一种肾前体细胞来源的分泌组及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN115992090B

    公开(公告)日:2024-09-10

    申请号:CN202211396936.1

    申请日:2022-11-09

    Inventor: 左为 张婷

    Abstract: 本发明属于细胞生物技术领域,具体涉及一种肾前体细胞来源的分泌组及其制备方法和应用,包括:S1:细胞复苏:将肾前体细胞复苏接种于铺有基底胶的第一培养皿中进行培养;S2:细胞传代:待肾前体细胞生长至60‑100%汇合度时,传代接种于铺有基底胶的第二培养皿中继续培养;S3:上清收集:待肾前体细胞生长至60‑100%汇合度时,弃去上清液并清洗肾前体细胞,将肾前体细胞加入DMEM培养基继续培养,随后收集肾前体细胞上清液;S4:预处理:将肾前体细胞上清液离心后,得到肾前体细胞来源的分泌组。与现有技术相比,本发明解决现有技术中缺少无创、可重复且低成本的细胞来源的问题。

    一种尿源性肾干细胞三维分化模型的构建方法及培养体系

    公开(公告)号:CN111961640B

    公开(公告)日:2023-05-12

    申请号:CN202010347932.9

    申请日:2020-04-27

    Inventor: 左为 张婷

    Abstract: 本发明提供了一种尿源性肾干细胞三维分化模型的构建方法及培养体系,所述的构建方法包括如下步骤:提取和二维细胞培养步骤,从尿液中提取干细胞,然后在滋养层细胞上,用尿源性肾干细胞培养液传代培养,得尿源性肾干细胞;三维细胞分化步骤,取尿源性肾干细胞加入尿源性肾干细胞培养液,重新混悬,得尿源性肾干细胞悬液,取支架材料,加入所述尿源性肾干细胞悬液培养,得三维分化模型;所述滋养层细胞为成纤维细胞,通过与其共培养,可以有效获得大量有活性、纯度较高的肾干细胞,同时也能很好地维持肾干细胞的特性,即自我更新能力和分化潜能,肾干细胞能在短期内在三维分化中形成再生组织和微器官以供移植治疗和药物筛选。

    抗菌肽hCAP18/LL-37在抗感染生物工程肺中的应用

    公开(公告)号:CN111973805B

    公开(公告)日:2022-03-01

    申请号:CN201910759373.X

    申请日:2019-08-16

    Inventor: 左为 张婷

    Abstract: 本发明公开了人工器官领域的抗菌肽hCAP18/LL‑37在抗感染生物工程肺中的应用。本发明将抗菌肽hCAP18/LL‑37应用在生物工程肺中,可解决器官移植术前和术后感染,避免抗生素滥用导致的抗药性问题。本发明提供的抗感染生物工程肺是表达抗菌肽hCAP18/LL‑37的肺脏干细胞移植到肺脏脱细胞支架所形成的肺脏。肺脏干细胞可以快速增殖,肺脏脱细胞支架的再细胞化时间为7天,大大缩短了生物工程肺的制备周期;表达的抗菌肽hCAP18/LL‑37使抗感染生物工程肺具有细菌清除能力,解决肺移植术前和术后的感染问题;本发明提供的抗感染生物工程肺可解决术后的排斥反应,避免免疫抑制剂对肝肾功能的影响。

    一种新型冠状病毒SARS-CoV-2感染的啮齿类动物模型及其构建方法和用途

    公开(公告)号:CN112674031A

    公开(公告)日:2021-04-20

    申请号:CN202011415763.4

    申请日:2020-12-03

    Inventor: 左为 张婷

    Abstract: 本发明涉及动物模型构建技术领域,具体提供了一种新型冠状病毒SARS‑CoV‑2感染的啮齿类动物模型及其构建方法和用途,所述构建方法包括如下步骤:肺损伤动物模型的构建:选用免疫缺陷的动物作为对象构建肺损伤动物模型;细胞移植:将人源肺上皮细胞移植入所述肺损伤动物模型的肺部;SARS‑CoV‑2病毒感染:将SARS‑CoV‑2病毒移植入经细胞移植步骤处理之后的动物肺部进行感染,建立新型冠状病毒SARS‑CoV‑2感染的啮齿类动物模型,该方法不仅构建过程简便,容易操作,构建成本低,而且能够最大程度上模拟正常的人肺组织结构和人ACE2受体蛋白表达情况。

