本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于杂交连锁反应放大的荧光生物传感器。为了解决以上现有技术中检测氨苄青霉素的方法特异性和灵敏度都比较低、成本高的问题。一种基于核酸适配体检测氨苄青霉素的生物传感器，将切刻内切酶Nb.BbcCI与链杂交连锁反应的配合实现循环放大作用，以及硫黄素T与G‑四联体结合产生荧光，均相反应混合液。制备方法：制备金纳米粒子；将Walker与Track修饰到金纳米粒子表面；将标记的纳米金溶液与均相反应溶液混合；超支化杂交连锁反应、荧光检测；利用了核酸适配体的特异型识别，利用核酸适配体对目标物氨苄青霉素的高特异性检测；利用超支化杂交连锁反应放大，实现信号放大的作用。