一种重组巴斯德毕赤酵母发酵表达生产牛肠激酶(轻链)突变体工艺

    公开(公告)号:CN115323022A

    公开(公告)日:2022-11-11

    申请号:CN202210975611.2

    申请日:2022-08-15

    Abstract: 本发明公开了一种重组巴斯德毕赤酵母发酵表达生产牛肠激酶(轻链)突变体工艺,本发明涉及生物技术相关领域,包括对肠激酶菌种进行平板划线培养,对培养的种子液进行摇瓶培养,对摇瓶培养的种子液进行发酵罐培养,添加补料进行目标蛋白诱导表达,本发明所开发的重组肠激酶(轻链)采用酵母表达,所得重组肠激酶(轻链)rEK纯度高、活性强、性价比优越具有很强的国际市场竞争力,通过在肠激酶(轻链)的N端增加了KR两个氨基酸,提高重组肠激酶rEK的分泌表达量;同时将野生型第203位的G突变为S,提高酶的催化效率,通过在肠激酶(轻链)的C端添加组氨酸标签,简化纯化工艺步骤,提高产品纯度。

    一种pH不敏感高温耐受性HSL家族脂类水解酶及应用

    公开(公告)号:CN109971734B

    公开(公告)日:2021-04-13

    申请号:CN201910182203.X

    申请日:2019-03-12

    Abstract: 本发明公开了一种在酸性至碱性pH条件下都能够高效催化酯类水解的热稳定脂类水解酶Poc14及其应用。本发明所涉及脂类水解酶基因来自热泉细菌Porphyrobacter cryptus DSM12079,所述的脂类水解酶基因经大肠杆菌E.coli菌株异源表达后,在55℃达到最大酶活性,当pH值在6.5和8.5之间保持高活性,对于有机溶剂和金属离子有较强耐受性,在Tritonx100、甘油以及DMSO环境下有较强的酶学活性。该基因所编码的Poc14的热稳定性和对pH较强的适应性,使其可应用于废水处理、精细化工、制药和环境修复等高温、含盐和含有机溶剂条件下的工业生产。

    一种重组胰蛋白酶的生产工艺

    公开(公告)号:CN110511916A

    公开(公告)日:2019-11-29

    申请号:CN201910720623.9

    申请日:2019-08-06

    Inventor: 乐峰松

    Abstract: 本发明提供了一种利用酵母重组表达可溶性重组胰蛋白酶的生产工艺,使胰蛋白酶能高表达于上清液中,并可利用离子交换层析方法从发酵液上清中纯化获得重组胰蛋白酶原,通过自身催化获得高活性重组胰蛋白酶,在成本、收率、活性和纯度等技术指标方面远远优于大肠杆菌表达工艺,因此极具工业化生产价值。

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