梅毒螺旋体IgM抗体Dot-ELISA检测方法

    公开(公告)号:CN105548578A

    公开(公告)日:2016-05-04

    申请号:CN201610100361.2

    申请日:2016-02-23

    CPC classification number: G01N33/68 G01N33/545 G01N33/56911 G01N2333/20

    Abstract: 梅毒螺旋体IgM抗体Dot-ELISA检测方法,涉及梅毒特异性IgM抗体的检测。制备重组抗原包被的硝酸纤维素膜;制备抗人γ链单克隆抗体;抗人μ链单克隆抗体的辣根过氧化物酶标记;硝酸纤维素膜洗涤;加入辣根过氧化物标记的抗人μ链单克隆抗体孵育;磷酸盐缓冲液洗涤,显色;加入磷酸盐缓冲液洗涤液漂洗,弃液体;结果判读:硝酸纤维素膜上斑点呈棕色阳性,无色为阴性。重组抗原包被的硝酸纤维素膜延长已包被抗原的保存时间,可实现单个样本独立保存,避免反复冻融造成的抗原变性;应用斑点酶联免疫吸附法检测梅毒特异性IgM抗体不需要特殊仪器,可实现大规模的筛查,应用范围广,实用性强。

    梅毒螺旋体心磷脂抗体定量检测试剂盒及其制备方法

    公开(公告)号:CN109212209A

    公开(公告)日:2019-01-15

    申请号:CN201811076255.0

    申请日:2018-09-14

    Abstract: 梅毒螺旋体心磷脂抗体定量检测试剂盒及其制备方法,涉及梅毒螺旋体。梅毒螺旋体心磷脂抗体定量检测试剂盒设有心磷脂抗原包被微孔板、辣根过氧化物酶标记的抗人Ig单克隆抗体、显色液A、显色液B、浓缩洗涤液、反应终止液、校准品和外包装盒。1)提取梅毒螺旋体外膜;2)提取梅毒螺旋体心磷脂抗原;3)制备心磷脂抗原包被微孔板;4)制备抗人Ig单克隆抗体;5)标记抗人Ig单克隆抗体的辣根过氧化物酶;6)提供校准品;7)提供显色液A;8)提供显色液B;9)制备浓缩洗涤液;10)制备反应终止液;11)制备梅毒螺旋体心磷脂抗体定量检测试剂盒。采用梅毒螺旋体来源的心磷脂抗原,实现梅毒螺旋体心磷脂抗体定量检测。

    梅毒螺旋体IgG抗体生物素亲和素酶联免疫检测试剂盒及其制备方法

    公开(公告)号:CN104155450A

    公开(公告)日:2014-11-19

    申请号:CN201410410477.7

    申请日:2014-08-20

    CPC classification number: G01N33/571 G01N33/531 G01N33/6842

    Abstract: 梅毒螺旋体IgG抗体生物素亲和素酶联免疫检测试剂盒及其制备方法,涉及梅毒的检测。试剂盒设有浓缩洗涤液瓶、阴阳性对照品瓶、生物素标记抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体瓶、辣根过氧化物酶标记亲和素瓶、TMB显色液A瓶、显色液B瓶、反应终止液瓶、包被有重组抗原微孔板。以梅毒螺旋体有传染性标准株Nichol株和梅毒螺旋体无传染性的标准株Reiter株,采用蛋白组学方法,通过双向电泳分离梅毒螺旋体蛋白质组,用不同病人或感染动物的血清鉴定出具有强免疫原性的蛋白质,寻找抗原标志物。用于梅毒确认试验,提高诊断灵敏度和特异性,缩短窗口期。可灵敏检测出梅毒螺旋体抗体并定量鉴定,价格便宜,操作简单,结果准确。

