公开(公告)号：CN101063144B

公开(公告)日：2010-09-15

申请号：CN200710022222.3

申请日：2007-05-10

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 陆兆新 ,  林谦 ,  吕凤霞 ,  别小妹 ,  焦阳 ,  王煜 ,  邹晓葵

IPC: C12N15/60 ,  C12N9/88 ,  C12P13/00

Abstract: 本发明涉及一种乳酸菌谷氨酸脱羧酶基因的克隆、表达及应用，属于食品工业生物技术领域。该基因来自唾液链球菌嗜热亚种(Streptococcus thermophilus)，长1380bp。通过PCR从基因组DNA中扩增获得，在该基因两端分别加上NcoI和EcoRI限制酶识别序列，与经相同限制酶消化的pET-DsbA连接并转化大肠杆菌表达宿主菌BL21(DE3)pLysS，实现了在大肠杆菌中的重组表达，表达产物谷氨酸脱羧酶分子量为52.4kDa。重组酶可将L-谷氨酸脱羧转化为γ-氨基丁酸。该基因的表达为γ-氨基丁酸的酶法合成提供大量的、高活力的粗酶，降低酶法合成γ-氨基丁酸的成本。这种γ-氨基丁酸的合成方法属于生物合成法，反应条件温和，作用专一，无副产物，在食品、医药、饲料等行业中均有应用价值。

公开(公告)号：CN101063144A

公开(公告)日：2007-10-31

申请号：CN200710022222.3

申请日：2007-05-10

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 陆兆新 ,  林谦 ,  吕凤霞 ,  别小妹 ,  焦阳 ,  王煜 ,  邹晓葵

IPC: C12N15/60 ,  C12N9/88 ,  C12P13/00

Abstract: 本发明涉及一种乳酸菌谷氨酸脱羧酶基因的克隆、表达及应用，属于食品工业生物技术领域。该基因来自唾液链球菌嗜热亚种(Streptococcus thermophilus)，长1380bp。通过PCR从基因组DNA中扩增获得，在该基因两端分别加上NcoI和EcoRI限制酶识别序列，与经相同限制酶消化的pET－DsbA连接并转化大肠杆菌表达宿主菌BL21(DE3)pLysS，实现了在大肠杆菌中的重组表达，表达产物谷氨酸脱羧酶分子量为52.4kDa。重组酶可将L－谷氨酸脱羧转化为γ－氨基丁酸。该基因的表达为γ－氨基丁酸的酶法合成提供大量的、高活力的粗酶，降低酶法合成γ－氨基丁酸的成本。这种γ－氨基丁酸的合成方法属于生物合成法，反应条件温和，作用专一，无副产物，在食品、医药、饲料等行业中均有应用价值。