公开(公告)号：CN104099355A

公开(公告)日：2014-10-15

申请号：CN201410332153.6

申请日：2014-07-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 朱月林 ,  盖钧镒 ,  张功臣

IPC: C12N15/54 ,  C12N15/82 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/68 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明属于分子生物学与生物技术领域，涉及基因StP5CS及其在耐盐转基因大豆培育中应用，提供利用该基因培育耐盐转基因大豆方法、培育过程中使用的StP5CS过表达载体和工程菌、转基因大豆StP5CS基因荧光定量方法和检测试剂盒。本发明提供的StP5CS耐盐转基因大豆方法为：1)在植物表达载体pCAMBIA3301-StP5CS构建基础上，获得StP5CS耐盐转基因大豆转化体；2)筛选纯合体转基因大豆。本发明解决现有技术中StP5CS在耐盐转基因育种中空白，该基因在转基因植株中超量表达，提高目标作物耐盐性。本发明的载体还含有广谱除草剂抗性基因，既方便检测又赋予转基因大豆抗除草剂特性，便于生产应用。

公开(公告)号：CN101955971A

公开(公告)日：2011-01-26

申请号：CN201010501799.4

申请日：2010-10-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 朱月林 ,  盖钧镒 ,  张功臣 ,  杨立飞

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/52 ,  C12N15/66 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及野生茄子耐盐基因StP5CS植物表达载体，属于分子生物学领域。以野生茄子叶片cDNA为模板，克隆StP5CS并连接到载体pMD19-T。改造pCAMBIA1301和pBI220.6载体，得到中间载体pCAMBIA1301-BI220。BamH I和Sma I双酶切StP5CS和改造的中间载体pCAMBIA1301-BI220，回收并连接酶切产物，得到最终的植物表达载体pCAMBIA1301-BI220-StP5CS。将该植物表达载体用于作物遗传转化，StP5CS在CaMV35S启动子的启动下超量表达，大量合成脯氨酸生物合成关键酶，植物体内积累脯氨酸，提高植物耐盐性。

公开(公告)号：CN102154331A

公开(公告)日：2011-08-17

申请号：CN201110025649.5

申请日：2011-01-24

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 朱月林 ,  盖钧镒 ,  闫闻 ,  张功臣 ,  杨立飞

IPC: C12N15/52 ,  C12N15/82 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了南瓜耐旱基因CmNAGS及其抗除草剂植物表达载体。本发明所提供的南瓜耐旱基因CmNAGS序列为SEQ ID NO.1。其抗除草剂植物表达载体由所述的南瓜耐旱基因CmNAGS插入到中间载体pCAMBIA3301-T800的Sac I和Xba I位点得到。本发明含CmNAGS基因的植物表达载体可用于农作物遗传转化，CmNAGS基因在CaMV35S启动子的启动下超量表达，合成催化精氨酸生物合成途径第一步反应的N-乙酰谷氨酸合成酶，可使植物体内精氨酸、鸟氨酸、瓜氨酸含量提高，增强植物耐旱性。同时，bar基因编码膦丝菌素乙酰转移酶，可使转基因作物对抗以膦丝菌素为有效成分的Basta、Liberty等除草剂。

公开(公告)号：CN101962649A

公开(公告)日：2011-02-02

申请号：CN201010522878.3

申请日：2010-10-28

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 朱月林 ,  盖钧镒 ,  张功臣 ,  杨立飞

IPC: C12N15/52 ,  C12N15/82 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了野生茄子耐盐基因StP5CS及其抗除草剂植物表达载体。本发明所提供的野生茄子耐盐基因StP5CS序列为SEQ ID NO.1。其抗除草剂植物表达载体由所述的野生茄子耐盐基因StP5CS插入到中间载体pCAMBIA3301-T800的BamH I和Sal I位点得到的。本发明StP5CS基因将该植物表达载体用于农作物遗传转化，StP5CS基因在CaMV35S启动子的启动下超量表达，大量合成脯氨酸生物合成关键酶，植物体内积累脯氨酸，提高植物耐盐性。同时，bar基因的表达产物膦丝菌素N-乙酰转移酶，能使植物抵抗以L-Phosphinothricin(膦丝菌素，PPT)为活性成分的除草剂。