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公开(公告)号：CN115772577B
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202211203288.3
申请日：2022-09-29
Applicant: 北京林业大学 , 北京昌回林海生态科技有限公司
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12R1/90
Abstract: 本发明涉及一种用于检测松材线虫的crRNA引物组、试剂盒及应用。所述crRNA引物组包括直接重复序列和间隔向导序列；所述直接重复序列具有Cas蛋白结合功能；所述间隔向导序列的靶标基因包括expansin基因。本发明提供的crRNA引物组、试剂盒通过特异性地检测松材线虫活体中的expansin基因，能实现对松材线虫活体的快速准确筛查。将本发明所述crRNA引物组、试剂盒应用于松材线虫检测，具有特异性强，检测效率高的特点，能有效防止活体线虫随松木及其它繁殖材料进出口、调运而传播蔓延，对于口岸检测及实际应用具有极好的推广使用前景。
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公开(公告)号：CN117363792A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202311676063.4
申请日：2023-12-08
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明涉及生物检测技术领域，尤其涉及一种基于RPA‑CRISPR双重检测大丽轮枝菌的方法及应用。本发明通过对大丽轮枝菌的落叶型和非落叶型特异性基因进行研究分析，首次提出基于RPA‑CRISPR系统的大丽轮枝菌致病型双重检测方法，设计并筛选符合检测要求的RPA引物组、crRNA序列，通过双重检测手段实现了对大丽轮枝菌致病型的简便、快速、准确、灵敏检测。
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公开(公告)号：CN116064905A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211203289.8
申请日：2022-09-29
Applicant: 北京林业大学 , 北京昌回林海生态科技有限公司
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明涉及一种用于检测大丽轮枝菌的引物组合、试剂盒及应用。所述引物组合包括RPA引物对和crRNA；所述RPA引物对的靶标基因包括大丽轮枝菌ITS基因；所述crRNA的靶标基因包括大丽轮枝菌ITS基因。本发明提供的引物组合、试剂盒将RPA扩增技术和CRISPR检测技术结合起来，实现了对大丽轮枝菌的快速检测，具有灵敏度高，特异性强，检测效率高的优点。将本发明所述引物组合、试剂盒应用于大丽轮枝菌的检测，对因大丽轮枝菌感染导致的黄栌枯萎病的防治具有重要意义。
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公开(公告)号：CN115786536A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211371530.8
申请日：2022-11-03
Applicant: 北京林业大学 , 北京蓝狐天敌技术有限公司
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明涉及生物检测技术领域，尤其涉及一种用于松材线虫的核酸检测系统及松材线虫核酸检测方法。本发明所述核酸检测系统中，每20μL体系包括：47.5‑52.5nM CRISPR/Cas12a蛋白；50‑100nM crRNA；12.5‑250nM单链DNA荧光信号报告分子；靶标样品；DEPC水；所述靶标样品的生物来源为松材线虫。本发明提供的用于松材线虫的核酸检测系统可以在45min内实现对0.01头线虫/100mg木屑的检测，为实际林业诊断和实验室研究提供了高效、准确、稳定的检测手段，对松材线虫早期监测诊断与防控具有重要意义。
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公开(公告)号：CN117660666A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202410139801.X
申请日：2024-02-01
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及核酸检测技术领域，具体涉及检测松材线虫的特异性引物探针组、试剂盒及其应用。本发明提供检测松材线虫的特异性引物探针组，所述引物探针组包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑2所示的特异性引物对和核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的探针。该引物探针组能够特异性扩增松材线虫DNA，对于拟松材线虫等近缘种则无法扩增，具有较高的特异性，同时，在检测松材线虫时具有较高的灵敏度。本发明提供的松材线虫的RAA‑LFA检测方法可对木屑等样品中的松材线虫进行快速、准确的检测，不仅特异性高、灵敏度高，而且操作简单，结果直观，为松材线虫病的现场检测和早期诊断提供了有效的技术手段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116064905B
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202211203289.8
申请日：2022-09-29
Applicant: 北京林业大学 , 北京昌回林海生态科技有限公司
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明涉及一种用于检测大丽轮枝菌的引物组合、试剂盒及应用。所述引物组合包括RPA引物对和crRNA；所述RPA引物对的靶标基因包括大丽轮枝菌ITS基因；所述crRNA的靶标基因包括大丽轮枝菌ITS基因。本发明提供的引物组合、试剂盒将RPA扩增技术和CRISPR检测技术结合起来，实现了对大丽轮枝菌的快速检测，具有灵敏度高，特异性强，检测效率高的优点。将本发明所述引物组合、试剂盒应用于大丽轮枝菌的检测，对因大丽轮枝菌感染导致的黄栌枯萎病的防治具有重要意义。
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公开(公告)号：CN113528678B
公开(公告)日：2021-12-24
申请号：CN202111077375.4
申请日：2021-09-15
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种用于检测松材线虫的gRNA，包含a)向导序列例如SEQ ID NO:1，其能够杂交至靶核苷酸序列，和b)与Cas核酸酶相互作用的框架核酸片段。本发明还公开了一种用于检测松材线虫的试剂盒，包含所述的gRNA或可转录为所述gRNA的DNA。本发明还公开了载体系统，其包含一种或多种载体，所述载体包含：第一调控元件和第二调控元件，所述第一调控元件可操作地连接至编码Cas核酸酶的核苷酸片段，所述第二调控元件可操作地连接至编码所述gRNA的核苷酸片段。
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公开(公告)号：CN113678840A
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN202110988040.1
申请日：2021-08-26
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明涉及林业病害防治技术领域，具体而言，涉及一种防治黄栌枯萎病的方法，包括以下步骤，对黄栌植株的根部施加第一抗黄栌枯萎病药剂；以及对黄栌植株的树干注射第二抗黄栌枯萎病药剂；所述第一抗黄栌枯萎病药剂为枯草芽孢杆菌溶液，所述第二抗黄栌枯萎病药剂为咪鲜胺溶液或多菌灵溶液。相比较单一的防治方法，本发明提供的防治黄栌枯萎病的方法，具有更佳的防治效果。
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公开(公告)号：CN113512596A
公开(公告)日：2021-10-19
申请号：CN202111077374.X
申请日：2021-09-15
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种用于检测松材线虫的crRNA，包含a)向导序列例如SEQ ID NO:1~2中的至少一种，其能够杂交至靶RNA序列，和b)与Cas核酸酶相互作用的框架核酸片段。本发明还公开了一种用于检测松材线虫的试剂盒，包含所述的crRNA或可转录为所述crRNA的DNA。
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公开(公告)号：CN119307644A
公开(公告)日：2025-01-14
申请号：CN202411623778.8
申请日：2024-11-14
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了红缘拟层孔菌实时荧光RAA检测引物和探针及检测方法。本发明实时荧光RAA检测引物和探针的序列如SEQ ID NO:1‑3所示。本发明还提供一种红缘拟层孔菌的RAA（重组酶辅助扩增）荧光检测法，该方法具有操作简便、快速高效、灵敏度高的特点，能够在现场条件下实现对冷杉心腐病的快速准确诊断，为病害的及时防控提供技术支持。
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