一种WSB2基因敲除单克隆细胞株的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN116970647A

    公开(公告)日:2023-10-31

    申请号:CN202310907221.6

    申请日:2023-07-24

    Abstract: 本发明公开了一种WSB2基因敲除单克隆细胞株的构建方法及其应用。该方法是采用CRISPR/Cas9系统来制备WSB2基因敲除单克隆细胞株,首先针对WSB2基因设计两个sgRNA序列,利用分子克隆技术构建重组质粒;然后将重组质粒转染至293T细胞进行病毒包装,收集的病毒液转染MDA‑MB‑231细胞,进行嘌呤霉素药物筛选和单克隆化处理,然后提取单克隆细胞株基因组DNA,进行WSB2基因水平测序鉴定,获得WSB2基因敲除MDA‑MB‑231细胞系。本发明构建的WSB2基因敲除MDA‑MB‑231细胞系是一种基因稳定遗传的细胞系,采用的方法简便、高效、快速、低成本。

Patent Agency Ranking