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公开(公告)号:CN114835782B
公开(公告)日:2023-10-20
申请号:CN202210570210.9
申请日:2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/18 , C12N15/40 , C12N15/85 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种猪瘟病毒E0截短蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种猪瘟病毒E0截短蛋白,显著促进了E0蛋白的表达,产量可达0.38 mg/ml,而且不影响E0蛋白的免疫原性,可用于猪瘟亚单位疫苗的制备;在上述猪瘟病毒E0截短蛋白的基础上,本发明发现,将E0截短蛋白的第160位、162位、165位和166位氨基酸均突变为甘氨酸G,能够使E0截短蛋白的表达量进一步提升30%以上,且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号:CN114805609A
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202210571519.X
申请日:2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种猪瘟病毒E2‑E0融合蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种猪瘟病毒E0截短蛋白与猪瘟病毒E2蛋白的E2‑E0融合蛋白,不仅能够促进E0蛋白的表达,而且不影响E0蛋白和E2蛋白的免疫原性,可用于猪瘟亚单位疫苗的制备;在上述猪瘟病毒E0截短蛋白的基础上,本发明发现,将猪瘟病毒E0截短蛋白的第160位、162位、165位和166位氨基酸均突变为甘氨酸G,能够使E2‑E0融合蛋白的表达量进一步提升20%以上,且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号:CN114773438A
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN202210571389.X
申请日:2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白,显著促进了E0蛋白的表达,产量可达0.35mg/ml,而且不影响E0蛋白的免疫原性,可用于牛病毒性腹泻亚单位疫苗的制备;在上述牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白的基础上,本发明发现,将E0截短蛋白的160‑162位氨基酸由IAA突变为GGG,能够使E0截短蛋白的表达量进一步提升30%以上,且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号:CN114853912B
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202210571495.8
申请日:2022-05-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种牛病毒性腹泻病毒E2‑E0融合蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种将牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白与牛病毒性腹泻病毒E2蛋白融合,不仅能够促进E0蛋白的表达,而且不影响E0蛋白的免疫原性,可用于牛病毒性腹泻亚单位疫苗的制备;在上述牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白的基础上,本发明发现,将牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白的160‑162位氨基酸由IAA突变为GGG,能够使E2‑E0融合蛋白的表达量进一步提升18%以上,且不影响其免疫原性。
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公开(公告)号:CN114316035B
公开(公告)日:2023-05-26
申请号:CN202210010319.7
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,筛选获得两株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了两种鼠单克隆抗体m33和m77。免疫印迹和间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m33和m77对O型不同谱系病毒和A型谱系不同病毒均具有广谱反应性。m33和m77抗体特异性结合在FMDV结构蛋白中的型间保守抗原表位,相较于现有抗体,显著提高了检测结果的灵敏度和特异性,适用于O型和A型FMDV感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测,是一种FMD非免疫动物群体感染状况监测的新方法。
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公开(公告)号:CN114921397A
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202210619983.1
申请日:2022-06-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/125
Abstract: 本发明属于生物医药领域,涉及一种表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP3的枯草芽孢杆菌及应用。本发明将表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP3的重组质粒转化至枯草芽孢杆菌WB800N,获得了一种表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP3的重组枯草芽孢杆菌;所述重组枯草芽孢杆菌在高效表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VP3的同时,具有良好的免疫反应性,能够诱导机体产生体液免疫应答和细胞免疫应答。还可以作为黏膜疫苗,经口服免疫后,产生较高水平的抗原特异性IgG抗体及黏膜sIgA抗体,升高外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞的比例,刺激脾脏淋巴细胞增殖,并促进细胞因子IFN‑γ、IL‑2和IL‑4的表达。
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公开(公告)号:CN114316037A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202210011223.2
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种O型口蹄疫病毒结构蛋白的抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,获得一株高效分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系,并获得了一种鼠单克隆抗体m19。间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m19对O型不同谱系毒株均具有很好的反应性,而不和A型不同谱系毒株反应。利用单克隆抗体m19和O型结构蛋白兔抗血清建立了O型口蹄疫病毒结构蛋白固相竞争ELISA检测试剂盒,相较于现有抗体,显著提高了检测结果的灵敏度和特异性,适用于O型口蹄疫感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测,同时,也是一种监测口蹄疫非免疫地区感染情况的新方法。
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公开(公告)号:CN114316036B
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN202210011206.9
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种O型口蹄疫病毒广谱中和抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了一种鼠单克隆抗体9H6‑VP1,所述单克隆抗体9H6‑VP1为IgG1型单克隆抗体。免疫印迹试验表明所述单克隆抗体9H6‑VP1对O型不同谱系病毒(O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93)具有广谱反应性,而不和A型毒株进行反应;而且病毒中和实验表明所述单克隆抗体对O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93均具有中和活性,可阻止病毒入侵,保护机体免受感染。
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公开(公告)号:CN114316036A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202210011206.9
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 茹毅 , 秦晓东 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种O型口蹄疫病毒广谱中和抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,筛选获得一株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了一种鼠单克隆抗体9H6‑VP1,所述单克隆抗体9H6‑VP1为IgG1型单克隆抗体。免疫印迹试验表明所述单克隆抗体9H6‑VP1对O型不同谱系病毒(O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93)具有广谱反应性,而不和A型毒株进行反应;而且病毒中和实验表明所述单克隆抗体对O/ZK/93、O/Mya/98和O/HK/93均具有中和活性,可阻止病毒入侵,保护机体免受感染。
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公开(公告)号:CN114316035A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202210010319.7
申请日:2022-01-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor: 郑海学 , 杨洋 , 秦晓东 , 茹毅 , 张伟 , 杨帆 , 曹伟军 , 朱紫祥 , 卢炳州 , 赵东梅 , 任蕊芳 , 吴秀萍 , 郝荣增 , 刘华南 , 李亚军 , 吴国华 , 李丹 , 田宏 , 张克山 , 毛箬青
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,筛选获得两株高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,并获得了两种鼠单克隆抗体m33和m77。免疫印迹和间接免疫荧光试验表明所述单克隆抗体m33和m77对O型不同谱系病毒和A型谱系不同病毒均具有广谱反应性。m33和m77抗体特异性结合在FMDV结构蛋白中的型间保守抗原表位,相较于现有抗体,显著提高了检测结果的灵敏度和特异性,适用于O型和A型FMDV感染或灭活疫苗免疫后结构蛋白抗体的检测,是一种FMD非免疫动物群体感染状况监测的新方法。
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