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公开(公告)号:CN108060114B
公开(公告)日:2019-03-01
申请号:CN201810033876.4
申请日:2018-01-15
Applicant: 金华利家园生物工程有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种发酵生产L‑丙氨酸的大肠杆菌及其应用,属于生物工程技术领域。本发明在能够发酵生产富马酸的大肠杆菌中引入天冬氨酸酶AspA和L‑天冬氨酸‑β‑脱羧酶AsD,进一步过量表达YgaW基因强化了重组菌中L‑丙氨酸的转运能力,构建了可以利用葡萄糖发酵生产L‑丙氨酸的新型菌种,利用该重组菌株在发酵罐中发酵45h,L‑丙氨酸产量达到147g/L,糖酸转化率79.0%。
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公开(公告)号:CN107937361B
公开(公告)日:2019-02-12
申请号:CN201810033877.9
申请日:2018-01-15
Applicant: 金华利家园生物工程有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种丙氨酸脱氢酶突变体及其应用,属于生物工程技术领域。本发明通过蛋白质工程改造嗜热古细菌(Archaeoglobus fulgidus)来源丙氨酸脱氢酶,使其最适酶活温度由82℃降至50℃,在大肠杆菌K12中删除L‑丙氨酸合成竞争路径上的关键基因,减少副产物生产,重组菌株中的编码L‑丙氨酸脱氢酶alaD基因和丙氨酸消旋酶dadX基因替换为改造后的嗜热古细菌来源的丙氨酸脱氢酶基因,利用该重组菌株进行在发酵罐中进行两阶段发酵,发酵42h,L‑丙氨酸产量达到153.9g/L,糖酸转化率81.0%。
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公开(公告)号:CN109266566A
公开(公告)日:2019-01-25
申请号:CN201811188465.9
申请日:2018-10-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种调节光滑球拟酵母渗透压胁迫的方法,属于生物工程领域。本发明通过过量表达或缺失本源转录因子的编码基因CgRDS2来调节光滑球拟酵母的抗渗透压胁迫能力。结果表明,光滑球拟酵母缺失CgRDS2基因后,与野生型菌株相比,在渗透压胁迫条件下生物量可降低23%,细胞活性下降46%,细胞膜完整性降低47.6%;过表达CgRDS2基因后,菌株在1.5M NaCl胁迫条件下,生物量增加10%,细胞活性增加39%,细胞膜完整性增加12.1%。
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公开(公告)号:CN104630297B
公开(公告)日:2018-07-06
申请号:CN201410746816.9
申请日:2014-12-10
Applicant: 江南大学
IPC: C12P9/00
Abstract: 本发明阐述了一种酶法非水相催化合成(R)‑3‑TBDMSO戊二酸甲单酯及其衍生物,属于生物工程技术领域。本发明涉及瑞舒伐他汀钙(Rosuvastatin)的制备,尤其是其中一关键中间体的制备方法。本发明公开一种采用Novozyme435酶法催化合成(R)‑3‑TBDMSO戊二酸单酯(R‑J6)及其衍生物的方法,采用本方法对酶转化条件进行了优化,反应24h后R‑J6产物含量可达67.1g/L,优化后的R‑J6的产量是优化前(优化前为4.5g/L)的14.倍;正交实验发现酶催化的影响因素主次顺序为:底物浓度>醇酐摩尔比>酶浓度;最优的酶转化体系为底物浓度250g/L,酶浓度60g/L,醇酐摩尔比2∶1,溶剂为异辛烷,催化温度为35℃,酶转化24h后,转化液中R‑J6含量可达68.9g/L,生产强度2.87(g/L·h)。
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公开(公告)号:CN107267405A
公开(公告)日:2017-10-20
申请号:CN201710525209.3
申请日:2017-06-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高光滑球拟酵母酸耐受能力的方法,属于生物工程领域。本发明利用过表达Med15B,使光滑球拟酵母在pH 2.0条件下,最终生物量提高59.2%,在pH 2.0条件下,12h时细胞生长量较出发菌株增加73.8%,细胞膜酵母甾醇、粪甾醇和麦角甾醇的含量分别提高了970%、16.6%和94.5%,细胞膜完整性和流动性增强,细胞低pH耐受性增大、生长能力增强,丙酮酸发酵能力较出发菌株提高100%。
