公开(公告)号：CN106754768B

公开(公告)日：2020-07-24

申请号：CN201611019626.2

申请日：2016-11-21

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 吕凤霞 ,  钱辉 ,  陆兆新 ,  张充 ,  别小妹 ,  赵海珍

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/11 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明提供了一种热稳定性提高的脂肪氧合酶突变体及其构建方法，其中脂肪氧合酶突变体具有如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6中任一种所示的氨基酸序列；构建方法为首先确定鱼腥藻脂肪氧合酶突变位点，然后以重组质粒为模板，在突变位点处利用NNK代替原有密码子设计简并引物，进行全质粒PCR反应，构建3个定点饱和突变库，然后通过转化大肠杆菌和抗性筛选得到3个饱和突变库；最后对3个饱和突变库进行抗性筛选和诱导突变，通过进一步纯化得到纯的脂肪氧合酶突变体。本发明的脂肪氧合酶突变体的热稳定性获得了提高，具有较高的实际应用价值和广阔的市场前景。

公开(公告)号：CN106754768A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611019626.2

申请日：2016-11-21

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 吕凤霞 ,  钱辉 ,  陆兆新 ,  张充 ,  别小妹 ,  赵海珍

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/11 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明提供了一种热稳定性提高的脂肪氧合酶突变体及其构建方法，其中脂肪氧合酶突变体具有如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6中任一种所示的氨基酸序列；构建方法为首先确定鱼腥藻脂肪氧合酶突变位点，然后以重组质粒为模板，在突变位点处利用NNK代替原有密码子设计简并引物，进行全质粒PCR反应，构建3个定点饱和突变库，然后通过转化大肠杆菌和抗性筛选得到3个饱和突变库；最后对3个饱和突变库进行抗性筛选和诱导突变，通过进一步纯化得到纯的脂肪氧合酶突变体。本发明的脂肪氧合酶突变体的热稳定性获得了提高，具有较高的实际应用价值和广阔的市场前景。

公开(公告)号：CN106834311A

公开(公告)日：2017-06-13

申请号：CN201710052445.8

申请日：2017-01-24

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 吕凤霞 ,  陆兆新 ,  钱辉 ,  张充 ,  别小妹 ,  赵海珍

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/11 ,  C12N15/70 ,  C02F3/34 ,  C02F101/38

CPC classification number: C12N9/0069 ,  C02F3/342 ,  C02F2101/308 ,  C02F2101/40 ,  C12N15/70 ,  C12Y113/11012

Abstract: 本发明公开了一种酸性脂肪氧合酶及其制备方法与应用。本发明从Myxococcus xanthus DK1622菌株基因组中，克隆并获得一种新型的脂肪氧合酶基因MxLOX，其氨基酸序列为SEQ ID NO.2。该酶在pH3.0,30℃条件下活性最高，pH2.5‑5.0，30℃条件下活性稳定。重组脂肪氧合酶rMxLOX可高效地催化三苯甲烷类染料苯胺蓝、甲基蓝的降解，在酸性工业废水的处理中具有潜在的应用价值。

公开(公告)号：CN106834311B

公开(公告)日：2020-11-06

申请号：CN201710052445.8

申请日：2017-01-24

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 吕凤霞 ,  陆兆新 ,  钱辉 ,  张充 ,  别小妹 ,  赵海珍

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/11 ,  C12N15/70 ,  C02F3/34 ,  C02F101/38

Abstract: 本发明公开了一种酸性脂肪氧合酶及其制备方法与应用。本发明从Myxococcus xanthus DK1622菌株基因组中，克隆并获得一种脂肪氧合酶基因MxLOX，其氨基酸序列为SEQ ID NO.2。该酶在pH3.0,30℃条件下活性最高，pH2.5‑5.0，30℃条件下活性稳定。重组脂肪氧合酶rMxLOX可高效地催化三苯甲烷类染料苯胺蓝、甲基蓝的降解，在酸性工业废水的处理中具有潜在的应用价值。