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公开(公告)号:CN104145807B
公开(公告)日:2016-02-10
申请号:CN201410366170.1
申请日:2014-07-29
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种获得连翘属与六道木叶属属间杂种的方法,具体步骤如下:1)以连翘属的连翘为母本,以六道木叶属的翅果连翘为父本,进行属间人工杂交,收取杂交后的种子;2)种植种子获得杂交后代材料,参照父本和母本进行形态学观察统计,并采用AFLP分子标记进行杂种鉴定,选取连翘属与六道木叶属属间杂种。本发明利用连翘属连翘与六道木叶属翅果连翘进行远缘杂交,实现了连翘属与六道木叶属属间基因交流,获得了属间杂交新种质。在本发明基础上,可丰富连翘属植物的遗传信息,为利用属间杂交进行连翘新品种培育成为可能,同时可进行近缘属亲缘关系研究。
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公开(公告)号:CN108949809B
公开(公告)日:2022-03-08
申请号:CN201810729116.7
申请日:2018-07-05
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种连翘叶片TRV载体介导病毒诱导基因沉默的方法。所述方法为:将含有特定目标基因片段的TRV2载体和TRV1载体分别转化到农杆菌感受态中;筛选得到阳性菌株后,进行增殖培养得到含有不同载体的两种单克隆菌体;将两种单克隆菌体离心并利用侵染液分别重悬菌体至OD600=0.9~1.1后,将二者等体积混合,得到混合侵染液;将所述混合侵染液注入连翘中,实现对特定目标基因的沉默。本发明深入探究了可提高侵染成功效率的关键因素,筛选出了最优的侵染液组成配方和侵染时含有菌体的侵染液的OD值。利用本发明所述方法对连翘进行侵染,可使连翘叶片VIGS侵染的成功率达90%以上。
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公开(公告)号:CN110499325B
公开(公告)日:2021-04-23
申请号:CN201910630368.9
申请日:2019-07-12
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供一种TRV‑based病毒诱导的报春花属植物基因沉默的方法。包括:A、根据报春花属植物目标基因,设计引物并扩增出该目标基因的DNA片段;B、将DNA片段连接到pTRV2载体上,得到重组载体;C、将pTRV1、重组载体分别转化农杆菌,所得转化子共同侵染植株。本发明首次证明TRV可成功应用于小报春基因沉默和功能验证,为报春花属植物的基因功能验证奠定了基础。本发明方法简单、研究周期短、无需基因全长和转化体系,获得目的表型效率高,可实现大量基因的快速功能验证。与现有的VIGS体系相比,本发明表型持续时间长,且在植株的不同部位均出现表型变化,对报春花属异型自交不亲和的遗传学研究具有重要意义。
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公开(公告)号:CN108949809A
公开(公告)日:2018-12-07
申请号:CN201810729116.7
申请日:2018-07-05
Applicant: 北京林业大学
CPC classification number: C12N15/8218 , C12N9/001 , C12Y103/99
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种连翘叶片TRV载体介导病毒诱导基因沉默的方法。所述方法为:将含有特定目标基因片段的TRV2载体和TRV1载体分别转化到农杆菌感受态中;筛选得到阳性菌株后,进行增殖培养得到含有不同载体的两种单克隆菌体;将两种单克隆菌体离心并利用侵染液分别重悬菌体至OD600=0.9~1.1后,将二者等体积混合,得到混合侵染液;将所述混合侵染液注入连翘中,实现对特定目标基因的沉默。本发明深入探究了可提高侵染成功效率的关键因素,筛选出了最优的侵染液组成配方和侵染时含有菌体的侵染液的OD值。利用本发明所述方法对连翘进行侵染,可使连翘叶片VIGS侵染的成功率达90%以上。
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公开(公告)号:CN110499325A
公开(公告)日:2019-11-26
申请号:CN201910630368.9
申请日:2019-07-12
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供一种TRV-based病毒诱导的报春花属植物基因沉默的方法。包括:A、根据报春花属植物目标基因,设计引物并扩增出该目标基因的DNA片段;B、将DNA片段连接到pTRV2载体上,得到重组载体;C、将pTRV1、重组载体分别转化农杆菌,所得转化子共同侵染植株。本发明首次证明TRV可成功应用于小报春基因沉默和功能验证,为报春花属植物的基因功能验证奠定了基础。本发明方法简单、研究周期短、无需基因全长和转化体系,获得目的表型效率高,可实现大量基因的快速功能验证。与现有的VIGS体系相比,本发明表型持续时间长,且在植株的不同部位均出现表型变化,对报春花属异型自交不亲和的遗传学研究具有重要意义。
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公开(公告)号:CN104145807A
公开(公告)日:2014-11-19
申请号:CN201410366170.1
申请日:2014-07-29
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种获得连翘属与六道木叶属属间杂种的方法,具体步骤如下:1)以连翘属的连翘为母本,以六道木叶属的翅果连翘为父本,进行属间人工杂交,收取杂交后的种子;2)种植种子获得杂交后代材料,参照父本和母本进行形态学观察统计,并采用AFLP分子标记进行杂种鉴定,选取连翘属与六道木叶属属间杂种。本发明利用连翘属连翘与六道木叶属翅果连翘进行远缘杂交,实现了连翘属与六道木叶属属间基因交流,获得了属间杂交新种质。在本发明基础上,可丰富连翘属植物的遗传信息,为利用属间杂交进行连翘新品种培育成为可能,同时可进行近缘属亲缘关系研究。
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