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公开(公告)号：CN113583876B
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202110882861.7
申请日：2021-08-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开EYFP敲入到Et.Actin基因的鸡柔嫩艾美尔球虫虫株的制备。该专利将FnCas12a蛋白，体外合成的crRNA和同源重组片段（含有P2A‑DHFR‑EYFP表达框的Et.Actin基因）利用Lonza 4D‑Nucleofector核转仪导入鸡柔嫩艾美尔球虫子孢子，实现对鸡柔嫩艾美尔球虫的编辑。将编辑虫株经过鸡体内乙胺嘧啶筛选，获得高纯度的基因编辑虫株。然后，利用PCR和Sanger测序技术对基因编辑虫株进行验证，证明EYFP成功标记了Et.Actin基因。通过细胞培养该虫株的子孢子并感染鸡后，取盲肠粘膜并涂片显示该EYFP在基因编辑虫株的整个生活史中都有表达。此基因编辑方法能够对鸡球虫的基因进行定点标记，有助于解析球虫基因的功能。本专利对新型抗球虫药物和疫苗的研发也具有重要意义。
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公开(公告)号：CN113583876A
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202110882861.7
申请日：2021-08-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开EYFP敲入到Et.Actin基因的鸡柔嫩艾美尔球虫虫株的制备。该专利将FnCas12a蛋白，体外合成的crRNA和同源重组片段（含有P2A‑DHFR‑EYFP表达框的Et.Actin基因）利用Lonza 4D‑Nucleofector核转仪导入鸡柔嫩艾美尔球虫子孢子，实现对鸡柔嫩艾美尔球虫的编辑。将编辑虫株经过鸡体内乙胺嘧啶筛选，获得高纯度的基因编辑虫株。然后，利用PCR和Sanger测序技术对基因编辑虫株进行验证，证明EYFP成功标记了Et.Actin基因。通过细胞培养该虫株的子孢子并感染鸡后，取盲肠粘膜并涂片显示该EYFP在基因编辑虫株的整个生活史中都有表达。此基因编辑方法能够对鸡球虫的基因进行定点标记，有助于解析球虫基因的功能。本专利对新型抗球虫药物和疫苗的研发也具有重要意义。
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公开(公告)号：CN112592953B
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202011514304.1
申请日：2020-12-21
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开一种抑制人腺病毒增殖药物的高通量筛选方法及其应用。该专利中为标记GFP的人腺病毒在感染HEK‑293细胞后能表达绿色荧光蛋白，使感染的细胞在荧光显微镜下呈绿色。抗人腺病毒的药物活性通过以下实现，利用流式细胞术检测HEK‑293细胞在添加抗腺病毒药物和人腺病毒后，培养基上清中的腺病毒含量的变化。具体操作为，取适量的病毒上清重新加入一定量的HEK‑293细胞中，用流式细胞术测定细胞中被腺病毒感染的细胞的比率（带有绿色荧光的细胞），以此来评估添加药物对腺病毒增殖是否有明显的抑制作用。此方法，可以在体外快速、简便，低廉，有效，高通量的筛选候选药物分子是否具有抑制人腺病毒的作用。本专利将加速新型抗人腺病毒药物的研发。
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公开(公告)号：CN111280179A
公开(公告)日：2020-06-16
申请号：CN202010184965.6
申请日：2020-03-17
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种抗球虫消毒剂，其消毒剂是以质量百分比计的下述组分组合而成，其具体组分为：氯化物20-80%、过硫酸氢钾80-20%；或者为：过硫酸氢钾40-60%、氯化物20-60%、酸化剂0-5%、表面活性剂0-10%、缓蚀剂0-10%、干燥剂0-5%、指示剂0-0.2%；其中，所述氯化物为氯化钠或氯化钾。本发明对球虫卵囊有杀灭作用，能有效抑杀球虫未孢子化卵囊和孢子化卵囊。
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