    一种尿源性肾干细胞三维分化模型的构建方法及培养体系

    公开(公告)号:CN111961640A

    公开(公告)日:2020-11-20

    申请号:CN202010347932.9

    申请日:2020-04-27

    Inventor: 左为 张婷

    Abstract: 本发明提供了一种尿源性肾干细胞三维分化模型的构建方法及培养体系,所述的构建方法包括如下步骤:提取和二维细胞培养步骤,从尿液中提取干细胞,然后在滋养层细胞上,用尿源性肾干细胞培养液传代培养,得尿源性肾干细胞;三维细胞分化步骤,取尿源性肾干细胞加入尿源性肾干细胞培养液,重新混悬,得尿源性肾干细胞悬液,取支架材料,加入所述尿源性肾干细胞悬液培养,得三维分化模型;所述滋养层细胞为成纤维细胞,通过与其共培养,可以有效获得大量有活性、纯度较高的肾干细胞,同时也能很好地维持肾干细胞的特性,即自我更新能力和分化潜能,肾干细胞能在短期内在三维分化中形成再生组织和微器官以供移植治疗和药物筛选。

    一种采用成体肾前体细胞经悬浮分化培养构建肾微器官的方法和应用

    公开(公告)号:CN115322947B

    公开(公告)日:2024-02-09

    申请号:CN202210731783.5

    申请日:2022-06-25

    Inventor: 左为 张婷

    Abstract: 本发明涉及一种肾微器官构建方法,具体涉及一种采用成体肾前体细胞经悬浮分化培养后构建肾微器官的方法和应用,包括如下步骤:S1:对肾前体细胞进行传代培养,待生长至对数期且达到足够数量后,收集肾前体细胞进行悬浮培养,得到肾前体细胞团;S2:对肾前体细胞团进行分化培养3‑14天,得到肾微器官。与现有技术相比,本发明采用简便、快捷的尿液分离和悬浮分化培养方式就可诱导肾前体细胞分化成具有不同分化细胞群体且呈现类似于肾脏空间结构的迷你肾脏”,在药物筛选、生理病理学研究、个性化治疗、细胞治疗等方面具有良好的应用价值。

    一种肾前体细胞来源的分泌组及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN115992090A

    公开(公告)日:2023-04-21

    申请号:CN202211396936.1

    申请日:2022-11-09

    Inventor: 左为 张婷

    Abstract: 本发明属于细胞生物技术领域,具体涉及一种肾前体细胞来源的分泌组及其制备方法和应用,包括:S1:细胞复苏:将肾前体细胞复苏接种于铺有基底胶的第一培养皿中进行培养;S2:细胞传代:待肾前体细胞生长至60‑100%汇合度时,传代接种于铺有基底胶的第二培养皿中继续培养;S3:上清收集:待肾前体细胞生长至60‑100%汇合度时,弃去上清液并清洗肾前体细胞,将肾前体细胞加入DMEM培养基继续培养,随后收集肾前体细胞上清液;S4:预处理:将肾前体细胞上清液离心后,得到肾前体细胞来源的分泌组。与现有技术相比,本发明解决现有技术中缺少无创、可重复且低成本的细胞来源的问题。

