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公开(公告)号：CN101864436A
公开(公告)日：2010-10-20
申请号：CN201010183169.7
申请日：2010-05-26
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 同位素13C标记的4-羟基脯氨酸的生物合成方法，它涉及4-羟基脯氨酸的合成方法。它解决了现有制备4-羟基脯氨酸的方法不适用于合成13C标记的4-羟基脯氨酸的问题。方法：一、对指孢囊菌中编码L-脯氨酸的4-羟基化酶的基因phy-1的原始序列进行密码子优化，获得优化的phy-1基因；二、优化的phy-1基因与pET19分别进行双酶切，构建原核表达载体，转入大肠杆菌中进行蛋白高效表达及纯化；三、纯化后的L-脯氨酸的4-羟基化酶进行酶反应，纯化后即完成。本发明实现了13C标记的4-羟基脯氨酸的制备，纯化过程简单，成本低，并且所得13C标记的4-羟基脯氨酸的纯度达99.99％，回收产率为75.34％。
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公开(公告)号：CN101831499B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201010181319.0
申请日：2010-05-24
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种检测粪便中产甲酸草酸杆菌定殖数量的实时PCR方法，它涉及一种定殖数量检测的方法。本发明解决了现有检测产甲酸草酸杆菌数量的方法存在的费时费力，结果误差较大、获得结果的周期长的问题。方法：一、确定检测的粪便中产甲酸草酸杆菌是第一亚组还是第二亚组；二、实时PCR检测、三、根据公式进行计算即得到粪便中产甲酸草酸杆菌定殖数量。本发明的检测方法操作简单，误差小，便于推广，获得结果的周期短，与现有的方法相比较，时间缩短了80％以上，且本发明所得到结果准确，误差小。
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公开(公告)号：CN101864436B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201010183169.7
申请日：2010-05-26
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 同位素13C标记的4-羟基脯氨酸的生物合成方法，它涉及4-羟基脯氨酸的合成方法。它解决了现有制备4-羟基脯氨酸的方法不适用于合成13C标记的4-羟基脯氨酸的问题。方法：一、对指孢囊菌中编码L-脯氨酸的4-羟基化酶的基因phy-1的原始序列进行密码子优化，获得优化的phy-1基因；二、优化的phy-1基因与pET19分别进行双酶切，构建原核表达载体，转入大肠杆菌中进行蛋白高效表达及纯化；三、纯化后的L-脯氨酸的4-羟基化酶进行酶反应，纯化后即完成。本发明实现了13C标记的4-羟基脯氨酸的制备，纯化过程简单，成本低，并且所得13C标记的4-羟基脯氨酸的纯度达99.99％，回收产率为75.34％。
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公开(公告)号：CN101831499A
公开(公告)日：2010-09-15
申请号：CN201010181319.0
申请日：2010-05-24
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种检测粪便中产甲酸草酸杆菌定殖数量的实时PCR方法，它涉及一种定殖数量检测的方法。本发明解决了现有检测产甲酸草酸杆菌数量的方法存在的费时费力，结果误差较大、获得结果的周期长的问题。方法：一、确定检测的粪便中产甲酸草酸杆菌是第一亚组还是第二亚组；二、实时PCR检测、三、根据公式进行计算即得到粪便中产甲酸草酸杆菌定殖数量。本发明的检测方法操作简单，误差小，便于推广，获得结果的周期短，与现有的方法相比较，时间缩短了80％以上，且本发明所得到结果准确，误差小。
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