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公开(公告)号:CN116904493A
公开(公告)日:2023-10-20
申请号:CN202310588520.8
申请日:2023-09-19
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌的基因编辑系统的构建方法及其应用,实现了无痕基因敲除及敲入,属于基因工程领域。该方法首先筛选并拼接含有正负筛选标记的基因敲除/入盒,并构建组成型红色荧光表达盒,从而构建相应基因敲除/入质粒;然后将该质粒转入枯草芽孢杆菌,通过反复传代提高基因敲除/入盒替换靶基因的概率,之后通过无抗生素培养进行质粒消除;最后,通过仅含同源臂的消除质粒介导编辑后正负筛选标记的去除及质粒的可视化消除,实现基因的无痕编辑。本发明首次在枯草芽孢杆菌中构建含正负筛选标记及荧光标记的穿梭质粒,并实现了多个基因的无痕敲除及敲入。
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公开(公告)号:CN115058430B
公开(公告)日:2023-06-09
申请号:CN202210658740.9
申请日:2022-06-12
IPC: C12N15/12 , C12N15/70 , C07K14/705 , C07K14/435 , C07K16/28 , C07K16/06
Abstract: 本发明涉及一种拟穴青蟹5‑HT2受体基因及应用,该拟穴青蟹5‑HT2受体基因的基因序列如SEQ NO.1所示,本发明提供一种克隆拟穴青蟹5‑HTR2基因的克隆方法,根据5‑HTR2的EST序列设计引物,通过转录获得5‑HTR2 3’和5’RACE,与EST序列拼接后获得拟穴青蟹5‑HTR2基因全长序列,本发明还提供了一种制备拟穴青蟹5‑HTR2基因多克隆抗体的方法,与现有技术相比,本发明具有如下优点:拟穴青蟹5‑HTR2基因可能广泛参与了拟穴青蟹的行为机制,5‑HTR2受体基因的研究及其抗体的制备,将为蟹类行为、生理机制及5‑HT受体功能的研究奠定理论基础,也将为蟹的精细化养殖提供新的方向。
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公开(公告)号:CN115500297A
公开(公告)日:2022-12-23
申请号:CN202211185306.X
申请日:2022-09-27
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了一种拟穴青蟹循环水养殖系统(RAS)育苗方法,在养殖池池底的中心位置设置水泵,在养殖池外设置过滤装置,水泵通过管道I与过滤装置相连通;过滤装置的后面依次设置蛋白分离器、生物滤池和循环泵;循环泵通过管道II与养殖池相连通,养殖池、水泵、过滤装置、蛋白分离器、生物滤池和循环泵组成的循环水养殖系统;在幼体培育阶段进行水质管理,整个育苗过程不换水,养殖池的水经池中心的水泵被泵入过滤装置中,经过滤后流入蛋白分离装置,经悬浮物去除后再流入生物滤池,再经生物过滤后返回到养殖池内,从而实现水体循环利用。
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公开(公告)号:CN115058430A
公开(公告)日:2022-09-16
申请号:CN202210658740.9
申请日:2022-06-12
IPC: C12N15/12 , C12N15/70 , C07K14/705 , C07K14/435 , C07K16/28 , C07K16/06
Abstract: 本发明涉及一种拟穴青蟹5‑HT2受体基因及应用,该拟穴青蟹5‑HT2受体基因的基因序列如SEQ NO.1所示,本发明提供一种克隆拟穴青蟹5‑HTR2基因的克隆方法,根据5‑HTR2的EST序列设计引物,通过转录获得5‑HTR2 3’和5’RACE,与EST序列拼接后获得拟穴青蟹5‑HTR2基因全长序列,本发明还提供了一种制备拟穴青蟹5‑HTR2基因多克隆抗体的方法,与现有技术相比,本发明具有如下优点:拟穴青蟹5‑HTR2基因可能广泛参与了拟穴青蟹的行为机制,5‑HTR2受体基因的研究及其抗体的制备,将为蟹类行为、生理机制及5‑HT受体功能的研究奠定理论基础,也将为蟹的精细化养殖提供新的方向。
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公开(公告)号:CN108642069B
公开(公告)日:2021-09-03
申请号:CN201810491438.2
申请日:2018-05-21
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明涉及一种三疣梭子蟹COMT基因及应用,涉及三疣梭子蟹基因工程,该三疣梭子蟹COMT基因基因序列如SEQ NO.1所示,本发明还提供一种制备三疣梭子蟹三疣梭子蟹COMT基因重组蛋白的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)构建三疣梭子蟹COMT基因重组表达载体;(2)将步骤(1)所得重组表达载体导入宿主细胞,并将宿主细胞进行诱导表达,获得表达产物;(3)将分离纯化步骤(2)所得的表达产物,获得重组蛋白;与现有技术相比,本发明具有如下优点:三疣梭子蟹COMT基因可能广泛参与了三疣梭子蟹攻击行为的分子机制,在继左旋多巴和多巴胺受体激动剂后推入临床治疗波动症的较新一类药物开发上显示出较好的应用前景。
