公开(公告)号：CN110583682A

公开(公告)日：2019-12-20

申请号：CN201910881155.3

申请日：2019-09-18

Applicant: 华侨大学

Inventor： 林毅 ,  张斌武 ,  王丹丹 ,  暨铖烽

IPC: A01N47/44 ,  A01P7/04 ,  C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开了一种基于Tma12蛋白的室内控蚜喷剂、构建方法及该蛋白的应用，利用大肠杆菌表达系统将原始来源的Tma12蛋白的编码基因进行原核表达，随后提取表达产物或含有表达产物的液体，直接喷于蚜虫活体实现伤害甚至杀死蚜虫的作用。

公开(公告)号：CN110283833A

公开(公告)日：2019-09-27

申请号：CN201910570964.2

申请日：2019-06-27

Applicant: 华侨大学

Inventor： 林毅 ,  张斌武 ,  赵笑迪

IPC: C12N15/32 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/60

Abstract: 本发明公开了cry2Ab12基因在制备抗蚜虫转基因植物的用途，其中，所述的cry2Ab12基因在GenBank序列号为EF157306.1。本发明首次发现该基因具有良好的抗蚜虫效果。

公开(公告)号：CN108948150A

公开(公告)日：2018-12-07

申请号：CN201810797415.4

申请日：2018-07-19

Applicant: 华侨大学

Inventor： 林毅 ,  张斌武 ,  温扬帆 ,  暨铖烽

IPC: C07K7/06 ,  A01N61/00 ,  A01N37/46 ,  A01P7/04

CPC classification number: C07K7/06 ,  A01N37/46 ,  A01N61/00

Abstract: 本发明公开了一种抗蚜增效的短肽及其应用，该短肽可用于蚜虫防控，作为几丁质酶抗蚜增效短肽，解决了几丁质酶对蚜虫抑制效果不足的问题。

公开(公告)号：CN103898186B

公开(公告)日：2016-02-24

申请号：CN201410057554.5

申请日：2014-02-20

Applicant: 华侨大学

Inventor： 林毅 ,  林淑芳

IPC: C12P33/20

Abstract: 本发明公开了一种酶法转化海参总皂苷制备次生皂苷的方法，包括以下步骤：a)将鲜海参去除内脏，放入沸水中煮，得到海参蒸煮液；b)海参蒸煮液调节pH，离心得到上清液；c)上清液过柱，分别用去离子水和20%乙醇溶液冲洗树脂，再用70%乙醇溶液进行洗脱，收集70%乙醇溶液洗脱组分；d)减压浓缩所收集的洗脱组分，至浸膏状，用去离子水复溶，离心取上清，上清液经石油醚萃取脱脂，取水层再用水饱和正丁醇萃取，减压浓缩至浸膏状，冷冻干燥即得海参总皂苷；e)采用蜗牛酶酶解海参总皂苷；f)减压浓缩后进行冷冻干燥，即得海参次生皂苷。本发明条件温和，制备方法简单。

公开(公告)号：CN102432668A

公开(公告)日：2012-05-02

申请号：CN201110380506.6

申请日：2011-11-25

Applicant: 华侨大学

Inventor： 张光亚 ,  陈国 ,  林毅

IPC: C07K1/14 ,  C12P21/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种能对目标重组蛋白进行离心法快速分离纯化的方法，包括如下步骤：1)通过融合标签蛋白基因上的限制性酶切位点，将目标蛋白基因与融合标签蛋白基因连接，并导入到宿主菌中；2)使用不同盐离子及相应的浓度的缓冲溶液，在特定pH值中，通过控制溶液温度使融合标签蛋白发生相变聚集得到蛋白质溶液；3)对蛋白质溶液通过离心法纯化目标蛋白。本发明通过加入一定浓度盐诱发融合标签蛋白发生相变聚集，通过优化操作条件，采用离心法分离重组蛋白，效果显著；该方法简单、快速、高效、经济，不需要特殊仪器，适用范围广、易于操作，生产成本低廉，因而适宜进行工业化生产。

公开(公告)号：CN108948150B

公开(公告)日：2021-06-29

申请号：CN201810797415.4

申请日：2018-07-19

Applicant: 华侨大学

Inventor： 林毅 ,  张斌武 ,  温扬帆 ,  暨铖烽

IPC: C07K7/06 ,  A01N61/00 ,  A01N37/46 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了一种抗蚜增效的短肽及其应用，该短肽可用于蚜虫防控，作为几丁质酶抗蚜增效短肽，解决了几丁质酶对蚜虫抑制效果不足的问题。

