一种同步促进刺五加胚性愈伤组织生长和黄酮累积的方法

    公开(公告)号:CN116965337B

    公开(公告)日:2023-12-01

    申请号:CN202311225996.1

    申请日:2023-09-22

    Abstract: 本发明公开了一种同步促进刺五加胚性愈伤组织生长和黄酮累积的方法,属于生物技术领域。本发明提供了电刺激在同步促进刺五加胚性愈伤组织生长和黄酮累积中的应用,所述电刺激的电流强度为100mA,处理时间为30min。具体包括对刺五加胚性愈伤组织依次进行电刺激和暗培养,所述暗培养的培养时间为28d;所述胚性愈伤组织为经过继代培养2个周期的胚性愈伤组织。本发明协调了诱导或调控下活性物质累积和细胞生长不能同时兼顾的问题,为利用植物细胞工程技术生产活性物质提供了技术支撑。

    一种通过胚挽救获得水曲柳与白蜡种间杂交F1代的方法

    公开(公告)号:CN116420620A

    公开(公告)日:2023-07-14

    申请号:CN202310426005.X

    申请日:2023-04-20

    Abstract: 本发明公开了一种通过胚挽救获得水曲柳与白蜡种间杂交F1代的方法,选择赤峰地区的白蜡树作为父本,选择哈尔滨地区本土优良水曲柳作为母本,在5月初,对雌花进行套袋、人工授粉、摘袋,授粉后35d开始取样,果实表面消毒后扒掉果皮获得无菌胚珠,将胚珠接种在发育培养基中,置于25±2℃环境下,黑暗培养7‑8周,胚珠逐渐发育成熟,然后转移至弱光条件下培养,光照强度为10μmol·m‑2·s‑1,光周期12h/d,温度25±2℃,子叶长出并转绿,对没有萌发的胚转入胚的二次萌发培养基中,光照强度为80μmol·m‑2·s‑1,子叶长出并转绿,将长出子叶的胚转移至幼苗生长培养基中,光照培养20‑25d,获得幼苗,该方法可以解决水曲柳与白蜡种间杂交中胚的畸形、幼胚败育、未成熟胚无法获得杂种植株等问题,对林木新品种选育具有重要的意义。

    一种基于CRISPR/Cas9的白桦基因编辑方法

    公开(公告)号:CN113430194B

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202011377672.6

    申请日:2020-11-30

    Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9的白桦基因编辑方法,以白桦中高度保守的BpPDS和BpUVR8为靶基因,在其保守结构域上分别选取了1个和4个靶位,共设计了5个靶序列,构造了pU3b‑sgRNA‑UBQ1‑Cas9转化载体。利用瞬时转染初步鉴定了5个靶序列与白桦基因组的适配度,稳定的农杆菌转化法被用于外源DNA的整合,初步说明BpPDS和BpUVR8‑1这两个靶位可以编辑白桦基因组;BpPDS与BpUVR8‑1稳定遗传转化的编辑效率分别为41.67%、100%,纯合单株的百分比分别为37.5%、100%。该方法的建立一方面,可用于初步鉴定载体的活性,筛选活性较大的靶位,提高转化效率;其次,可用于获得白桦CRISPR/Cas9突变体植株,方便生产规范化,对加快白桦功能基因的研究具有重要意义。

    一株产多种脂肪酸的内生真菌菌株及其应用

    公开(公告)号:CN110295116B

    公开(公告)日:2022-08-19

    申请号:CN201910680319.6

    申请日:2019-07-25

    Abstract: 本发明公开了一株产多种脂肪酸的内生真菌菌株及其应用。本发明首先提供了一株曲霉,所述曲霉为曲霉属(Aspergillus sp.)C1T2‑4,其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO:M 2019393。本发明进一步提供了包含上述曲霉的菌剂及其应用。本发明的曲霉属(Aspergillus sp.)C1T2‑4能产生15种脂肪酸,且具有高效α‑亚麻酸合成能力,从曲霉属(Aspergillus sp.)C1T2‑4生产的油脂中可分离得到7.15%α‑亚麻酸。曲霉属(Aspergillus sp.)C1T2‑4对于未来保健品、化妆品和工业用途的开发提供了优良菌株材料,具有重要价值。

    一种基于CRISPR/Cas9的白桦基因编辑方法

    公开(公告)号:CN113430194A

    公开(公告)日:2021-09-24

    申请号:CN202011377672.6

    申请日:2020-11-30

    Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9的白桦基因编辑方法,以白桦中高度保守的BpPDS和BpUVR8为靶基因,在其保守结构域上分别选取了1个和4个靶位,共设计了5个靶序列,构造了pU3b‑sgRNA‑UBQ1‑Cas9转化载体。利用瞬时转染初步鉴定了5个靶序列与白桦基因组的适配度,初步说明BpPDS和BpUVR8‑1这两个靶位可以编辑白桦基因组;稳定的农杆菌转化法被用于外源DNA的整合,BpPDS与BpUVR8‑1稳定遗传转化的编辑效率分别为41.67%、100%,纯合单株的百分比分别为37.5%、100%。该方法的建立,一方面可用于初步鉴定载体的活性,筛选活性较大的靶位,提高编辑效率;另一方面可用于获取白桦CRISPR/Cas9突变体植株,缩短育种周期,为深入研究白桦基因功能及其基因资源的开发利用提供宝贵的材料基础。

    一种通过不定芽直接萌发途径获得水曲柳再生植株的方法

    公开(公告)号:CN112106654B

    公开(公告)日:2021-05-18

    申请号:CN201910503829.6

    申请日:2019-06-12

    Abstract: 本发明公开了一种通过不定芽直接萌发途径获得水曲柳再生植株的方法,将水曲柳种子浸泡24h,去掉外种皮,表面消毒进行预培养,此时可以加柠檬酸钾处理;之后取下胚轴接种在不定芽诱导培养基上,暗培养2d下胚轴开始膨大,5d顶端形成突起,11d形成芽点,芽点生成率最高达到82.1%;将材料转入弱光下培养,芽点先生成叶片后生成不定芽,生成率最高为91.6%;之后在正常光照下通过两步法进行伸长培养,最终获得水曲柳再生植株。该方法的建立,可用于濒危植物水曲柳的保育,提高种群数量;也可以通过转基因方式改良水曲柳繁殖体系;还可以对水曲柳不定芽发育过程中相关基因的调控网络进行研究。

    一种快速繁殖水曲柳胚性细胞的方法

    公开(公告)号:CN110946073B

    公开(公告)日:2021-04-16

    申请号:CN201811130201.8

    申请日:2018-09-27

    Abstract: 本发明公开了一种快速繁殖水曲柳胚性细胞的方法,选取水曲柳愈伤组织,该愈伤组织来源可以是根、茎、叶、种子、胚等多种外植体,将愈伤组织接种在F4固体培养基中,培养1‑2个继代,可得水曲柳胚性愈伤组织;将松散的胚性愈伤组织接种到F4液体培养基中培养2‑3个继代,可以得到水曲柳单细胞和小细胞团。本发明的优点在于选择了F4培养基,该培养基除了常规的WPM基本培养基之外,选择30g/L的蔗糖和BA、NAA、IBA、TDZ四种激素组合,该培养基上的细胞涨势旺盛,只要在生长周期内继代就不会出现褐化死亡的现象。该方法的建立为水曲柳细胞规模化生产及次生代谢产物研究奠定基础。

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