    梅毒螺旋体总抗体生物素亲和素酶联免疫检测试剂盒及其制备方法

    公开(公告)号:CN104155439A

    公开(公告)日:2014-11-19

    申请号:CN201410410641.4

    申请日:2014-08-20

    CPC classification number: G01N33/571

    Abstract: 梅毒螺旋体总抗体生物素亲和素酶联免疫检测试剂盒及其制备方法,涉及梅毒抗体的检测。试剂盒设有浓缩洗涤液瓶、阴阳性对照品瓶、生物素标记重组抗原瓶、辣根过氧化物酶标记亲和素瓶、TMB显色液A瓶、显色液B瓶、反应终止液瓶、包被有重组抗原微孔板。以梅毒螺旋体有传染性标准株Nichol株和梅毒螺旋体无传染性的标准株Reiter株,采用蛋白组学方法,通过双向电泳分离梅毒螺旋体蛋白质组,再用不同病人或感染动物的血清鉴定出具有强免疫原性的蛋白质,寻找抗原标志物。用于梅毒确认试验,提高实验诊断灵敏度和特异性,缩短窗口期。可灵敏检测出梅毒螺旋体抗体,可对其进行定量鉴定,价格便宜,操作简单,结果准确,环保无污染。

    梅毒螺旋体fla-A基因FQ-PCR检测试剂盒及其制备

    公开(公告)号:CN102634451A

    公开(公告)日:2012-08-15

    申请号:CN201210140509.7

    申请日:2012-05-08

    Abstract: 梅毒螺旋体fla-A基因FQ-PCR检测试剂盒及其制备,涉及一种试剂盒。试剂盒设有DNA提取试剂瓶、耐热DNA聚合酶瓶、PCR反应液瓶、标准品瓶、质控品瓶和包装盒;所述DNA提取试剂瓶设有蛋白酶K瓶、裂解液瓶、无水乙醇瓶、抑制物去除液瓶、第1清洗缓冲液瓶、洗脱液瓶、第2清洗缓冲液瓶和含收集管的离心柱;标准品瓶设有6个含fla-A基因的标准品质粒瓶;质控品瓶设有阴性质控品瓶和阳性质控品瓶。先筛选靶基因,再构建fla-A基因标准品质粒,制作fla-A基因检测试剂标准曲线后,再制备PCR反应液、耐热DNA聚合酶,建立样品处理方法后制备质控品,最后完成梅毒螺旋体fla-A基因FQ-PCR检测试剂盒。

    梅毒螺旋体实时荧光定量PCR多靶检测试剂盒及其制备

    公开(公告)号:CN102251052A

    公开(公告)日:2011-11-23

    申请号:CN201110232497.6

    申请日:2011-08-12

    Abstract: 梅毒螺旋体实时荧光定量PCR多靶检测试剂盒及其制备,涉及一种试剂盒。试剂盒设有DNA提取试剂瓶、耐热DNA聚合酶瓶、PCR反应液瓶、标准品瓶、质控品瓶和包装盒;所述DNA提取试剂瓶设有蛋白酶K瓶、裂解液瓶、无水乙醇瓶、抑制物去除液瓶、第1清洗缓冲液瓶、洗脱液瓶、第2清洗缓冲液瓶和含收集管的离心柱;所述标准品瓶设有6个含5个靶基因的标准品质粒瓶;所述质控品瓶设有阴性质控品瓶和阳性质控品瓶。先筛选靶基因,再构建多靶基因标准品质粒,制作多靶基因检测试剂标准曲线后,先后制备PCR反应液、耐热DNA聚合酶,建立样品处理方法后,制备质控品,最后完成梅毒螺旋体实时荧光定量PCR多靶检测试剂盒。

    一种从血块中快速提取DNA的方法

    公开(公告)号:CN106754871A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201611089595.8

    申请日:2016-12-01

    CPC classification number: C12N15/1003

    Abstract: 本发明公开了一种从血块中快速提取DNA的方法,该方法所用的装置包括一下离心管和一套接在该下离心管的上开口内的上套管,该上套管的上端开口,下端具有一100~150目的铜丝网;具体包括如下步骤:(1)将血块置于上套管的铜丝网上,离心,血块的滤液进入下离心管中,移除上套管;在步骤(2)所得的滤液中加入红细胞裂解液,充分混匀,离心,小心除去上清液而留下沉淀,接着震荡使沉淀混匀;(3)将蛋白酶K与步骤(2)所得物料混匀,用市售Blood Mini试剂盒纯化提取DNA。本发明的方法能够快速提取血块中的DNA,前处理步骤简单快速,安全方便,同时不会产生交叉感染。

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