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公开(公告)号:CN113106120B
公开(公告)日:2022-11-15
申请号:CN202110457879.2
申请日:2021-04-27
Applicant: 北京林业大学 , 神舟绿鹏农业科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种针叶树植物基因编辑载体、构建方法及其应用,分析白云杉、挪威云杉序列,与拟南芥U6启动子上游USE元件同源的PaU6启动子,构建敲除DXS1基因的基因编辑载体(PgCas9‑PaU6(DXS1)),建立的基因编辑载体能对针叶树植物基因进行精确编辑,产生DXS1基因完除的双等位或纯合突变体,显示了较高的基因编辑效率;对基因编辑位点分析表明,可在多个靶位点基因编辑,且在2个靶点同时发生基因编辑的植株发生率高,说明本发明基因编辑载体可实现多靶点编本发明的在针叶树中能高效、多靶点基因编辑的基因编辑载体可广泛应用于针叶树基因编辑,极大地针叶树基因功能研究及性状改良。
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公开(公告)号:CN112877356B
公开(公告)日:2022-11-15
申请号:CN202110261828.2
申请日:2021-03-10
Applicant: 北京林业大学 , 神舟绿鹏农业科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种杂交枫香胚性愈伤组织的遗传转化方法,属于植物基因工程技术领域。本发明方法包括:采用农杆菌对杂交枫香愈伤组织进行浸染处理,然后将浸染处理后的愈伤组织接种于筛选培养基上进行抗性愈伤组织的筛选培养。通过对抗性愈伤组织的PCR阳性鉴定,利用本发明的遗传转化方法可在短时间内获得大量阳性抗性愈伤,即通过利用农杆菌介导法,建立杂交枫香高效遗传转化体系,本发明方法枫香遗传转化效率高,对于培育枫香新品种和基因功能验证具有重要意义。
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公开(公告)号:CN114875064B
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202210715444.8
申请日:2022-06-22
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种杂交枫香基因编辑载体、其构建方法及其应用方法,属于植物基因工程技术领域,设计2个靶点,以AtU3b和AtU3d为两个靶点的启动子,经过三轮PCR反应,构建杂交枫香PDS基因编辑载体pYLCRISPR/Cas9‑PDS;将构建的基因编辑载体转入胚性愈伤组织中并进行了鉴定,成功获得基因编辑事件。本发明建立杂交枫香基因编辑载体,对杂交枫香植物基因进行精确编辑,产生PDS基因的碱基缺失或替换,基因编辑效率高,本发明的在杂交枫香中能高效、多靶点基因编辑的基因编辑载体极大地促进杂交枫香植物基因功能研究及性状改良。
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公开(公告)号:CN112042541A
公开(公告)日:2020-12-08
申请号:CN202010969083.0
申请日:2020-09-15
Applicant: 北京林业大学 , 神舟绿鹏农业科技有限公司
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种黄杉属植物通过体细胞胚胎发生的繁殖方法,包括对黄杉属植物的无菌外植体进行胚性组织诱导培养、增殖培养、胚性组织的调整培养、体细胞胚胎(体胚)成熟培养、成熟体胎的萌发培养、转苗培养。通过本发明的方法,首次通过诱导体胚发生的途径获得了稳定的华东黄杉胚性细胞株以及大量的成熟体胚,进而获得完整的体胚植株。用本发明的方法,可以在相对短的时期内生产大量的华东黄杉体胚苗。该技术适用于华东黄杉克隆苗的规模化,工厂化生产。
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公开(公告)号:CN112042541B
公开(公告)日:2023-03-07
申请号:CN202010969083.0
申请日:2020-09-15
Applicant: 北京林业大学 , 神舟绿鹏农业科技有限公司
