公开(公告)号：CN113215110A

公开(公告)日：2021-08-06

申请号：CN202110521697.7

申请日：2021-05-13

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 亓文宝 ,  黄一凡 ,  朱君海 ,  简伟俊 ,  廖明 ,  张桂红 ,  高琦

IPC: C12N7/00 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种提高非洲猪瘟病毒增殖能力的方法，属于微生物应用领域。本发明方法包括如下步骤：S1、将猪原代肺泡巨噬细胞的细胞悬液接种于细胞培养板中，静置3～5h待其贴壁；S2、将非洲猪瘟病毒液和洁酸键稀释液均匀混合，24～26℃条件下孵育0～4h，加入培养基，得到混合液；用所得混合液替换细胞培养板中的培养液，培养1.5～2.5h；S3、用含10％胎牛血清的培养基再次替换细胞培养板中的培养液，培养4～6d。该方法不仅能够增强非洲猪瘟病毒的感染效率，节约实验室猪原代肺泡巨噬细胞的制备时间和成本，还能为高效地进行非洲猪瘟病毒的分离、疫情监测、疫苗的研发和生产提供基础数据支持。

公开(公告)号：CN114395643A

公开(公告)日：2022-04-26

申请号：CN202210156886.3

申请日：2022-02-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 亓文宝 ,  简伟俊 ,  朱君海 ,  陈画菡 ,  张桂红 ,  廖明 ,  黄一凡 ,  高琦 ,  高飞

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及病毒检测领域，尤其涉及非洲猪瘟病毒的双通道数字PCR检测试剂盒及方法。本发明提供了非洲猪瘟病毒的双通道微滴数字PCR检测试剂盒及方法，可以检测到多种不同类型的毒株，并鉴别其是否为EP402R缺失株。此外，本发明提供的产品具有良好的特异性和灵敏度：在几种常见猪病病毒中仅扩增非洲猪瘟病毒、对pMD18T‑EP402R和pMD18T‑B646L质粒的最低检测限分别低至0.43copies/μL和2.6copies/μL。因此本发明有潜力准确检测非洲猪瘟病毒的隐性感染，可以应用于临床和生产中该猪瘟病毒特别是EP402R基因缺失株快速检测。