本发明涉及甘蓝型冬油菜和芥菜型冬油菜杂交种的鉴定方法。利用该方法成功鉴定了甘蓝型冬油菜和芥菜型冬油菜杂交种为真杂种。一种鉴定甘蓝型冬油菜和芥菜型冬油菜杂交种的方法，其特征在于包括有以下步骤：（1）采样：（2）分别称取0.2?0.3g花蕾、花、角果后，分别用pH7.8的磷酸缓冲液，含2mmolASA、5mmol EDTA?Na2在冰浴下匀浆，12000r/min下离心10min，取上清液于?20℃冰箱中保存备用。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳，分离胶和浓缩胶浓度分别为7%和4%，pH值分别为8.8和6.8；电极缓冲液用Tris?甘氨酸系统，pH值8.3，上样量为30μL；电泳开始时，稳压100v，样品过浓缩胶后调制成200v,电泳时间约5h；电泳完成后放入染色液联苯胺溶液中染色，直至可见清晰的蓝色条带，流水冲洗后，照相保存；迁移率Rf值为原点到条带的迁移距离/原点到指示剂的距离。