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公开(公告)号:CN105087636B
公开(公告)日:2018-05-22
申请号:CN201510607096.2
申请日:2015-09-22
Applicant: 江苏农林职业技术学院
Abstract: 本发明公开了一种基于农杆菌注射法的番茄果实基因转化方法,首先进行农杆菌菌液培养,再选取不同成熟期的果实进行农杆菌注射,分别在注射后第三天、第五天、第七天将注射后的果实摘下,进行gus组织染色检测,最后检测gus基因表达量。本发明方法能够使基因在番茄果实中短时间内得到表达,比传统的转基因方法更快速,更便捷;因为本方法采用的是活体注射的方法,以往常规方法均不能够从根本上改变基因的表达量,也不能够在果实的生长发育过程中通过对某些基因的干扰或者超标达观察果实发育状况,本发明方法不仅仅简化了操作过程,而且能够通过对果实发育中一些基因表达量的改变来观察到番茄果实成熟发育中的变化,能够更加清楚的了解番茄果实成熟发育收那些基因的控制。
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公开(公告)号:CN107484663A
公开(公告)日:2017-12-19
申请号:CN201710893705.4
申请日:2017-09-27
Applicant: 江苏农林职业技术学院
IPC: A01H4/00
CPC classification number: A01H4/001
Abstract: 本发明公开了一种用于德国鸢尾初代培养的培养基,所述培养基由改良MS+ZT(1.1~1.3mg/L)+IBA(0.1~0.3mg/L)+葡萄糖(14~16g/L)+琼脂粉(5~7g/L)组成,培养基的PH值为5.6~6.0。本发明初代培养基中各种生长素配比合理,因此在初代培养过程中茎段就能够生根,即将初代培养和生根培养合为了一步,进而有效简化了培养流程,缩短了培养时间;使用本发明初代培养基能有效提高初代培养植株的萌芽数,并且植株生长健壮,有利于下一步继代扩繁;最后,本发明初代培养基中各组分原料易得,能够满足工厂化生产的需求量,有利于大量的组培生产。
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公开(公告)号:CN104195171B
公开(公告)日:2016-11-09
申请号:CN201410473471.4
申请日:2014-09-16
Applicant: 江苏农林职业技术学院
Abstract: 本发明公开了一种草莓‘红颜’高效快速稳定基因转化方法,包括菌种活化、植物材料准备、侵染、共培养、筛选培养、生根培养步骤,解决传统农杆菌介导法中农杆菌和杂菌的污染问题;解决草莓‘红颜’转化效率低的问题;解决草莓‘红颜’转基因从转基因、转基因检测、大田移栽周期长的问题,缩短周期;解决转基因检测工作量大,工作繁重的问题,简化检测方法,加快检测速度。在已经建立的‘红颜’草莓叶片再生体系的基础上,对影响根癌农杆菌转化‘红颜’草莓叶片的各项因素进行了研究,优化各种参数,简化操作过程,确定最佳转化条件。
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公开(公告)号:CN106047921A
公开(公告)日:2016-10-26
申请号:CN201610392195.8
申请日:2016-06-02
Applicant: 江苏农林职业技术学院
Abstract: 本发明公开了一种二倍体草莓的转基因培养基及其转基因方法,该转基因培养基包括:二倍体草莓种子培养基S1、二倍体草莓共培养培养基S2、二倍体草莓筛选培养基S3;该转基因方法包括:(1)菌种活化,(2)二倍体草莓转基因;本发明建立了一个高效、快速、稳定二倍体草莓转化体系,外植体采用叶片和叶柄,将材料最大程度的应用,提高了提高二倍体草莓转基因转化效率,转化率可达到50%以上;并且能够解决传统农杆菌介导法中的步骤繁杂,容易污染的问题,为进一步应用遗传转化方法改良草莓品种提供实践基础,有利于今后草莓分子育种工作的发展,本发明转基因方法操作过程简单,转化效率高,试验周期短,耗费人力物力较小。
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公开(公告)号:CN105969794A
公开(公告)日:2016-09-28
申请号:CN201610395014.7
申请日:2016-06-06
Applicant: 江苏农林职业技术学院
CPC classification number: C12N15/8205
