公开(公告)号：CN110530964B

公开(公告)日：2021-04-13

申请号：CN201910835803.1

申请日：2019-09-05

Applicant: 江南大学

Inventor： 杨刚龙 ,  陈文彦 ,  吴志猛 ,  李丹

IPC: G01N27/62

Abstract: 本发明公开了一种牛奶外泌体的特征性标志物及鉴定牛奶外泌体的方法，所述标志物为N‑连接糖链，所述N‑连接糖链的分子量和结构式为1599.5656(Man)5(Gal)1(GlcNAc)3以及2192.8088(Fuc)1(Man)3(Gal)2(GlcNAc)6。本发明筛选得到了2种可靠的牛奶外泌体特征性N‑连接糖链结构作为牛奶外泌体的标志物，利用该2种特征性N‑连接糖链能够实现简便、快速的鉴定外泌体，对于临床靶向载药的研究具有实际意义。

公开(公告)号：CN107541482B

公开(公告)日：2020-07-07

申请号：CN201610465781.0

申请日：2016-06-24

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴志猛 ,  赵鑫锐 ,  洪皓飞 ,  邓涛

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N9/52 ,  C12N15/57 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种构建大肠杆菌高效分泌表达转肽酶SortaseA的方法，属于基因工程领域。本发明成功实现了SortaseA在大肠杆菌中的高效分泌表达，解决了目前已有报道中该酶无法分泌表达且胞内表达水平较低的问题。在摇瓶水平，所得SortaseA产量可达90.2mg/L，胞外酶活水平可达34.2U/mL；为后续SortaseA的工业化生产奠定了基础。

公开(公告)号：CN110530964A

公开(公告)日：2019-12-03

申请号：CN201910835803.1

申请日：2019-09-05

Applicant: 江南大学

Inventor： 杨刚龙 ,  陈文彦 ,  吴志猛 ,  李丹

IPC: G01N27/62

Abstract: 本发明公开了一种牛奶外泌体的特征性标志物及鉴定牛奶外泌体的方法，所述标志物为N-连接糖链，所述N-连接糖链的分子量和结构式为1599.5656(Man)5(Gal)1(GlcNAc)3以及2192.8088(Fuc)1(Man)3(Gal)2(GlcNAc)6。本发明筛选得到了2种可靠的牛奶外泌体特征性N-连接糖链结构作为牛奶外泌体的标志物，利用该2种特征性N-连接糖链能够实现简便、快速的鉴定外泌体，对于临床靶向载药的研究具有实际意义。

公开(公告)号：CN110128540A

公开(公告)日：2019-08-16

申请号：CN201910314768.9

申请日：2019-04-18

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴志猛 ,  周志昉 ,  洪皓飞 ,  董笑飞 ,  鲍奕恺 ,  胡苗苗 ,  叶可嘉 ,  李舜岩 ,  俞杭艳

IPC: C07K16/42 ,  C12N9/24 ,  C07K19/00 ,  C12N15/70 ,  G01N33/68 ,  G01N33/66

Abstract: 本发明公开了一种基于便携式血糖仪的广谱二抗，具备两种功能域，分别行使结合IgG抗体和分解蔗糖的功能；其中，蔗糖分解后生成的葡萄糖可被便携式血糖仪检测。本发明成功实现了该广谱二抗在大肠杆菌中的可溶表达，证明了该广谱二抗在蔗糖水解能力和IgG抗体结合能力上不亚于游离的蔗糖酶和ZZ domain。并且本发明成功利用该广谱二抗对相关抗原指标进行了检测，检测结果符合理论结果。为其后续在即时检验技术中的应用奠定了基础。

公开(公告)号：CN105154378B

公开(公告)日：2018-04-06

申请号：CN201510440032.8

申请日：2015-07-23

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴志猛 ,  赵鑫锐 ,  洪皓飞

IPC: C12N1/21 ,  C12N9/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种高效分泌表达转肽酶Sortase A的方法，属于基因工程领域。本发明成功实现了利用诱导时添加甘氨酸的添加策略在重组大肠菌BL21(DE3)中胞外高效生产转肽酶Sortase A，解决了目前转肽酶Sortase A分泌效率低，发酵周期长的问题。本发明通过对目的蛋白载体以及发酵体系中添加剂和添加策略的优化，表明pET‑22b载体是适合Sortase A胞外生产的载体，采取两阶段添加甘氨酸(阶段一：诱导时添加终浓度为0.5％的甘氨酸；阶段二：诱导后6小时添加2％的甘氨酸)可以极大地提高大肠杆菌胞外生产Sortase A的水平。该发明第一次实现了Sortase A在大肠杆菌中的胞外高效生产，为后续Sortase A的工业化生产奠定了基础。

公开(公告)号：CN107541482A

公开(公告)日：2018-01-05

申请号：CN201610465781.0

申请日：2016-06-24

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴志猛 ,  赵鑫锐 ,  洪皓飞 ,  邓涛

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N9/52 ,  C12N15/57 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种构建大肠杆菌高效分泌表达转肽酶SortaseA的方法，属于基因工程领域。本发明成功实现了SortaseA在大肠杆菌中的高效分泌表达，解决了目前已有报道中该酶无法分泌表达且胞内表达水平较低的问题。在摇瓶水平，所得SortaseA产量可达90.2mg/L，胞外酶活水平可达34.2U/mL；为后续SortaseA的工业化生产奠定了基础。

公开(公告)号：CN105154378A

公开(公告)日：2015-12-16

申请号：CN201510440032.8

申请日：2015-07-23

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴志猛 ,  赵鑫锐 ,  洪皓飞

IPC: C12N1/21 ,  C12N9/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种高效分泌表达转肽酶Sortase A的方法，属于基因工程领域。本发明成功实现了利用诱导时添加甘氨酸的添加策略在重组大肠菌BL21(DE3)中胞外高效生产转肽酶Sortase A，解决了目前转肽酶Sortase A分泌效率低，发酵周期长的问题。本发明通过对目的蛋白载体以及发酵体系中添加剂和添加策略的优化，表明pET-22b载体是适合Sortase A胞外生产的载体，采取两阶段添加甘氨酸(阶段一：诱导时添加终浓度为0.5％的甘氨酸；阶段二：诱导后6小时添加2％的甘氨酸)可以极大地提高大肠杆菌胞外生产Sortase A的水平。该发明第一次实现了Sortase A在大肠杆菌中的胞外高效生产，为后续Sortase A的工业化生产奠定了基础。