猪体外受精和胚胎移植方法

    公开(公告)号:CN101779989A

    公开(公告)日:2010-07-21

    申请号:CN201010019489.9

    申请日:2010-01-19

    Abstract: 本发明公开了一种猪体外受精和胚胎移植方法,步骤如下:卵母细胞的准备;精子获能处理:将精液离心处理后,加入受精液调整精子浓度,调整好以后放入培养箱内获能;体外受精及受精卵的体外培养;胚胎移植:采用胚胎移植管移植。本发明提供的猪体外受精和胚胎移植方法操作简单,在不实施外科手术的前提下实现体外受精、胚胎移植,不会对猪造成伤害,成功率高,成本较低,对于推动猪体外受精、猪克隆、转基因胚胎研究与生产具有重要意义。

    一种培养猪滋养层干细胞的专用培养基及方法

    公开(公告)号:CN104946581A

    公开(公告)日:2015-09-30

    申请号:CN201510210334.6

    申请日:2015-04-28

    Abstract: 本发明公开了一种培养猪滋养层干细胞的专用培养基及方法,该专用培养基成分包括bFGF、activin A、Y27632、Knockout SR和β-巯基乙醇 。培养方法是将干细胞培养器皿预先用细胞外基质包被;然后将猪囊胚用蛋白酶消化去除透明带,转入干细胞培养器皿中,添加本发明的专用培养基;培养至形成总细胞数为1000~2000个的滋养层干细胞克隆团时,消化成单细胞,转入新的经细胞外基质包被的培养器皿进行细胞的传代培养。本发明的专用培养基成分确定,使用安全性高,避免异源细胞的污染。培养方法简单高效,对猪滋养层干细胞培养具有克隆形成率高、细胞凋亡率低、增殖传代能力强和安全稳定的优点。

    一种提高猪克隆胚胎发育效率的方法

    公开(公告)号:CN108060117B

    公开(公告)日:2021-08-20

    申请号:CN201711245659.3

    申请日:2017-12-01

    Abstract: 本发明涉及动物克隆方法领域,具体涉及一种提高猪克隆胚胎发育效率的方法。本发明方法主要包括在猪克隆胚胎的基础培养液中添加母猪的子宫液。本发明方法显著提高了克隆胚胎早期发育的囊胚率和囊胚内总细胞数。通过早期胚胎的转录组测序结果显示添加母猪子宫液培养使克隆胚胎与正常体内受精胚胎之间的差异表达基因数目减少。最为重要的是,通过添加母猪子宫液还提高了克隆胚胎的受体母猪的分娩率和窝均活仔数,表明本发明方法有效地提高了克隆胚胎体内发育的最终效率。

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