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公开(公告)号:CN108531614B
公开(公告)日:2021-07-27
申请号:CN201810367966.7
申请日:2018-04-23
Applicant: 宁波大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种用于鉴别青蟹的分子标记,包括有用于检测榄绿青蟹的基因片段,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1,用于检测拟穴青蟹的基因片段,其其核苷酸序列为SEQ ID NO:2;用于检测锯缘青蟹的基因片段,其其核苷酸序列为SEQ ID NO:3;用于检测紫螯青蟹的基因片段,其核苷酸序列为其核苷酸序列为SEQ ID NO:4。本发明通过筛选到的分子标记,通过高分辨率熔融曲线HRM对青蟹进行分型,从而快速、准确鉴别青蟹种质,为青蟹育苗养殖提供技术支持。
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公开(公告)号:CN108251542B
公开(公告)日:2021-05-11
申请号:CN201810235934.1
申请日:2018-03-21
Applicant: 宁波大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种用于鉴别拟穴青蟹和锯缘青蟹的方法,是提取待检测的青蟹样品的核酸样品,然后用PCR引物对扩增核酸样品进行基因分型;其中拟穴青蟹中对应的核苷酸片段的序列为SEQ ID NO:1:锯缘青蟹中对应的核苷酸片段的序列为SEQ ID NO:2。本发明所建立的方法能够有效的鉴别拟穴青蟹和锯缘青蟹,其通过高分辨率熔融曲线HRM对待检测的青蟹进行分型,从而快速、准确鉴别青蟹种质,为青蟹的育苗养殖提供技术支持。
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公开(公告)号:CN112690243A
公开(公告)日:2021-04-23
申请号:CN202011563966.8
申请日:2020-12-25
Applicant: 宁波大学
Abstract: 一种螃蟹养殖装置,包括:养殖箱组,该养殖箱组包括有本体(77)以及沿着该本体周缘间隔布置的至少两个养殖箱(7),各个养殖箱(7)上分别开设有进料口(70),且各个养殖箱(7)的进料口(70)于周向上逐一对齐设置;连接机构,用于连接所述养殖箱组并悬置于养殖池(1)上;第一驱动件(8),其动力输出端与上述养殖箱组连接,用于驱动所述养殖箱组转动;投料装置(2),设置在养殖池(1)上,包括有投料部,在所述养殖箱(7)发生周向转动的状态下,所述投料部能与任意一个养殖箱进料口(70)一一对应,进而完成对每个养殖箱(7)的投料。与现有技术相比,本申请仅需设置一个投料点即可完成投喂,且能促进水体流动。
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公开(公告)号:CN108570507A
公开(公告)日:2018-09-25
申请号:CN201810288966.8
申请日:2018-04-03
Applicant: 宁波大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种鉴别榄绿青蟹、拟穴青蟹和锯缘青蟹的SNP分子标记,所述的分子标记在榄绿青蟹中的核苷酸序列为SEQ ID NO:1、在拟穴青蟹中的核苷酸序列为SEQ ID NO:2、在锯缘青蟹中的核苷酸序列为SEQ ID NO:3。本发明提供一种鉴别榄绿青蟹、拟穴青蟹和锯缘青蟹的方法,所述的方法是通过待检测的青蟹样品中是否存在上述所提及的SNP分子标记来判断样品的种属。本发明获得了能够有效鉴别榄绿青蟹、拟穴青蟹和锯缘青蟹的SNP分子标记;在上述分子标记中设计引物,通过高分辨率熔融曲线HRM对青蟹进行分型,从而快速、准确鉴别青蟹种质,为青蟹的育苗养殖提供技术支持。
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公开(公告)号:CN108165641A
公开(公告)日:2018-06-15
申请号:CN201810242384.6
申请日:2018-03-22
Applicant: 宁波大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种鉴定条纹隔贻贝的方法,是对待检测的贻贝属个体用引物对进行PCR扩增,然后对扩增产物进行基因分型,其中条纹隔贻贝对应的核苷酸片段的序列为SEQ ID NO:1。本发明筛选获得了能够鉴别条纹隔贻贝的SNP位点,通过检测该SNP位点,利用高分辨率熔解曲线方法可以对条纹隔贻贝进行基因分型。本发明从分子水平对条纹隔贻贝品种进行鉴定,摆脱了靠表型进行鉴别的局限性。
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