公开(公告)号：CN101457231A

公开(公告)日：2009-06-17

申请号：CN200810051489.X

申请日：2008-11-28

Applicant: 吉林大学

Inventor： 雷连成 ,  杜崇涛 ,  韩文瑜 ,  孙长江 ,  冯新

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/55 ,  C12N15/33 ,  C12N1/21

Abstract: 本发明公开了一种菌影载体PMAL－E－SN的构建及其在大肠杆菌中的应用，以PhiX174噬菌体RFI质粒为模板进行PCR扩增，得到E基因；以金黄色葡萄球菌标准株ATCC25923基因组DNA为模板进行PCR扩增，得到SN基因；用十五个柔性氨基酸的Linker串连E基因和SN基因，得到E－SN基因；E－SN基因PCR扩增产物与pMD18－T载体连接，筛选阳性质粒pT－E－SN测序；用质粒载体PMAL－p2X和测序正确的重组质粒pT－E－SN构建菌影载体PMAL－E－SN。本发明的菌影载体PMAL－E－SN通过“tac”强启动子和malE翻译起始信号使E基因和SN基因获得高效表达，成功制备了大肠杆菌菌影，裂解效率可达99.99％；本发明引入次要杀伤基因SN，并联合E基因和SN基因连入高效表达载体PMAL－p2X，取得了良好的效果，可广泛应用于大肠杆菌菌影的制备。

公开(公告)号：CN101407580A

公开(公告)日：2009-04-15

申请号：CN200810051488.5

申请日：2008-11-28

Applicant: 吉林大学

Inventor： 雷连成 ,  杜崇涛 ,  孙长江 ,  冯新 ,  韩文瑜

IPC: C08G69/48 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明建立了一种合成三聚氰胺完全抗原的方法和应用单克隆抗体检测三聚氰胺的直接竞争ELISA试剂盒。试剂盒的组成包括：三聚氰胺酶标物、三聚氰胺标准液、包被三聚氰胺单克隆抗体的酶标板、底物显色液、洗涤液、终止液、酶标物稀释液及样品稀释液等。本发明建立了人工合成三聚氰胺完全抗原的方法，以多聚赖氨酸为载体制备单克隆抗体；应用单克隆抗体制备的ELISA试剂盒，具有简单、快速、处理样品量大、灵敏度较高、特异性强和价格低廉等诸多优点，适和工厂化生产，可对液态牛奶、奶粉、固体样品中三聚氰胺进行快速检测。