公开(公告)号：CN111500674A

公开(公告)日：2020-08-07

申请号：CN202010316262.4

申请日：2020-04-21

Applicant: 华侨大学

Inventor： 林毅 ,  赵笑迪 ,  张斌武

IPC: C12Q1/37 ,  C07K14/325 ,  C12N9/64

Abstract: 本发明提供了一种筛选抗蚜Cry蛋白的方法，包括将反应缓冲液、蚜虫Cathepsin B蛋白酶和苏云金杆菌Cry蛋白混合静置反应，得到混合酶液，将所述混合酶液与底物混合反应后，得到检测液，检测所述检测液在405nm下的吸光度值，得到检测值；以Cathepsin B酶活抑制剂和激活剂为对照，得到抑制检测值和激活检测值；当所述检测值大于等于激活检测值，或所述检测值小于等于抑制检测值时，所述苏云金杆菌Cry蛋白为抗蚜Cry蛋白；所述底物包括Z-Arg-Arg-pNA和/或BSA；所述反应缓冲液包括乙酸钠、二硫苏糖醇和乙二胺四乙酸。本发明提供的筛选方法检测结果精准，能够大批量测定，进而实现大规模筛选。

公开(公告)号：CN107557476A

公开(公告)日：2018-01-09

申请号：CN201710741934.4

申请日：2017-08-25

Applicant: 华侨大学

Inventor： 林毅 ,  温扬帆

IPC: C12Q1/6888 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了一种分析苏云金杆菌制剂对靶虫活性低下原因的方法，选取苏云金杆菌制剂对其活性低下的健康靶虫若干只，采集靶虫血淋巴；将苏云金杆菌制剂杀虫因子固定到分子支架上；将血淋巴加到固定有杀虫因子的分子支架上，血淋巴中能与杀虫因子结合的成分与杀虫因子结合，从而被间接固定在分子支架上，而不能与杀虫因子结合的成分则不会被固定；对血淋巴中与杀虫因子结合的成分进行分析鉴定，找出苏云金杆菌制剂对靶虫活性低下的原因，据此寻找相应的克服途径。本发明可为苏云金杆菌制剂生产厂家寻求克服现有生产菌种对靶虫活性低下的方法提供依据。

公开(公告)号：CN103910911A

公开(公告)日：2014-07-09

申请号：CN201410119943.6

申请日：2014-03-27

Applicant: 华侨大学

Inventor： 陈国 ,  刘斌 ,  陈宏文 ,  林毅 ,  张光亚

IPC: C08L5/16 ,  C08L1/16 ,  B65D65/38

Abstract: 本发明公开了一种具缓释作用的长效抗菌可食膜的制备方法。该方法采用纤维素硫酸钠作为基材，天然精油作为抗菌剂，环糊精作为缓释剂和除味剂，经过溶解、均质、脱气、制膜、干燥等步骤，最后制备成一种具缓释精油特性的长效抗菌可食性包装膜。本发明方法可以提高精油的利用率、延长精油的释放时间，制得的可食膜具有良好的机械性能、阻隔性能和长效的抗菌性能，能满足饼干、蛋糕、水果等其它食品包装的要求。

公开(公告)号：CN101671714A

公开(公告)日：2010-03-17

申请号：CN200910193156.5

申请日：2009-10-13

Applicant: 华侨大学

Inventor： 林毅

IPC: C12P33/20

Abstract: 本发明公开了一种稀有人参皂甙IH-901的制备方法，通过如下方案实现：将1单位质量单体人参皂甙Rb1、0.5-1单位质量国产的蜗牛酶和1单位体积pH＝3-5的缓冲溶液混合均匀，于30-45℃下保温8-14小时之后，便可将单体人参皂甙Rb1完全转化为产物稀有人参皂甙IH-901。本发明以单体人参皂甙Rb1为反应底物，反应的酶为廉价的国产蜗牛酶，反应后的体系中除缓冲体系的成分外，反应底物单体人参皂甙Rb1被完全转化为产物稀有人参皂甙IH-901，后续的产物提取非常简单。与现有技术相比，本发明的制备方法，由于采用单一底物和廉价的国产蜗牛酶，具有酶的来源丰富、原料成本低，以及反应结束后体系中成分简单有利于产物提取等优点。