巴氏芽孢杆菌遗传转化体系的构建方法

    公开(公告)号:CN119020390B

    公开(公告)日:2025-01-24

    申请号:CN202411436222.8

    申请日:2024-10-15

    Abstract: 本发明公开了一种巴氏芽孢杆菌遗传转化体系的构建方法,包括以下步骤:向含巴氏芽孢杆菌感受态细胞的电击缓冲液中加入质粒pBBR1MCS‑2,混匀,进行电击,加入复苏培养基,培养2~3 h,得到菌液,取菌液涂布到菌株选择培养基中培养,菌株选择培养基生长出的菌落为转化子。本发明使用溶菌酶将巴氏芽孢杆菌菌株细胞壁部分酶解后,对获得的巴氏芽孢杆菌感受态细胞进行电击转化获得转化子。本发明成功的利用电击转化法将含有Kan基因的质粒pBBR1MCS‑2转化至巴氏芽孢杆菌菌株中,转化子经转接后,仍能检测到目的基因,表明成功构建了遗传转化体系。

    一种微生物修复液及其在砂质基坑坡面防护中的应用方法

    公开(公告)号:CN109576193B

    公开(公告)日:2021-06-18

    申请号:CN201910037601.2

    申请日:2019-01-15

    Abstract: 本发明公开了一种微生物修复液及其在砂质基坑坡面防护中的应用方法。所述微生物修复液包括相互独立的微生物矿化溶液以及微生物胶结溶液。微生物矿化溶液由相互独立的矿化菌液和矿化菌营养液组成;所述矿化菌液和矿化菌营养液的喷洒体积比为1︰(2~5)。所述微生物胶结溶液由相互独立的沙漠自源胶结菌液、沙漠自源胶结菌营养液组成;所述沙漠自源胶结菌液和沙漠自源胶结菌营养液的喷洒体积比为1︰(1~3)。本发明利用一种绿色环保的微生物修复液对砂质基坑坡面进行固化,是一种新型的基坑围护形式。本发明对传统的微生物固化技术进行改进并引入基坑工程,为砂质基坑的放坡开挖提供了新的护坡方式。

    一种分散性土的绿色微生物改性剂的制备方法和应用方法

    公开(公告)号:CN111548040A

    公开(公告)日:2020-08-18

    申请号:CN202010540325.4

    申请日:2020-06-15

    Abstract: 本发明公开了一种分散性土的绿色微生物改性剂的制备方法和应用方法,微生物改性剂由试剂A和试剂B所组成,试剂A为经微生物菌液所提取的胞内外脲酶溶液,试剂B为能够促使脲酶发挥水解作用的尿素溶液和钙源溶液;采用试剂A和B与分散性土样交替拌合的方式进行分散性的改良,矿化改良经历的时间为7d。本发明的优点是:对于分散性土体,微生物改性剂可以增加土壤颗粒之间的粘聚力和吸引力,增强了土壤抵抗水体冲蚀的能力,改善土壤的分散性;相比传统化学类改性剂,微生物改性剂绿色环保且与岩土类材料具有天然亲和力,应用于分散性土具有显著抗分散效果;将水利筑坝材料改良技术与绿色微生物制剂相结合,在水利筑坝材料改良中拥有良好应用前景。

    沙漠自源固化菌株的分离方法及其固化砂土能力验证方法

    公开(公告)号:CN109666610A

    公开(公告)日:2019-04-23

    申请号:CN201910037590.8

    申请日:2019-01-15

    CPC classification number: C12N1/20 C12N1/02 E02D3/00

    Abstract: 本发明公开了沙漠自源固化菌株的分离方法及其固化砂土能力验证方法。菌株的分离方法如下:从内蒙古沙漠中取深度120~150cm处的沙漠土壤,放入液体培养基中振荡并制备成不同浓度的稀释溶液,然后不同浓度的稀释溶液将分别涂布于固体培养基上,进行恒温培养。再挑取固体培养基上的单菌落进行试培养并选取有固化效果的菌落,反复划线5-6次进行纯化,直至出现单菌落并选为所述沙漠自源固化菌株。本发明通过分离纯化技术从混杂的天然微生物中分离出芽孢杆菌,其具有很好的研究和应用价值,并适合在砂类土壤的结皮与改良中大规模推广。芽孢杆菌作为一种新型固化土壤的微生物菌种,其具有很好的固化能力。

    一种微生物修复液及其在砂质基坑坡面防护中的应用方法

    公开(公告)号:CN109576193A

    公开(公告)日:2019-04-05

    申请号:CN201910037601.2

    申请日:2019-01-15

    Abstract: 本发明公开了一种微生物修复液及其在砂质基坑坡面防护中的应用方法。所述微生物修复液包括相互独立的微生物矿化溶液以及微生物胶结溶液。微生物矿化溶液由相互独立的矿化菌液和矿化菌营养液组成;所述矿化菌液和矿化菌营养液的喷洒体积比为1︰(2~5)。所述微生物胶结溶液由相互独立的沙漠自源胶结菌液、沙漠自源胶结菌营养液组成;所述沙漠自源胶结菌液和沙漠自源胶结菌营养液的喷洒体积比为1︰(1~3)。本发明利用一种绿色环保的微生物修复液对砂质基坑坡面进行固化,是一种新型的基坑围护形式。本发明对传统的微生物固化技术进行改进并引入基坑工程,为砂质基坑的放坡开挖提供了新的护坡方式。

