公开(公告)号：CN112575016B

公开(公告)日：2022-09-06

申请号：CN201910929503.X

申请日：2019-09-29

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 夏小霞 ,  韦绍鹏 ,  陈梦婷 ,  潘芳 ,  钱志刚

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C12N1/21 ,  C12P13/00 ,  C12R1/19

Abstract: 一种原核生物大肠杆菌中无膜细胞器的构建及应用，通过构建由如Seq ID No.1所示络新妇蜘蛛(Nephila clavipes)牵引丝蛋白MaSp1的重复肽段单体的串联体构成的蛋白质和由如Seq ID No.2所示的MaSp2重复肽段单体的串联体构成的蛋白质的重组蛛丝蛋白或类节肢弹性蛋白的表达载体并导入表达宿主中，经过诱导表达后形成可溶蛋白富集相，即无膜区室；无膜区室的组分蛋白以可溶状态存在，最大限度的保留了其生物活性。本发明首次通过大肠杆菌内的无膜细胞器生产1,3‑丙二胺，并首次在无膜细胞器内合成纳米颗粒，比起化学方法合成更加的温和与环保。

公开(公告)号：CN114149954B

公开(公告)日：2023-10-13

申请号：CN202111454147.4

申请日：2021-12-01

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 夏小霞 ,  金清 ,  潘芳 ,  钱志刚

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/77 ,  C12N15/62 ,  C12R1/15

Abstract: 一种利用谷氨酸棒状杆菌高效分泌生产类蛛丝、类弹性蛋白并快速纯化的方法，分别将信号肽序列和重组蛛丝蛋白、类节肢弹性蛋白或类丝节肢弹性蛋白的编码基因连接到表达载体自身启动子序列之后，再将构建的重组表达载体转化到宿主谷氨酸棒状杆菌中，得到谷氨酸棒状杆菌重组菌。本发明通过基因工程改造原始谷氨酸棒状杆菌，提升类蛛丝蛋白的分泌水平，较原始菌株相比，提高2.5倍，并建立快速纯化方法，获得纯度高达93％的目的蛋白。

公开(公告)号：CN114149954A

公开(公告)日：2022-03-08

申请号：CN202111454147.4

申请日：2021-12-01

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 夏小霞 ,  金清 ,  潘芳 ,  钱志刚

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/77 ,  C12N15/62 ,  C12R1/15

Abstract: 一种利用谷氨酸棒状杆菌高效分泌生产类蛛丝、类弹性蛋白并快速纯化的方法，分别将信号肽序列和重组蛛丝蛋白、类节肢弹性蛋白或类丝节肢弹性蛋白的编码基因连接到表达载体自身启动子序列之后，再将构建的重组表达载体转化到宿主谷氨酸棒状杆菌中，得到谷氨酸棒状杆菌重组菌。本发明通过基因工程改造原始谷氨酸棒状杆菌，提升类蛛丝蛋白的分泌水平，较原始菌株相比，提高2.5倍，并建立快速纯化方法，获得纯度高达93％的目的蛋白。

公开(公告)号：CN112575016A

公开(公告)日：2021-03-30

申请号：CN201910929503.X

申请日：2019-09-29

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 夏小霞 ,  韦绍鹏 ,  陈梦婷 ,  潘芳 ,  钱志刚

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C12N1/21 ,  C12P13/00 ,  C12R1/19

Abstract: 一种原核生物大肠杆菌中无膜细胞器的构建及应用，通过构建由如Seq ID No.1所示络新妇蜘蛛(Nephila clavipes)牵引丝蛋白MaSp1的重复肽段单体的串联体构成的蛋白质和由如Seq ID No.2所示的MaSp2重复肽段单体的串联体构成的蛋白质的重组蛛丝蛋白或类节肢弹性蛋白的表达载体并导入表达宿主中，经过诱导表达后形成可溶蛋白富集相，即无膜区室；无膜区室的组分蛋白以可溶状态存在，最大限度的保留了其生物活性。本发明首次通过大肠杆菌内的无膜细胞器生产1,3‑丙二胺，并首次在无膜细胞器内合成纳米颗粒，比起化学方法合成更加的温和与环保。