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公开(公告)号:CN105861574A
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201610262363.1
申请日:2016-04-25
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12P7/46
Abstract: 本发明公开了一种利用米曲霉发酵产L?苹果酸的方法,属于发酵技术领域。本发明以米曲霉为生产菌株,向装液量20%的发酵培养基中,接入10%的孢子悬液,加入60~80g/LCaCO3,30~34℃通风培养120h。本发明采用米曲霉发酵糖质原料生产苹果酸,其产酸水平最高可达103.2g/L,原料价格低廉,成本低;并且,本发明是采用单菌发酵,需要的培养基成分简单,发酵条件简单易控制,还避免了与黄曲霉混合发酵会产生毒素的问题,本发明提供的以糖质原料发酵生产L?苹果酸的工艺具有重要的经济价值。
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公开(公告)号:CN105400813A
公开(公告)日:2016-03-16
申请号:CN201510997621.6
申请日:2015-12-28
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/88 , A61K38/00 , C12Y401/01015
Abstract: 本发明公开了一种重组表达人谷氨酸脱羧酶的毕赤酵母基因工程菌,属于基因工程技术领域。本发明将人谷氨酸脱羧酶基因GAD65与载体pPICZα连接构建表达载体pPICZα-hGAD65,电转至毕赤酵母X-33中,获得过量表达人谷氨酸脱羧酶(GAD65)的重组菌株。本发明的重组菌株经摇瓶发酵、Tricine-SDS-PAGE和Western Blot鉴定,证实人源谷氨酸脱羧酶(GAD65)实现了诱导表达,通过对发酵上清液进行分离纯化得到融合蛋白,经过蛋白浓度测定,蛋白hGAD65浓度达到2.36g/L。
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公开(公告)号:CN105400770A
公开(公告)日:2016-03-16
申请号:CN201510890264.3
申请日:2015-12-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子Crz1p调控光滑球拟酵母酸胁迫抗性的方法,属于生物工程领域。本发明通过对光滑球拟酵母的Cgcrz1基因进行缺失或者过表达,相应降低或者提高了菌株的酸胁迫抗性。本发明还比较了缺失突变菌株Cgcrz1Δ在酸胁迫下细胞膜脂肪酸、甾醇成份及比例和通透性,结果发现Crz1p是光滑球拟酵母抵御酸胁迫的必需转录因子,过表达Crz1p可提高光滑球拟酵母酸胁迫抗性。
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公开(公告)号:CN105018361A
公开(公告)日:2015-11-04
申请号:CN201510410296.9
申请日:2015-07-13
Applicant: 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种酿酒酵母高密度发酵培养的方法,属于发酵工程技术领域。以研究室从啤酒废酵母和白酒酒糟中筛选的酿酒酵母为生产菌株,在7L罐中进行高密度发酵培养,利用两阶段补料策略和发酵过程中通气量和搅拌的控制,最终酿酒酵母干重达到109.2g/L。本发明利用简单廉价的发酵培养基和补料培养基,通过科学合理控制发酵过程中各项参数,实现酿酒酵母的高密度发酵,为工业生产中酿酒酵母的高密度培养提供借鉴。
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公开(公告)号:CN104745617A
公开(公告)日:2015-07-01
申请号:CN201510179726.0
申请日:2015-04-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种促进谷氨酸棒状杆菌生长的方法,属于生物工程领域。本发明通过改造谷氨酸棒状杆菌构建了amn基因缺失菌株△amn,与野生菌株WT相比,基因amn缺失菌株细胞干重提高了16.2%,发酵10h、25h和40h的胞内ATP分别提高了3.0、3.7和2.2倍。amn基因的缺失提高了菌株的胞内ATP水平和生物量。
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