公开(公告)号：CN102008720B

公开(公告)日：2015-02-25

申请号：CN201010231142.0

申请日：2010-07-20

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 刘松梅 ,  李一经 ,  葛俊伟 ,  朱延明

IPC: A61K39/08 ,  C12N15/31 ,  C12N15/82 ,  A61P31/04

CPC classification number: Y02A50/472

Abstract: 抗魏氏梭菌病转基因植物疫苗及其制作方法。目前免疫接种抗魏氏梭菌病的疫苗保护率较低。本发明包括：(1)以含编码魏氏梭菌毒素的质粒或病料为模板，利用PCR或RT-PCR扩增获得魏氏梭菌毒素基因，将获得的魏氏梭菌毒素基因和Ti或Ri质粒分别进行酶切，回收目的基因和植物表达载体片段，连接并转化大肠杆菌，对重组Ti或Ri质粒进行酶切、PCR和测序鉴定，用重组质粒转化根瘤农杆菌或发根农杆菌，筛选、鉴定阳性重组农杆菌；(2)植物种子经春化、萌发、剪接，获得外植体，用步骤(1)中重组的农杆菌分别侵染外植体，通过筛选、继代、生根、移栽，获得转化植株，筛选鉴定转基因阳性植株。

公开(公告)号：CN102008720A

公开(公告)日：2011-04-13

申请号：CN201010231142.0

申请日：2010-07-20

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 刘松梅 ,  李一经 ,  葛俊伟 ,  朱延明

IPC: A61K39/08 ,  C12N15/31 ,  C12N15/82 ,  A61P31/04

CPC classification number: Y02A50/472

Abstract: 抗魏氏梭菌病转基因植物疫苗及其制作方法。目前免疫接种抗魏氏梭菌病的疫苗保护率较低。本发明包括：(1)以含编码魏氏梭菌毒素的质粒或病料为模板，利用PCR或RT-PCR扩增获得魏氏梭菌毒素基因，将获得的魏氏梭菌毒素基因和Ti或Ri质粒分别进行酶切，回收目的基因和植物表达载体片段，连接并转化大肠杆菌，对重组Ti或Ri质粒进行酶切、PCR和测序鉴定，用重组质粒转化根瘤农杆菌或发根农杆菌，筛选、鉴定阳性重组农杆菌；(2)植物种子经春化、萌发、剪接，获得外植体，用步骤(1)中重组的农杆菌分别侵染外植体，通过筛选、继代、生根、移栽，获得转化植株，筛选鉴定转基因阳性植株。