    一种沙漠绿色生态治理方法
    7.
    发明公开

    公开(公告)号:CN108934252A

    公开(公告)日:2018-12-07

    申请号:CN201810726149.6

    申请日:2018-07-04

    CPC classification number: A01B79/00 A01B79/02 C12N1/20

    Abstract: 本发明公开一种沙漠绿色生态治理方法,其包括步骤:对待治理沙漠区进行区域分割,将所述待治理沙漠区分割为多个植被种植区与多个微生物覆膜沙土区;将沙漠自源菌CGMCC No.15633种子活化,逐级扩大培养;在多个所述微生物覆膜沙土区内分别喷洒沙漠自源生物胶结剂,每个微生物覆膜沙土区在沙漠自源生物胶结剂的作用下形成微生物覆膜层,固定所述待治理沙漠区的表层沙土;在所述多个植被种植区内分别种植多棵沙柳,每个植被种植区在相应的沙柳作用下形成植被层,固定所述待治理沙漠区的下部沙土层。本发明能对沙漠土进行原位覆膜,防止外来生物入侵压制和排挤本地生物,真正做到以沙治沙的目的。

    一种沙漠原位微生物覆膜层的制备方法

    公开(公告)号:CN108929703A

    公开(公告)日:2018-12-04

    申请号:CN201810726151.3

    申请日:2018-07-04

    Abstract: 本发明公开一种沙漠原位微生物覆膜层的制备方法,其包括步骤:将沙漠自源菌CGMCC No.15633种子活化,逐级扩大培养;在待治理沙漠区内喷洒沙漠自源生物胶结剂,待治理沙漠区的表层沙土在沙漠自源生物胶结剂的作用下形成微生物覆膜层。沙漠自源生物胶结剂包括沙漠自源菌液、胶结营养液以及胶结颗粒;所述沙漠自源菌液由沙漠自源菌经过扩培而成。胶结营养液主要由CO(NH2)2、CaCl2.2H2O物质组成;胶结颗粒主要成分为可降解高分子吸水聚合物。胶结颗粒以每平方米50-70克均匀喷洒入所述微生物覆膜沙土区内,一平方米的所述微生物覆膜沙土区喷洒5-6升沙漠自源菌液,12-15升的所述胶结营养液。本发明能对沙漠土进行原位覆膜,防止外来生物入侵压制和排挤本地生物,真正做到以沙治沙的目的。

    微生物钙质胶及制备方法、应用、砂土柱及制备方法

    公开(公告)号:CN108823259A

    公开(公告)日:2018-11-16

    申请号:CN201810725501.4

    申请日:2018-07-04

    Abstract: 本发明公开一种绿色微生物钙质胶及其制备方法、应用、砂土柱及其制备方法。绿色微生物钙质胶包括体积比为1:(10~100):(0.001~1)的矿化性能的微生物菌液、钙源营养液、绿色胶质。微生物菌液在制备时,菌种为巴氏芽孢杆菌八叠球菌,按照5%的接种量接种至培养基中震荡扩培制成菌液。钙源营养液在制备时,根据配方配制钙源营养液,营养液配制完成时间保证在喷洒前不少于3个小时且不超过6个小时。绿色胶质为具有胶性的生物大分子的液体,这种具有胶性的生物大分子的液体从细胞分泌的胞外多糖或纯化后的多糖类制品中溶解而成。本发明能够改善单纯依靠微生物诱导的钙质胶结砂土材料脆性太大的缺陷,有效提高砂土固结的效果。

    巴氏芽孢杆菌遗传转化体系的构建方法

    公开(公告)号:CN119020390A

    公开(公告)日:2024-11-26

    申请号:CN202411436222.8

    申请日:2024-10-15

    Abstract: 本发明公开了一种巴氏芽孢杆菌遗传转化体系的构建方法,包括以下步骤:向含巴氏芽孢杆菌感受态细胞的电击缓冲液中加入质粒pBBR1MCS‑2,混匀,进行电击,加入复苏培养基,培养2~3 h,得到菌液,取菌液涂布到菌株选择培养基中培养,菌株选择培养基生长出的菌落为转化子。本发明使用溶菌酶将巴氏芽孢杆菌菌株细胞壁部分酶解后,对获得的巴氏芽孢杆菌感受态细胞进行电击转化获得转化子。本发明成功的利用电击转化法将含有Kan基因的质粒pBBR1MCS‑2转化至巴氏芽孢杆菌菌株中,转化子经转接后,仍能检测到目的基因,表明成功构建了遗传转化体系。

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