公开(公告)号：CN108913675A

公开(公告)日：2018-11-30

申请号：CN201810742230.3

申请日：2018-07-09

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 杨博 ,  王建荣 ,  王永华 ,  张天宇 ,  吴宗泽 ,  蓝东明 ,  赵格

IPC: C12N9/20 ,  C12N15/55 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的脂肪酶突变体及其应用。该脂肪酶突变体为脂肪酶TTL增加二硫键得到的脂肪酶突变体；其中，脂肪酶TTL的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过构建二硫键得到了热稳定性提高的脂肪酶突变体TTL-108/162，突变体TTL-108/162在75℃和80℃热处理30分钟后的酶活保留率为65％和48％，即本发明的获得的脂肪酶突变体TTL-108/162具有良好的热稳定性，可广泛应用于工业领域中。

公开(公告)号：CN108504643A

公开(公告)日：2018-09-07

申请号：CN201810550076.X

申请日：2018-05-31

Applicant: 华南理工大学 ,  广州华粤营养创制研究院有限公司

Inventor： 王永华 ,  袁红 ,  蓝东明 ,  赵格 ,  杨博

IPC: C12N9/20 ,  C12N15/57 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于酶工程技术领域，公开了一种来源于米曲霉的偏甘油酯脂肪酶及其制备方法和晶体结构，其氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示。所述偏甘油酯脂肪酶晶体结构由2个不对称单体组成，分别为：单体A和单体B；晶体结构参数为：空间群P1211；晶胞参数： 每个单体有β折叠和α螺旋，构成了典型的丝氨酸水解酶α/β折叠结构，并由Ser153、Asp260，His268构成的催化三联体形成活性中心。本发明提供的偏甘油酯脂肪酶的三维结构，有助于利用蛋白质工程技术改造酶分子，更高效地获得满足工业应用需求的酶蛋白变异体，如底物选择性，热稳定性及催化活力等性能改善。

公开(公告)号：CN108913675B

公开(公告)日：2020-05-22

申请号：CN201810742230.3

申请日：2018-07-09

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 杨博 ,  王建荣 ,  王永华 ,  张天宇 ,  吴宗泽 ,  蓝东明 ,  赵格

IPC: C12N9/20 ,  C12N15/55 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的脂肪酶突变体及其应用。该脂肪酶突变体为脂肪酶TTL增加二硫键得到的脂肪酶突变体；其中，脂肪酶TTL的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过构建二硫键得到了热稳定性提高的脂肪酶突变体TTL‑108/162，突变体TTL‑108/162在75℃和80℃热处理30分钟后的酶活保留率为65％和48％，即本发明的获得的脂肪酶突变体TTL‑108/162具有良好的热稳定性，可广泛应用于工业领域中。