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种黄杉属植物通过体细胞胚胎发生的繁殖方法,包括对黄杉属植物的无菌外植体进行胚性组织诱导培养、增殖培养、胚性组织的调整培养、体细胞胚胎(体胚)成熟培养、成熟体胎的萌发培养、转苗培养。通过本发明的方法,首次通过诱导体胚发生的途径获得了稳定的华东黄杉胚性细胞株以及大量的成熟体胚,进而获得完整的体胚植株。用本发明的方法,可以在相对短的时期内生产大量的华东黄杉体胚苗。该技术适用于华东黄杉克隆苗的规模化,工厂化生产。
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公开(公告)号:CN110896854A
公开(公告)日:2020-03-24
申请号:CN201910776447.0
申请日:2019-08-22
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种促进油松体细胞胚胎(体胚)发育成熟的方法,包括对油松胚性组织进行液体前处理培养,其中所述胚性组织前处理培养基中含有多胺合成抑制剂类调节剂。本发明方法在液体前处理培养基和胚胎成熟培养基里添加多胺合成抑制剂类调节剂,以达到抑制胚性组织在胚胎成熟过程中的过量增殖,促进体胚的发育和成熟,提高成熟体细胞胚胎的质量和数量的目的。使用本发明的方法能从油松胚性较弱,增殖过量的基因型材料中获得更多的成熟体胚和体胚苗,有利于油松体胚苗基因型的多元化,从而能克服无性系林业基因型的局限性,规模化、工厂化生产多基因型油松体胚苗。
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公开(公告)号:CN110896854B
公开(公告)日:2021-05-11
申请号:CN201910776447.0
申请日:2019-08-22
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种促进油松体细胞胚胎(体胚)发育成熟的方法,包括对油松胚性组织进行液体前处理培养,其中所述胚性组织前处理培养基中含有多胺合成抑制剂类调节剂。本发明方法在液体前处理培养基和胚胎成熟培养基里添加多胺合成抑制剂类调节剂,以达到抑制胚性组织在胚胎成熟过程中的过量增殖,促进体胚的发育和成熟,提高成熟体细胞胚胎的质量和数量的目的。使用本发明的方法能从油松胚性较弱,增殖过量的基因型材料中获得更多的成熟体胚和体胚苗,有利于油松体胚苗基因型的多元化,从而能克服无性系林业基因型的局限性,规模化、工厂化生产多基因型油松体胚苗。
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公开(公告)号:CN111466294A
公开(公告)日:2020-07-31
申请号:CN202010475541.5
申请日:2020-05-29
Applicant: 北京林业大学 , 神舟绿鹏农业科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种华北落叶松胚性组织超低温保存的方法,包括对华北落叶松胚性组织(华北落叶松的细胞系胚性愈伤组织)进行渗透剂浓度逐渐升高的液体梯度预培养处理。梯度预培养处理后的华北落叶松胚性组织进行超低温冷冻保存,使用时再进行解冻处理。本发明方法适于对华北落叶松的优良胚性细胞系的长期超低温保存,采用本发明方法长期保存华北落叶松胚性细胞后,细胞存活率高,胚性组织恢复培养迅速,而且胚性愈伤组织恢复生长率高,达到66%以上。
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公开(公告)号:CN114875064A
公开(公告)日:2022-08-09
申请号:CN202210715444.8
申请日:2022-06-22
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种杂交枫香基因编辑载体、其构建方法及其应用方法,属于植物基因工程技术领域,设计2个靶点,以AtU3b和AtU3d为两个靶点的启动子,经过三轮PCR反应,构建杂交枫香PDS基因编辑载体pYLCRISPR/Cas9‑PDS;将构建的基因编辑载体转入胚性愈伤组织中并进行了鉴定,成功获得基因编辑事件。本发明建立杂交枫香基因编辑载体,对杂交枫香植物基因进行精确编辑,产生PDS基因的碱基缺失或替换,基因编辑效率高,本发明的在杂交枫香中能高效、多靶点基因编辑的基因编辑载体极大地促进杂交枫香植物基因功能研究及性状改良。
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