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公开(公告)号：CN104450675B
公开(公告)日：2017-11-21
申请号：CN201310452575.2
申请日：2013-09-25
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种从基因组DNA中获得侧翼序列的方法。该方法包括如下步骤：1）根据基因组DNA上的已知序列设计三条方向一致用于扩增侧翼序列的特异性引物，按距离侧翼序列由远及近的顺序将其依次记为GSP1、GSP2和GSP3；2）以基因组DNA为模板，以引物SAP（序列1‑15中任一）和所述GSP1进行第一轮PCR扩增，得到PCR产物1；3）以所述PCR产物1为模板，以引物SEP（序列16和17）和所述GSP2进行第二轮PCR扩增，得到PCR产物2；4）以所述PCR产物2为模板，以引物SNP（序列18）和所述GSP3进行第三轮PCR扩增，得到PCR产物3，从而获得所述侧翼序列。本发明所提供方法具有如下优点：操作简易、高特异性扩增、高成功率、容易得到大的片段、耗时短等。
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公开(公告)号：CN104450675A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201310452575.2
申请日：2013-09-25
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种从基因组DNA中获得侧翼序列的方法。该方法包括如下步骤：1）根据基因组DNA上的已知序列设计三条方向一致用于扩增侧翼序列的特异性引物，按距离侧翼序列由远及近的顺序将其依次记为GSP1、GSP2和GSP3；2）以基因组DNA为模板，以引物SAP（序列1-15中任一）和所述GSP1进行第一轮PCR扩增，得到PCR产物1；3）以所述PCR产物1为模板，以引物SEP（序列16和17）和所述GSP2进行第二轮PCR扩增，得到PCR产物2；4）以所述PCR产物2为模板，以引物SNP（序列18）和所述GSP3进行第三轮PCR扩增，得到PCR产物3，从而获得所述侧翼序列。本发明所提供方法具有如下优点：操作简易、高特异性扩增、高成功率、容易得到大的片段、耗时短等。
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公开(公告)号：CN1733906A
公开(公告)日：2006-02-15
申请号：CN200510090285.3
申请日：2005-08-12
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了针叶树种体细胞胚胎发生培养基。本发明所提供的针叶树种体细胞胚胎发生培养基，包括如下组分：KNO31836－2836mg/L，NH4NO3243－360mg/L，KH2PO470－130mg/L，CaCl2·2H2O 300－450mg/L，MgSO4·7H2O 130－250mg/L，H3BO32－11mg/L，ZnSO4·7H2O 3－7mg/L，MnSO4·H2O 6.5－10.5mg/L，Na2MoO4·2H2O 0.11－0.21mg/L，KI0.28－0.63mg/L，CuSO4·5H2O 0.01－0.035mg/L，CoCl20.01－0.035mg/L，2，4－二氯苯氧乙酸0.1－3.6mg/L，6－苄氨基嘌呤0.02－3.2mg/L，蔗糖5－120g/L。本发明通过调节培养基中2，4－D(2，4－二氯苯氧乙酸)、BA(6－苄氨基嘌呤)的浓度比例关系，来优化针叶树种体细胞胚胎发生培养基，有利于胚性细胞的保持和快速增殖，将培养得到的胚性细胞与组织接种于无激素培养基上过渡培养，可以促进产生大量的子叶胚，并能够提高正常子叶胚比例的发生，可以广泛应用于落叶松等针叶树种的培养、发育。
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公开(公告)号：CN115807030B
公开(公告)日：2023-06-09
申请号：CN202211535987.8
申请日：2022-12-02
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明公开了一种与落叶松开花时间相关的LaSCL6蛋白及其编码基因和应用，属于植物基因工程领域。所述的调控落叶松育种周期的关键基因LaSCL6，其核苷酸序列如序列1所示，其编码的氨基酸序列如序列2所示，属于GRAS转录因子家族。本发明通过构建LaSCL6的过表达载体，转化水稻获得了LaSCL6过表达水稻株系，如序列3所示，与野生型相比，LaSCL6过表达株系的开花时间均显著提前，说明LaSCL6具有缩短育种周期、提高育种效率的功能，在林木遗传育种中具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN115807030A
公开(公告)日：2023-03-17
申请号：CN202211535987.8
申请日：2022-12-02