Abstract: 本发明公开了一种使用草莓茎尖生长点的转基因方法,使用草莓茎尖生长点来做草莓转基因,可直接从田间取材操作,操作过程简单,没有材料的时间限制,不受外界环境影响,随时可以取样;茎尖生长点具有很强的脱分化和再分化的能力,生长点通过长成愈伤组织,再分化芽的过程来长成完整植株,由于生长点的分化能力极强,因此,愈伤组织生长和分化芽的过程都会极大地缩短,一般比叶片叶柄或者茎段分化芽的过程时间都要缩短一半,解决草莓转化效率低的问题,缩短转基因周期,减小转基因工作量和工作强度;此外,生长点分化芽的能力非常强,通常情况下分化芽的能力在100%,即使经过菌液侵染以后,分化能力也能够达到50%以上,这是明显高于叶片、叶柄等其他外植体的。
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公开(公告)号:CN105200080A
公开(公告)日:2015-12-30
申请号:CN201510614419.0
申请日:2015-09-24
Applicant: 江苏农林职业技术学院
Abstract: 本发明公开了一种番茄的高效快速稳定基因转化方法,包括以下步骤:1)菌种活化;2)植物材料准备;3)侵染;4)筛选培养。本发明的方法提高了番茄转基因效率,转化率可达到30%以上。将菌液浓度降低,侵染时间加长,即避免农杆菌污染,又提高了侵染效率。侵染菌液中不添加任何的辅助侵染的药品药剂(传统方法中常添加乙酰丁香酮等辅助侵染的药剂,会对叶片造成伤害,降低叶片再生能力),减小对番茄叶片的伤害,提高叶片培养的成活率和再生率。使用携带强表达报告基因的载体,通过观察可直接筛选得到转基因植株,避免传统的检测中繁琐的工作。缩短了转基因的周期。
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公开(公告)号:CN104082049B
公开(公告)日:2015-12-09
申请号:CN201410359758.4
申请日:2014-07-25
Applicant: 江苏农林职业技术学院
IPC: A01G1/06
Abstract: 本发明公开了一种全自动嫁接机,只要把育苗盘放在规定的位置进行定位就可以进行自动取苗,自动切割、对接固定;电控部分使用ARM单片机为中心,具有结构简单、体积小、设置方便等特点;机械部分采用坐标系方式精确定位,将砧木上苗和接穗上苗自动化,由机械将砧木和接穗切削,将砧木和接穗的切削处自动对齐,实现了苗木嫁接过程的全自动机械化;而且由于采用ARM方式控制,拥有更多的资源,有效减少了机械结构的复杂性。提高了工作生产效率。
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公开(公告)号:CN105075865A
公开(公告)日:2015-11-25
申请号:CN201510609195.4
申请日:2015-09-22
Applicant: 江苏农林职业技术学院
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种蓝莓美登初代培养的培养基,按照质量百分比由以下组分组成:改良WPM培养基12.724%、玉米素0.01%、吲哚丁酸0.002%、葡萄糖74.79%、植物凝胶12.474%。本发明还公开了上述培养基的制备方法和应用。本发明的培养基中的激素配比合理,将初代培养和生根培养合为一步,初代培养的过程中茎段就能够生根,简化培养流程,缩短培养时间;使用此初代培养基提高初代培养植株的萌芽数,植株生长健壮,有利于下一步继代扩繁。
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公开(公告)号:CN104230521A
公开(公告)日:2014-12-24
申请号:CN201410401532.6
申请日:2014-08-14
Applicant: 江苏农林职业技术学院
IPC: C05G3/00
Abstract: 本发明公开了一种木耳菜水培营养液,每升水培营养液中含有5-氨基乙酰丙酸2.5毫克,每升水培营养液中还含有40毫克的螯合铁;本发明在木耳菜水培营养液中添加了适当含量的5-氨基乙酰丙酸,能够提高光合作用的效率,叶片的呼吸活性增加,促进木耳菜大叶片的增大增厚,在组织分化和扩大气孔时能够有效抵御不良环境,生成的木耳菜营养含量丰富,植株健硕。
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公开(公告)号:CN104212832A
公开(公告)日:2014-12-17
申请号:CN201410473543.5
申请日:2014-09-16
Applicant: 江苏农林职业技术学院
Abstract: 本发明公开了一种使用农杆菌注射转化草莓果实的操作方法,该方法包括农杆菌菌液培养制备,农杆菌注射方法,注射后的GUS组织染色检测。将农杆菌菌液注射的方法进一步细化,注射时期按照草莓发育的不同时期进行细分,优化草莓果实注射过程中的各种因素和参数,找出影响草莓果实注射的原因,从多方面解决草莓果实注射转化法中存在的问题。建立高效、快速、稳定的草莓果实注射方法体系。
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