一种非洲猪瘟病毒抗体的血清学检测方法

    公开(公告)号:CN113406065B

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN202110676027.2

    申请日:2021-06-18

    Abstract: 本发明涉及一种非洲猪瘟血清抗体IPMA检测试剂及其制备方法,所述检测试剂中非洲猪瘟病毒选择非洲猪瘟减毒株(HLJ/18‑7GD),感染细胞选择PK15细胞作为非洲猪瘟减毒株(HLJ/18‑7GD)的接种细胞。检测用抗原是感染细胞的全病毒,检测出的抗体能够较真实地体现抗体本身或接近抗体本身的血清反应,在非洲猪瘟缺乏针对所有毒株有效中和抗体的条件下,IPMA具备成为ASF血清学检测“金标准”的潜在价值。本发明的IPMA检测试剂在检测的敏感性上高于ELISA,特异性和检测时间上与ELISA检测相当,但对仪器设备要求较低,只需借助普通光学显微镜进行观察和判定,同时,IPMA检测结果可长期保存,便于后期实验结果整理与档案调取。

    表达绿色荧光蛋白的限制性复制西尼罗病毒系统及其应用

    公开(公告)号:CN106754982B

    公开(公告)日:2021-03-09

    申请号:CN201611154016.3

    申请日:2016-12-14

    Inventor: 华荣虹 步志高

    Abstract: 本发明公开了一种表达绿色荧光蛋白的限制性复制西尼罗病毒系统及其应用。本发明所述的表达绿色荧光蛋白的限制性复制西尼罗病毒系统包括西尼罗病毒限制性复制子质粒以及稳定表达西尼罗病毒C‑prM‑E蛋白的重组细胞系。使用本发明的系统获得的限制性复制西尼罗病毒(△WNV),该病毒在BWNV‑CME细胞系中具有与WNV全病毒相似的特性,且可以表达GFP,具有可视化效果,更重要的是,该病毒只能在本系统内进行复制,感染其他细胞时则不能产生仔代病毒,因此具有极高的安全性,可用于WNV中和抗体检测以及抗病毒药物筛选。本发明的提出提高了WNV相关操作的安全性与简便性,不依赖于BSL‑3高等级生物安全条件,为WNV疫苗评价、抗病毒药物筛选及病毒致病机制研究提供了良好的技术手段。

    无需噬斑克隆和筛选标签的山羊痘病毒重组系统及双表达PPRV H/F蛋白疫苗的构建

    公开(公告)号:CN106967748B

    公开(公告)日:2020-10-16

    申请号:CN201710197086.5

    申请日:2017-03-29

    Abstract: 本发明公开了一种无需噬斑克隆和筛选标签的山羊痘病毒重组系统及双表达PPRV H/F蛋白疫苗的构建,该重组系统不但可以构建单表达、双表达的重组病毒或重组疫苗,甚至可以构建表达三个蛋白以上的重组病毒或重组疫苗,由该重组系统获得的重组病毒,不需要任何筛选标签,避免了筛选标签对疫苗使用中存在的一些潜在不利影响。此外,本发明还公开了通过该重组系统制备的双表达小反刍兽疫病毒H和F蛋白且无筛选标签的重组山羊痘病毒,研究结果表明,该重组病毒能够诱导比单抗原表达更全面的细胞和体液免疫,能够同时预防PPR和羊痘两种重大疫病,且诱导的足够高的中和抗体有利于免疫血清学监测,因此在预防及治疗小反刍兽疫和山羊痘方面将具有良好的应用前景。

    无需噬斑克隆和筛选标签的山羊痘病毒重组系统及双表达PPRV H/F蛋白疫苗的构建

    公开(公告)号:CN106967748A

    公开(公告)日:2017-07-21

    申请号:CN201710197086.5

    申请日:2017-03-29

    Abstract: 本发明公开了一种无需噬斑克隆和筛选标签的山羊痘病毒重组系统及双表达PPRV H/F蛋白疫苗的构建,该重组系统不但可以构建单表达、双表达的重组病毒或重组疫苗,甚至可以构建表达三个蛋白以上的重组病毒或重组疫苗,由该重组系统获得的重组病毒,不需要任何筛选标签,避免了筛选标签对疫苗使用中存在的一些潜在不利影响。此外,本发明还公开了通过该重组系统制备的双表达小反刍兽疫病毒H和F蛋白且无筛选标签的重组山羊痘病毒,研究结果表明,该重组病毒能够诱导比单抗原表达更全面的细胞和体液免疫,能够同时预防PPR和羊痘两种重大疫病,且诱导的足够高的中和抗体有利于免疫血清学监测,因此在预防及治疗小反刍兽疫和山羊痘方面将具有良好的应用前景。

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