓度胁迫下，拟棘孢木霉TUCIM 10320解除盐对植物生长抑制作用的影响，相对于不接菌对照，接种TUCIM 10320在NaCl含量0.5％和0.75％条件下分别提高作物生物量30％和62％，促进作物根系伸长，侧根分化。
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公开(公告)号：CN111621424A
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN202010377558.7
申请日：2020-05-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一株耐盐碱的新木霉及其应用。新木霉TUCIM 10301,保藏编号为CGMCC 19611。该菌株是木霉属(Trichoderma sp.)的新种，最终命名为滩涂木霉(Trichoderma arenerea sp.nov.)。滩涂木霉TUCIM 10301可耐受1.5M(即8％)盐浓度引起的盐胁迫和pH值达9.0的碱胁迫，具有较好的耐盐碱能力。在不同盐浓度胁迫下，滩涂木霉TUCIM 10301解除盐对植物生长抑制作用的影响，相对于不接菌对照，接种TUCIM 10301在NaCl含量0.5％和0.75％条件下分别提高作物生物量37％和81％，促进作物根系伸长，侧根分化。
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公开(公告)号：CN105732781A
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201610235081.2
申请日：2016-04-15
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种促进哈茨木霉根表定殖的蛋白及其应用，属于应用微生物技术领域。本发明首次发现了HFB小蛋白家族及其参与调控哈茨木霉在植物根表定殖的功能，研究表明，该家族蛋白的存在对哈茨木霉在根表的定殖具有显著的正调控作用。通过酵母异源表达、融合蛋白等技术使得该类蛋白在毕赤酵母中表达并分泌。蛋白经纯化富集后，外源添加入水培种植体系中，可在根表形成特殊的蛋白包膜，改变根表的亲/疏水性，促进植物生防促生菌哈茨木霉的快速定殖，较不添加蛋白的对照组48小时内定殖量增加110％?180％。本发明可有效解决以木霉为主的微生物制剂及相关生物肥料应用中功能菌定殖效果不佳、田间应用效果不稳定的问题。
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公开(公告)号：CN114806901B
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202210449442.9
申请日：2022-04-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种harzianic acid高产木霉菌株的构建方法，（1）以野生型木霉菌株基因组DNA为模板进行PCR扩增，获取hacI编码序列上游片段和hacI编码区部分片段，分别命名为UF和DF；（2）以质粒pUC19‑hph‑Ptef1为模板进行PCR扩增，获取包含潮霉素B磷酸转移酶元件hph和里氏木霉QM6a中tef1基因启动子序列的片段Ptef1，命名为hph‑Ptef1；（3）利用重叠PCR方法将上述3个片段按以下顺序连接，UF、hph‑Ptef1、DF获得超表达元件，命名为UF‑hph‑Ptef1‑DF；（4）将步骤（3）中超表达元件转入木霉菌的原生质体中，经潮霉素B筛选、PCR验证和HPLC检测后，获得高产harzianic acid的木霉菌株OEhacI。本发明的方法构建的harzianic acid高产菌株，在发酵4天即可在常规培养基PDB中摇瓶产生大量harzianic acid，从而为规模化生产harzianic acid提供有效开发技术和相应工程生产菌。
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公开(公告)号：CN114806901A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210449442.9
申请日：2022-04-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种harzianic acid高产木霉菌株的构建方法，（1）以野生型木霉菌株基因组DNA为模板进行PCR扩增，获取hacI编码序列上游片段和hacI编码区部分片段，分别命名为UF和DF；（2）以质粒pUC19‑hph‑Ptef1为模板进行PCR扩增，获取包含潮霉素B磷酸转移酶元件hph和里氏木霉QM6a中tef1基因启动子序列的片段Ptef1，命名为hph‑Ptef1；（3）利用重叠PCR方法将上述3个片段按以下顺序连接，UF、hph‑Ptef1、DF获得超表达元件，命名为UF‑hph‑Ptef1‑DF；（4）将步骤（3）中超表达元件转入木霉菌的原生质体中，经潮霉素B筛选、PCR验证和HPLC检测后，获得高产harzianic acid的木霉菌株OEhacI。本发明的方法构建的harzianic acid高产菌株，在发酵4天即可在常规培养基PDB中摇瓶产生大量harzianic acid，从而为规模化生产harzianic acid提供有效开发技术和相应工程生产菌。
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