    一种采用成体肾前体细胞经悬浮分化培养构建肾微器官的方法和应用

    公开(公告)号:CN115322947A

    公开(公告)日:2022-11-11

    申请号:CN202210731783.5

    申请日:2022-06-25

    Inventor: 左为 张婷

    Abstract: 本发明涉及一种肾微器官构建方法,具体涉及一种采用成体肾前体细胞经悬浮分化培养后构建肾微器官的方法和应用,包括如下步骤:S1:对肾前体细胞进行传代培养,待生长至对数期且达到足够数量后,收集肾前体细胞进行悬浮培养,得到肾前体细胞团;S2:对肾前体细胞团进行分化培养3‑14天,得到肾微器官。与现有技术相比,本发明采用简便、快捷的尿液分离和悬浮分化培养方式就可诱导肾前体细胞分化成具有不同分化细胞群体且呈现类似于肾脏空间结构的“迷你肾脏”,在药物筛选、生理病理学研究、个性化治疗、细胞治疗等方面具有良好的应用价值。

    一种成体肺干细胞外泌体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114480260A

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202210080879.X

    申请日:2022-01-24

    Inventor: 左为 张婷

    Abstract: 本发明涉及一种干细胞外泌体,具体涉及一种成体肺干细胞外泌体及其制备方法和应用,包括如下步骤:S1:将肺干细胞接种并进行培养,至密度达50‑90%融合时,收集肺干细胞;S2:将收集到的肺干细胞进行传代培养,待细胞生长至密度达60‑100%融合时,弃去培养基并洗涤,加入外泌体收集液培养;S3:收集培养得到的含外泌体的收集液并过滤;S4:混合过滤后的收集液和PEG溶液,静置过夜;S5:将外泌体‑PEG混合液离心,弃去上清液,经重悬后,得到成体肺干细胞外泌体。与现有技术相比,本发明制备了一种能够有效治疗慢性阻塞性肺病的成体肺干细胞外泌体,并通过结合雾化治疗的方式,得到了良好的治疗效果。

    一种成体肺干细胞外泌体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114480260B

    公开(公告)日:2024-02-09

    申请号:CN202210080879.X

    申请日:2022-01-24

    Inventor: 左为 张婷

    Abstract: 体,并通过结合雾化治疗的方式,得到了良好的本发明涉及一种干细胞外泌体,具体涉及一 治疗效果。种成体肺干细胞外泌体及其制备方法和应用,包括如下步骤:S1:将肺干细胞接种并进行培养,至密度达50‑90%融合时,收集肺干细胞;S2:将收集到的肺干细胞进行传代培养,待细胞生长至密度达60‑100%融合时,弃去培养基并洗涤,加入外泌体收集液培养;S3:收集培养得到的含外泌体的收集液并过滤;S4:混合过滤后的收集液和PEG溶液,静置过夜;S5:将外泌体‑PEG混合液离(56)对比文件Ashish Saxena et al..Extracellularvesicles from human airway basal cellsrespond to cigarette smoke extract andaffect vascular endothelial cells.《Scientific Reports》.2021,1-12.王飘飘 等.巨噬细胞来源的外泌体不同提取方法的比较《.中国药理学通报》.2018,第34卷(第4期),第589-592页.杨玥 等.不同细胞来源的外泌体在COPD中的研究进展《.基础医学与临床》.2020,第40卷(第12期),第1721-1726页.曾幸坤 等.干细胞在慢性阻塞性肺疾病中的研究进展《.右江医学》.2012,第40卷(第3期),第408-412页.程林 等.自体支气管基底层细胞治疗慢性阻塞性肺疾病的小样本探索性研究《.重庆医学》.2019,第48卷(第23期),第4012-4016页.Laura Pastor et al..ExtracellularVesicles from Airway Secretions: NewInsights in Lung Diseases《.InternationalJournal of Molecular Sciences》.2021,第22卷(第2期),1-20.Kirsi Rilla et al..Extracellularvesicles are integral and functionalcomponents of the extracellular matrix.《Matrix Biology》.2017,第201-219页.Hadi Rajabi et al..Emerging role ofexosomes in the pathology of chronicobstructive pulmonary diseases destructiveand therapeutic properties《.Stem CellResearch & Therapy》.2022,1-16 .

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