一种丙氨酸脱氢酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN107937361B

    公开(公告)日:2019-02-12

    申请号:CN201810033877.9

    申请日:2018-01-15

    Abstract: 本发明公开了一种丙氨酸脱氢酶突变体及其应用,属于生物工程技术领域。本发明通过蛋白质工程改造嗜热古细菌(Archaeoglobus fulgidus)来源丙氨酸脱氢酶,使其最适酶活温度由82℃降至50℃,在大肠杆菌K12中删除L‑丙氨酸合成竞争路径上的关键基因,减少副产物生产,重组菌株中的编码L‑丙氨酸脱氢酶alaD基因和丙氨酸消旋酶dadX基因替换为改造后的嗜热古细菌来源的丙氨酸脱氢酶基因,利用该重组菌株进行在发酵罐中进行两阶段发酵,发酵42h,L‑丙氨酸产量达到153.9g/L,糖酸转化率81.0%。

    一种调节光滑球拟酵母渗透压胁迫的方法

    公开(公告)号:CN109266566A

    公开(公告)日:2019-01-25

    申请号:CN201811188465.9

    申请日:2018-10-12

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 刘立明 吴承晋

    CPC classification number: C07K14/39 C12P7/40

    Abstract: 本发明公开了一种调节光滑球拟酵母渗透压胁迫的方法,属于生物工程领域。本发明通过过量表达或缺失本源转录因子的编码基因CgRDS2来调节光滑球拟酵母的抗渗透压胁迫能力。结果表明,光滑球拟酵母缺失CgRDS2基因后,与野生型菌株相比,在渗透压胁迫条件下生物量可降低23%,细胞活性下降46%,细胞膜完整性降低47.6%;过表达CgRDS2基因后,菌株在1.5M NaCl胁迫条件下,生物量增加10%,细胞活性增加39%,细胞膜完整性增加12.1%。

    一种酶法非水相催化合成(R)-3-TBDMSO戊二酸甲单酯及其衍生物

    公开(公告)号:CN104630297B

    公开(公告)日:2018-07-06

    申请号:CN201410746816.9

    申请日:2014-12-10

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 刘立明 王鸿江

    Abstract: 本发明阐述了一种酶法非水相催化合成(R)‑3‑TBDMSO戊二酸甲单酯及其衍生物,属于生物工程技术领域。本发明涉及瑞舒伐他汀钙(Rosuvastatin)的制备,尤其是其中一关键中间体的制备方法。本发明公开一种采用Novozyme435酶法催化合成(R)‑3‑TBDMSO戊二酸单酯(R‑J6)及其衍生物的方法,采用本方法对酶转化条件进行了优化,反应24h后R‑J6产物含量可达67.1g/L,优化后的R‑J6的产量是优化前(优化前为4.5g/L)的14.倍;正交实验发现酶催化的影响因素主次顺序为:底物浓度>醇酐摩尔比>酶浓度;最优的酶转化体系为底物浓度250g/L,酶浓度60g/L,醇酐摩尔比2∶1,溶剂为异辛烷,催化温度为35℃,酶转化24h后,转化液中R‑J6含量可达68.9g/L,生产强度2.87(g/L·h)。

    一种提高光滑球拟酵母酸耐受能力的方法

    公开(公告)号:CN107267405A

    公开(公告)日:2017-10-20

    申请号:CN201710525209.3

    申请日:2017-06-30

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高光滑球拟酵母酸耐受能力的方法,属于生物工程领域。本发明利用过表达Med15B,使光滑球拟酵母在pH 2.0条件下,最终生物量提高59.2%,在pH 2.0条件下,12h时细胞生长量较出发菌株增加73.8%,细胞膜酵母甾醇、粪甾醇和麦角甾醇的含量分别提高了970%、16.6%和94.5%,细胞膜完整性和流动性增强,细胞低pH耐受性增大、生长能力增强,丙酮酸发酵能力较出发菌株提高100%。

    一种利用米曲霉发酵产L-苹果酸的方法

    公开(公告)号:CN105861574A

    公开(公告)日:2016-08-17

    申请号:CN201610262363.1

    申请日:2016-04-25

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12P7/46

    Abstract: 本发明公开了一种利用米曲霉发酵产L?苹果酸的方法,属于发酵技术领域。本发明以米曲霉为生产菌株,向装液量20%的发酵培养基中,接入10%的孢子悬液,加入60~80g/LCaCO3,30~34℃通风培养120h。本发明采用米曲霉发酵糖质原料生产苹果酸,其产酸水平最高可达103.2g/L,原料价格低廉,成本低;并且,本发明是采用单菌发酵,需要的培养基成分简单,发酵条件简单易控制,还避免了与黄曲霉混合发酵会产生毒素的问题,本发明提供的以糖质原料发酵生产L?苹果酸的工艺具有重要的经济价值。

    一种酿酒酵母高密度发酵培养的方法

    公开(公告)号:CN105018361A

    公开(公告)日:2015-11-04

    申请号:CN201510410296.9

    申请日:2015-07-13

    Abstract: 本发明公开了一种酿酒酵母高密度发酵培养的方法,属于发酵工程技术领域。以研究室从啤酒废酵母和白酒酒糟中筛选的酿酒酵母为生产菌株,在7L罐中进行高密度发酵培养,利用两阶段补料策略和发酵过程中通气量和搅拌的控制,最终酿酒酵母干重达到109.2g/L。本发明利用简单廉价的发酵培养基和补料培养基,通过科学合理控制发酵过程中各项参数,实现酿酒酵母的高密度发酵,为工业生产中酿酒酵母的高密度培养提供借鉴。

    一种促进谷氨酸棒状杆菌生长的方法

    公开(公告)号:CN104745617A

    公开(公告)日:2015-07-01

    申请号:CN201510179726.0

    申请日:2015-04-15

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 刘立明 梅婕 陈坚

    Abstract: 本发明公开了一种促进谷氨酸棒状杆菌生长的方法,属于生物工程领域。本发明通过改造谷氨酸棒状杆菌构建了amn基因缺失菌株△amn,与野生菌株WT相比,基因amn缺失菌株细胞干重提高了16.2%,发酵10h、25h和40h的胞内ATP分别提高了3.0、3.7和2.2倍。amn基因的缺失提高了菌株的胞内ATP水平和生物量。

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