一种脂肪酸光脱羧酶CsoFAP的突变体及其应用

    公开(公告)号:CN116790570A

    公开(公告)日:2023-09-22

    申请号:CN202310394506.4

    申请日:2023-04-13

    Abstract: 本发明公开了一种脂肪酸光脱羧酶CsoFAP的突变体,该突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。该脂肪酸光脱羧酶CsoFAP的突变体对碳原子数为6‑20的直链脂肪酸均具有良好的脱羧效果,尤其对碳原子数为8‑16的直链脂肪酸的脱羧效果更为优异,进一步将该突变体的第176位亮氨酸突变成半胱氨酸或将177位的酪氨酸突变为半胱氨酸后,其在蓝光下的半衰期能够由原来的0.84h延长至1.90h,进一步提高光耐受性。因此,该脂肪酸光脱羧酶CsoFAP的突变体有着更为广泛的底物谱、优异的催化脱羧效果及光稳定性,扩宽了脂肪酸光脱羧酶在工业生产中的应用,提供了新的技术基础与思路。

    一种锚定多肽与光脱羧酶融合蛋白及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN117143249A

    公开(公告)日:2023-12-01

    申请号:CN202310978324.1

    申请日:2023-08-04

    Abstract: 本发明提供了一种锚定多肽与光脱羧酶融合蛋白及其制备方法与应用。在基因合成获得McFAP的基础上,将McFAP基因5’端的类囊体膜定位序列替换为源于枯草芽孢杆菌的锚定多肽LCI序列,得到LCI‑McFAP;另外,在McFAP的3’端插入LCI序列,得到McFAP‑LCI与前面的融合蛋白作对比。以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主表达两种融合蛋白。分析LCI多肽构型和表面氨基酸残基,合成表面携带负电荷、大比表面积膜材料,无需预先纯化蛋白,即可将酶蛋白诱导并牢固结合到材料。随后考察了固定化酶对不同链长脂肪酸的催化偏好性,和最适底物为实验条件测试催化利用次数,最后利用连续流动光反应装置成功实现了放大催化。

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