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公开(公告)号：CN115198000A
公开(公告)日：2022-10-18
申请号：CN202210861086.1
申请日：2022-07-21
Applicant: 北京寻因生物科技有限公司
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6869 , C40B50/06
Abstract: 本发明属于基因测序领域，具体涉及一种单细胞全序列转录组文库构建的方法，包括：提供多个细胞的目标mRNA；采用逆转录引物对各细胞的目标mRNA进行逆转录，得到各细胞的cDNA第一链；采用cDNA第二链引物对对以各细胞的cDNA第一链为模板合成各细胞的多个cDNA第二链片段；将多个细胞的多个cDNA第二链片段与多个标签体一一对应连接，得到多个标记cDNA片段；将多个所述标记cDNA片段进行富集后，并引入文库标签，得到所述单细胞全序列转录组文库。本发明采用带有随机序列的正向引物合成多个cDNA第二链片段，通过粘性末端在每个cDNA第二链片段连接分子标签，同时在不同细胞来源的cDNA片段上连接不同的细胞标签，以此将不同的细胞进行分辨，实现了高通量单细胞全序列测序。
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公开(公告)号：CN115198000B
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202210861086.1
申请日：2022-07-21
Applicant: 北京寻因生物科技有限公司
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6869 , C40B50/06
Abstract: 本发明属于基因测序领域，具体涉及一种单细胞全序列转录组文库构建的方法，包括：提供多个细胞的目标mRNA；采用逆转录引物对各细胞的目标mRNA进行逆转录，得到各细胞的cDNA第一链；采用cDNA第二链引物对对以各细胞的cDNA第一链为模板合成各细胞的多个cDNA第二链片段；将多个细胞的多个cDNA第二链片段与多个标签体一一对应连接，得到多个标记cDNA片段；将多个所述标记cDNA片段进行富集后，并引入文库标签，得到所述单细胞全序列转录组文库。本发明采用带有随机序列的正向引物合成多个cDNA第二链片段，通过粘性末端在每个cDNA第二链片段连接分子标签，同时在不同细胞来源的cDNA片段上连接不同的细胞标签，以此将不同的细胞进行分辨，实现了高通量单细胞全序列测序。
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公开(公告)号：CN115198001A
公开(公告)日：2022-10-18
申请号：CN202210874582.0
申请日：2022-07-21
Applicant: 北京寻因生物科技有限公司
IPC: C12Q1/6806 , C40B50/06
Abstract: 本发明属于基因测序领域，具体提供一种单细胞全序列转录组文库构建方法及应用，包括：提供多个细胞的目标mRNA；采用逆转录引物对对多个所述细胞的所述目标mRNA进行逆转录，得到多个细胞的多个cDNA片段；将多个细胞的多个所述cDNA片段与多个标签体一一对应连接，得到各细胞的多个标记cDNA片段；将各所述标记cDNA片段经过富集，并引入文库标签后，得到所述单细胞全序列转录组文库。本发明采用带有随机序列的正向引物与带有固定序列的反向引物对目标mRNA进行逆转录，形成多个带有粘性末端的cDNA片段产物，通过粘性末端在cDNA全长序列的任一位置引入分子标签，同时不同细胞来源的cDNA片段上连接不同的细胞标签，以此将不同的细胞进行分辨，实现了高通量单细胞全序列测序。
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公开(公告)号：CN115198001B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202210874582.0
申请日：2022-07-21
Applicant: 北京寻因生物科技有限公司
IPC: C12Q1/6806 , C40B50/06
Abstract: 本发明属于基因测序领域，具体提供一种单细胞全序列转录组文库构建方法及应用，包括：提供多个细胞的目标mRNA；采用逆转录引物对对多个所述细胞的所述目标mRNA进行逆转录，得到多个细胞的多个cDNA片段；将多个细胞的多个所述cDNA片段与多个标签体一一对应连接，得到各细胞的多个标记cDNA片段；将各所述标记cDNA片段经过富集，并引入文库标签后，得到所述单细胞全序列转录组文库。本发明采用带有随机序列的正向引物与带有固定序列的反向引物对目标mRNA进行逆转录，形成多个带有粘性末端的cDNA片段产物，通过粘性末端在cDNA全长序列的任一位置引入分子标签，同时不同细胞来源的cDNA片段上连接不同的细胞标签，以此将不同的细胞进行分辨，实现了高通量单细胞全序列测序。
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