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公开(公告)号：CN106434723A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610867378.0
申请日：2016-09-30
Applicant: 华侨大学
IPC: C12N15/70
CPC classification number: C12N15/70
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开一种利用聚乙烯亚胺提高热激法质粒转化大肠杆菌感受态效率的方法，包括以下步骤：制备感受态细胞；配置浓度为10-7v/v-10-8v/v的PEI溶液备用；在转化体系中加入所述的聚乙烯亚胺溶液进行转化和克隆，得到重组的DNA分子克隆。本发明可以显著提高热激法质粒DNA转化E.coli BL21(DE3)的效率，填补了将化合物，如聚乙烯亚胺PEI作为增效剂应用于提高转化效率这一领域的空白。
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公开(公告)号：CN109371047B
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN201811162774.9
申请日：2018-09-30
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明公开一种利用蛋白IHF‑α构建和表达耐热性抗菌肽融合蛋白的方法，通过IHF‑α蛋白与耐热性抗菌肽进行融合基因设计，设计成为含有IHF‑α蛋白与耐热性抗菌肽基因序列的质粒，在大肠杆菌中进行转化和克隆表达得到蛋白后，并对蛋白纯化，最终得到含有耐热性抗菌肽的融合蛋白。本发明方法将难表达的耐热性抗菌肽利用耐热性的IHF‑α融合表达，使抗菌肽潜在的抑菌性能够得到抑制，使得抗菌肽可以可溶性表达。该方法操作简单，将难表达、小分子量的抗菌肽，通过与耐热性的IHF‑α联合表达，使得耐热性抗菌肽快速简便获得。
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公开(公告)号：CN109371047A
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201811162774.9
申请日：2018-09-30
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明公开一种利用蛋白IHF-α构建和表达耐热性抗菌肽融合蛋白的方法，通过IHF-α蛋白与耐热性抗菌肽进行融合基因设计，设计成为含有IHF-α蛋白与耐热性抗菌肽基因序列的质粒，在大肠杆菌中进行转化和克隆表达得到蛋白后，并对蛋白纯化，最终得到含有耐热性抗菌肽的融合蛋白。本发明方法将难表达的耐热性抗菌肽利用耐热性的IHF-α融合表达，使抗菌肽潜在的抑菌性能够得到抑制，使得抗菌肽可以可溶性表达。该方法操作简单，将难表达、小分子量的抗菌肽，通过与耐热性的IHF-α联合表达，使得耐热性抗菌肽快速简便获得。
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公开(公告)号：CN107686860A
公开(公告)日：2018-02-13
申请号：CN201710811315.8
申请日：2017-09-11
Applicant: 华侨大学
IPC: C12Q1/6806
CPC classification number: C12Q1/6806 , C12Q2531/125 , C12Q2527/101 , C12Q2521/101
Abstract: 本发明公开了一种提高多引物RCA特异性的方法，其通过改良商品化多引物RCA试剂盒TempliPhi(Amersham Biosciences)中的各成分含量，替换成市面上容易购买并且价格低廉的2.5mMdNTP，10×BSA，phi29DNA聚合酶buffer。同时在多引物RCA反应过程中加入适当浓度的聚乙二醇(PEG，8000)，可以显著地提高多引物RCA的特异性，填补多引物RCA反应中一直以来难以消减的非特异性扩增产生的拖尾现象。实现了对市售多引物RCA试剂盒的显著优化。
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公开(公告)号：CN106367414A
公开(公告)日：2017-02-01
申请号：CN201610827757.7
申请日：2016-09-18
Applicant: 华侨大学
IPC: C12N15/10
CPC classification number: C12N15/1031 , C12Q2527/125
Abstract: 本发明公开一种利用聚乙烯亚胺增强重叠延伸PCR基因合成灵敏度和特异性的方法，步骤包括：设计需要合成的HU-β引物序列，得到混合重叠寡核苷酸模板；其中，每个序列都有25bp的重叠寡核苷酸，以覆盖整个DNA序列(200到1500碱基)；将含有DNA聚合酶，首尾引物，以及作为模板的上述步骤混合重叠寡核苷酸的反应液中加入体积10-5～10-13倍的PEI；按照常规PCR的解链，退火，延伸三个步骤进行反复地循环，将目的核酸片段合成并且扩增，本发明方法能够特异性地、高效地合成和扩增目标核酸序列。
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