猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽及其筛选方法

    公开(公告)号:CN104774249B

    公开(公告)日:2018-04-10

    申请号:CN201510190932.1

    申请日:2015-04-21

    Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽及其筛选方法,所述M蛋白亲和肽的氨基酸序列为AGWYCTEVLCVQ或AYCTRHVCYLDN。本发明利用噬菌体展示技术获得能特异性结合PEDV及其重组蛋白M的短肽,并对该短肽人工合成,分析其抗病毒的生物学功能,结果表明本发明首次筛选合成的2种PEDV M蛋白的亲和多肽均能够有效的抑制PEDV的复制,这为今后对PEDV小分子诊断和治疗制剂的开发提供了一定的理论基础和试验依据。

    猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽及其筛选方法

    公开(公告)号:CN104774249A

    公开(公告)日:2015-07-15

    申请号:CN201510190932.1

    申请日:2015-04-21

    Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽及其筛选方法,所述M蛋白亲和肽的氨基酸序列为AGWYCTEVLCVQ或AYCTRHVCYLDN。本发明利用噬菌体展示技术获得能特异性结合PEDV及其重组蛋白M的短肽,并对该短肽人工合成,分析其抗病毒的生物学功能,结果表明本发明首次筛选合成的2种PEDV M蛋白的亲和多肽均能够有效的抑制PEDV的复制,这为今后对PEDV小分子诊断和治疗制剂的开发提供了一定的理论基础和试验依据。

    猪轮状病毒反转录环节导等温扩增检测方法及应用

    公开(公告)号:CN104694670A

    公开(公告)日:2015-06-10

    申请号:CN201510122293.5

    申请日:2015-03-20

    CPC classification number: C12Q1/701 C12Q1/6844 C12Q2531/119 C12Q2563/107

    Abstract: 本发明公开了一种猪轮状病毒反转录环节导等温扩增检测方法及应用。所述检测方法步骤如下:(1)建立RT-LAMP反应体系,同时设立阴性对照;所述RT-LAMP反应体系共25μL,包括:模板2μL,0.8μM FIP和BIP引物各0.5 μL,0.2 μM的F3和B3引物各0.25μL,2μL dNTP,5 mM MgS04,8UBst DNA polymerase和1×ThermoPol Buffer,1μL MLV反转录酶,用灭菌水体积补足至25 μL;所述阴性对照的模板为灭菌水;(2)在恒温水浴锅中61-65℃反应20-60 min后,80℃终止20 min,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定或加入2 μL SYBR Green I染料,紫外灯下或肉眼观察结果。本发明为PRV的临床诊断与流行病学调查提供了一种简单、快速和准确的分子生物学诊断方法。

    猪轮状病毒反转录环节导等温扩增检测方法及应用

    公开(公告)号:CN104694670B

    公开(公告)日:2017-09-19

    申请号:CN201510122293.5

    申请日:2015-03-20

    Abstract: 本发明公开了一种猪轮状病毒反转录环节导等温扩增检测方法及应用。所述检测方法步骤如下:(1)建立RT‑LAMP反应体系,同时设立阴性对照;所述RT‑LAMP反应体系共25μL,包括:模板2μL,0.8μM FIP和BIP引物各0.5μL,0.2μM的F3和B3引物各0.25μL,2μL dNTP,5 mM MgS04,8 U Bst DNA polymerase和1×ThermoPol Buffer,1μL MLV反转录酶,用灭菌水体积补足至25μL;所述阴性对照的模板为灭菌水;(2)在恒温水浴锅中61‑65℃反应20‑60 min后,80℃终止20 min,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定或加入2μL SYBR Green I染料,紫外灯下或肉眼观察结果。本发明为PRV的临床诊断与流行病学调查提供了一种简单、快速和准确的分子生物学诊断方法。

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