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明公开了一种与落叶松开花时间相关的LaSCL6蛋白及其编码基因和应用，属于植物基因工程领域。所述的调控落叶松育种周期的关键基因LaSCL6，其核苷酸序列如序列1所示，其编码的氨基酸序列如序列2所示，属于GRAS转录因子家族。本发明通过构建LaSCL6的过表达载体，转化水稻获得了LaSCL6过表达水稻株系，如序列3所示，与野生型相比，LaSCL6过表达株系的开花时间均显著提前，说明LaSCL6具有缩短育种周期、提高育种效率的功能，在林木遗传育种中具有重要的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106893737B
公开(公告)日：2020-04-21
申请号：CN201510953701.1
申请日：2015-12-17
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明公开了一种落叶松胚性细胞的遗传转化方法。本发明提供了一种落叶松胚性细胞的遗传转化方法，依次包括如下步骤：(a1)取落叶松胚性细胞，悬浮于重组农杆菌侵染液进行侵染；(a2)完成步骤(a1)后，收集落叶松胚性细胞，进行恢复培养；(a3)完成步骤(a2)后，取落叶松胚性细胞，采用抽滤脱菌装置进行脱菌。本发明提供的方法，可用于利用基因工程手段对落叶松进行快速定向遗传改良，为研究外源基因在落叶松体内表达调控及其功能验证和胚胎发育研究提供技术平台。
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公开(公告)号：CN100427586C
公开(公告)日：2008-10-22
申请号：CN200510090282.X
申请日：2005-08-12
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了一种固体培养获得针叶树种胚状体的方法及其培养基。本发明所提供的针叶树种胚状体固体培养基，包括诱导培养基、增殖培养基和成熟培养基，所述成熟培养基分为成熟培养基1或成熟培养基2。应用上述固体培养基，固体培养获得针叶树种胚状体的方法，包括如下步骤：诱导培养、增殖培养和成熟培养，得到所述胚状体。本发明通过对培养各阶段培养基组分的优化，提高了胚性愈伤组织质量，早期原胚质量大大改善，与现有技术相比，体细胞胚培养发生状况取得了重大突破。
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公开(公告)号：CN114853860B
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202210672532.4
申请日：2022-06-15
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明公开了与缩短落叶松育种周期相关的蛋白及其应用，属于变异或遗传工程领域。本发明所要解决的技术问题是如何缩短落叶松的育种周期和/或开花时间。本发明所提供的与缩短落叶松育种周期相关的蛋白质的名称为LaDAL1，其氨基酸序列为序列2。该蛋白质的编码基因的核苷酸序列为序列1。本发明通过构建LaDAL1的过表达载体，转化拟南芥获得了LaDAL1过表达拟南芥株系，与野生型拟南芥相比，LaDAL1过表达拟南芥株系的抽薹、开花和停止生长的时间均显著提前，说明LaDAL1促进了拟南芥生命周期的运转，具有缩短育种周期、提高育种效率的功能。本发明可用于林木遗传育种改良。
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公开(公告)号：CN116004619A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202211016162.5
申请日：2022-08-24
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
Abstract: 本发明提供了一种落叶松LaTCTP启动子及其应用，属于启动子技术领域。本发明提供的落叶松LaTCTP启动子的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。本发明所述落叶松LaTCTP启动子为落叶松组成型启动子，能够驱动外源基因在植物中的高效表达，为进一步开发利用落叶松LaTCTP启动子提供了理论依据，为建立落叶松外源基因高效表达体系奠定基础。
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公开(公告)号：CN112753578A
公开(公告)日：2021-05-07
申请号：CN202110097023.9
申请日：2021-01-25
Applicant: 中国林业科学研究院林业研究所
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种枸杞愈伤组织组织诱导以及快速增殖的方法，涉及植物组织培养技术领域。选取生长健壮的枸杞茎段；选择枸杞的茎段作为外植体,将消毒后的将茎段用切成2‑3cm长度的小段接种到诱导培养基上，茎段插入深度为1‑2cm。接种到诱导培养基，在22‑24℃，光照2000Lux，每天光照培养16小时以及暗培养8小时。本发明以枸杞为材料产生的茎段外植体愈伤组织组织既可用于细胞悬浮培养获得代谢产物，也可以经愈伤组织胎发生或器官发生获得再生植株，进而达到快速繁殖的目的；材料活性高、增殖倍数可达到3～7倍。
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