长春花金属硫蛋白Ⅱ型的基因序列

    公开(公告)号:CN1824780A

    公开(公告)日:2006-08-30

    申请号:CN200510009929.1

    申请日:2005-04-26

    Abstract: 一种长春花金属硫蛋白基因及其编码产物的氨基酸序列。本发明涉及一种新的基因序列。其特征在于:该基因全长481bp,在66bp处具有起始密码子ATG,287bp处具有终止密码子TGA,在474bp处具有polyA附加信号。该序列无内含子,具有222bp完整的开放读码框,编码73个氨基酸。所得的MT氨基酸序列与紫菀的该基因有65%同源性。本发明还提供了一种快速得到全长胁迫基因的方法。首先使用适度的干旱处理条件,使植物抗旱基因表达富集;然后通过构建全长的cDNA文库及测序,在最短的时间内得到抗干旱胁迫相关的全长基因。获得的抗旱基因直接构建在真核表达载体pCMV质粒上,可使用t3、t7通用引物进行测序。同时,可通过真核生物表达来直接进行筛选。本发明为运用基因工程技术提高植物抗干旱胁迫及品质改良提供了候选基因。

    一种高效制备紫杉醇的方法

    公开(公告)号:CN1227243C

    公开(公告)日:2005-11-16

    申请号:CN200410013559.4

    申请日:2004-02-18

    Abstract: 本发明涉及一种高效制备紫杉醇的方法。其特征在于将鲜物料进行匀浆空化生物半合成,再经负压空化混旋生物半合成及负压空化混旋两相培养处理;有机相浓缩至干,水相过滤得水相滤液,滤渣加入溶媒进行负压空化混旋固液萃取,合并萃取液,浓缩后与有机相浓缩物及水相滤液合并,加入柠檬酸或食草动物的胆汁经负压空化混旋处理,冷冻浓缩;浓缩物加入甲醇溶解,置入乙腈中,离心,活性炭脱色,得液体用乙酸乙酯萃取,萃取液水洗至中性,减压浓干。浓缩物用乙腈溶解,沉淀析出10-脱乙酰基巴卡亭III,母液浓缩分别经氧化铝柱层析和制备型高效液相层析及重结晶得紫杉醇晶体。

    长春花谷胱甘肽转移酶的基因序列

    公开(公告)号:CN1687422A

    公开(公告)日:2005-10-26

    申请号:CN200510009937.6

    申请日:2005-04-27

    Abstract: 一种长春花谷胱甘肽转移酶(Glutathione S-transferase)的基因序列及其编码产物的氨基酸序列。它涉及一种新的基因序列。其特征在于:该基因全长929bp,在56bp处具有起始密码子ATG,718bp处具有终止密码子TGA,在910bp处具有polyA附加信号。该序列无内含子,具有663bp完整的开放读码框,编码220个氨基酸。所述的核苷酸序列与辣椒(Capsicum chinense)全长基因GST1同源性高达67.7%,以及大戟属植物(Euphorbia esula)全长基因GST同源性高达57.7%。本发明还提供了一种快速得到全长胁迫基因的方法。首先使用适度的干旱处理条件,使植物抗旱基因表达富集;然后通过构建全长的cDNA文库及测序,在最短的时间内得到抗干旱胁迫相关的全长基因。获得的抗旱基因直接构建在真核表达载体pCMV质粒上,可使用t3、t7通用引物进行测序。同时,可通过真核生物表达来直接进行筛选。本发明从植物cDNA中分离出了谷胱甘肽转移酶的全长基因,该基因具有较强的抗氧化功能,在植物逆境胁迫过程中表达增加,起到去除氧自由基的作用。该基因的克隆扩大了植物抗旱研究的基因资源,为运用基因工程技术提高植物抗干旱胁迫及品质改良提供了更加丰富的优良候选基因。

    10-羟基喜树碱高效生产方法

    公开(公告)号:CN1172935C

    公开(公告)日:2004-10-27

    申请号:CN03111557.8

    申请日:2003-04-26

    Abstract: 一种10-羟基喜树碱高效生产方法,它包括喜树种子经负压空化混旋破壁、消毒,去除杂质,水培发芽,种芽与提取溶剂混合,匀浆固液萃取、过滤,负压空化混旋固液萃取,过滤,浓缩,负压空化混旋液液萃取,重结晶或硅胶柱层析,得10-羟基喜树碱。开辟了生产10-羟基喜树碱的植物提取新途径,提高了植物原料中10-羟基喜树碱的得率。取代了传统的物料干法粉碎、加热提取或机械搅拌萃取及大孔树脂吸附、逆流液液萃取等加工方法,应用了负压空化混旋破壁,匀浆萃取,负压空化混旋固液萃取和负压空化混旋液液萃取工艺。本发明具有工艺流程简单,生产周期短、提取率高、溶剂用量少等特点,10-羟基喜树碱得率为0.1~0.3‰,纯度在98%以上。

    一种高效制备紫杉醇的方法

    公开(公告)号:CN1534032A

    公开(公告)日:2004-10-06

    申请号:CN200410013559.4

    申请日:2004-02-18

    Abstract: 本发明涉及一种高效制备紫杉醇的方法。其特征在于将鲜物料进行匀浆空化生物半合成,再经负压空化混旋生物半合成及负压空化混旋两相培养处理;有机相浓缩至干,水相过滤得水相滤液,滤渣加入溶媒进行负压空化混旋固液萃取,合并萃取液,浓缩后与有机相浓缩物及水相滤液合并,加入柠檬酸或食草动物的胆汁经负压空化混旋处理,冷冻浓缩;浓缩物加入甲醇溶解,置入乙腈中,离心,活性炭脱色,得液体用乙酸乙酯萃取,萃取液水洗至中性,减压浓干。浓缩物用乙腈溶解,沉淀析出10-脱乙酰基巴卡亭III,母液浓缩分别经氧化铝柱层析和制备型高效液相层析及重结晶得紫杉醇晶体。

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