公开(公告)号：CN110305897A

公开(公告)日：2019-10-08

申请号：CN201910484405.X

申请日：2019-06-05

Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

Inventor： 谷峰 ,  杨发誉

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/65 ,  C12N5/10 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开一种快速测定基因组编辑活性的三基因报告系统，该报告系统包括三基因报告细胞系和基因编辑系统活性的快速检测体系。所述三基因报告细胞系为在HEK-293细胞AAVS1位点整合有TK-Neo-T2A-GFP-Ires-Puro基因的单克隆HEK-293-AAVS-TK-Neo-T2A-GFP细胞系，TK-Neo-T2A-GFP基因的序列如SEQ ID NO.1所示；所述基因编辑系统活性的快速检测体系为针对三报告基因TK、Neo和GFP基因分别设计单链引导RNA，构建质粒后转染报告细胞系。利用本发明的三基因报告系统可以在体外快速、有效、高通量的对基因组编辑工具的活性进行检测，有助于基因编辑系统的快速筛选和优化，为基因编辑工具的研发提供一个高效的筛选平台。

公开(公告)号：CN110305897B

公开(公告)日：2023-03-31

申请号：CN201910484405.X

申请日：2019-06-05

Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

Inventor： 谷峰 ,  杨发誉

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/65 ,  C12N5/10 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开一种快速测定基因组编辑活性的三基因报告系统，该报告系统包括三基因报告细胞系和基因编辑系统活性的快速检测体系。所述三基因报告细胞系为在HEK‑293细胞AAVS1位点整合有TK‑Neo‑T2A‑GFP‑Ires‑Puro基因的单克隆HEK‑293‑AAVS‑TK‑Neo‑T2A‑GFP细胞系，TK‑Neo‑T2A‑GFP基因的序列如SEQ ID NO.1所示；所述基因编辑系统活性的快速检测体系为针对三报告基因TK、Neo和GFP基因分别设计单链引导RNA，构建质粒后转染报告细胞系。利用本发明的三基因报告系统可以在体外快速、有效、高通量的对基因组编辑工具的活性进行检测，有助于基因编辑系统的快速筛选和优化，为基因编辑工具的研发提供一个高效的筛选平台。